竹荪多糖提取工艺及抗氧化活性

采用缓冻协同微波法对竹荪中的多糖成分进行提取并进行工艺研究,依次考察缓冻时间、微波功率、液料比、提取时间对多糖得率的影响,在单因素试验基础上,运用响应面设计优化得到最佳提取工艺。利用1,1二苯基2三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、2,2'联氮双(3乙基苯并噻唑啉6磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法、羟自由基清除法、总还原能力4种试验,对比缓冻协同微波法提取得到的竹荪多糖(PW 1)和单一微波法获得的竹荪多糖(PW 2)的抗氧化活性,并借助高效液相色谱联用多角度激光散射(HPSEC MALLS RI)技术和红外光谱分析多糖初步结构。结果表明:最佳提取条件为缓冻时间16 h、微波功率260 W、液料比53 mL/g、提取时间8 min,在最佳提取条件下,PW 1的得率为11.87%。在4种抗氧化活性试验中,PW 1表现的抗氧化活性比PW 2更强。初步结构分析发现PW 1与PW 2分别是由4个主色谱峰和3个主色谱峰构成,并以α糖苷键连接为主的吡喃型糖,重均分子量均为1.018×10^(6)~14.980×10^(6)g/mol。

分级醇沉竹荪多糖的结构及抗氧化活性比较

通过缓冻协同微波法提取竹荪多糖,以20%~80%乙醇分级制备得到4种多糖组分,分别为PI-20、PI-40、PI-60和PI-80;采用UV、FI-IR、HPSEC-MALLS-RI、HPAEC对多糖结构进行分析.结果表明4种组分均含有少量蛋白质,但未检测到糖醛酸存在,PI-20和PI-40多糖含量均在50%以上;低浓度乙醇醇沉的多糖PI-20和PI-40的相对分子质量达到千万级,而高体积分数乙醇醇沉的多糖相对分子质量在万级水平;20%~60%醇沉多糖均由Gal、Glu和Man构成,PI-80仅由Glu和Man组成.4种醇沉多糖组分均具有一定的抗氧化能力,在3种抗氧化试验中,4种醇沉组分PI-80综合抗氧化能力最佳,清除ABTS自由基半抑制质量浓度为0.2484 mg/mL,PI-40综合抗氧化活性最弱,清除ABTS自由基半抑制质量浓度为2.9043 mg/mL.

基于深度神经网络与Box-Behnken响应面法的灵芝总三萜提取工艺优化

本文研究超声辅助提取灵芝总三萜工艺的优化方法。在单因素实验确定实验参数的大致范围和中心点的基础上,通过筛选实验设计Plackett-Burman(PB)发现对得率影响显著的3个因素(提取时间、超声功率、提取温度),并使用Box-Behnken响应面法进行工艺优化。结合所有实验数据使用基于Pytorch框架的Python学习程序建立深度神经网络(DNN),运用蒙特卡洛算法进行预测和寻优,同时还比较响应面法和深度神经网络两种建模方法。结果表明:通过深度神经网络可得到灵芝总三萜提取的最佳工艺条件(超声功率360 W、提取时间12 min、提取温度58℃、液固比17 mL/g、乙醇体积分数88%),此时预测的灵芝总三萜得率为1.878%,实际测得灵芝总三萜得率为1.805%。深度神经网络在不增加实验量的情况下对已有数据进行学习,可以预测得到更优的工艺条件,并且深度神经网络的非线性拟合能力相比于响应面法的多项式拟合有更强的数据处理能力,预测结果更准确。

双水相法萃取灵芝醇提液中三萜类化合物的工艺优化

通过构建无机盐-乙醇双水相体系萃取灵芝三萜类化合物.考察了13种无机盐与乙醇构成的醇-盐体系对灵芝三萜萃取效率,发现NaH_(2)PO_(4)-乙醇体系萃取率最高.采用单因素试验考察了NaH_(2)PO_(4)水溶液质量浓度、乙醇和NaCl质量分数、水相pH对回收率的影响,并通过正交试验得到优化的工艺条件:NaH_(2)PO_(4)、水、乙醇、灵芝醇提液的质量分数分别为10%、53%、27%和10%,水相pH值为5.同时还比较了双水相和碱提酸溶2种分离纯化方法,发现双水相法灵芝三萜萃取率为47.366%,高于碱提酸溶法的44.933%,且双水相法萃取过程更为简便绿色.

灵芝水溶性和碱溶性多糖的抗氧化性能比较研究

以沪农灵芝、龙芝2号子实体为原料,分别采用微波提取、碱提醇沉法得到灵芝水溶性和碱溶性多糖.水溶性多糖经体积分数30%、50%、80%乙醇分步沉淀,分别得到不同组分的多糖GLPa、GLPb和GLPc溶液;碱溶性多糖经DEAE-纤维素52柱和葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析,得到纯化的碱溶性多糖GLPj.采用高效凝胶渗透色谱对不同多糖组分的均一性进行了鉴定,同时测定了相对分子质量.结果表明,低体积分数乙醇沉淀得到的水溶性多糖GLPa相对分子质量达百万级,高体积分数乙醇沉淀得到的水溶性多糖GLPb和GLPc相对分子质量为十万级,碱溶性多糖GLPj相对分子质量小于1万.体外抗氧化活性实验表明,各灵芝多糖均具有还原能力,对羟基自由基及DPPH自由基具有一定的清除作用,灵芝水溶性多糖普遍比碱溶性多糖表现出更好的抗氧化活性,其中GLPa的各项能力较其他多糖均为最佳,抗氧化活性可能与相对分子质量有关.

利用大孔树脂分离灵芝菌丝体中水溶性抗氧化成分

通过静态吸附-解吸实验对8种不同极性大孔树脂对灵芝菌丝体中水溶性抗氧化成分的吸附进行筛选,确定中等极性的HPD-400大孔树脂为最佳.对上样后的大孔树脂利用不同体积比的乙醇(30%、50%、70%、95%)进行梯度洗脱,对比不同极性洗脱液的抗氧化活性,发现30%的乙醇可以洗脱绝大部分的抗氧化活性物质.将HPD-400大孔树脂分离后得到的30%乙醇洗脱物与水提物的体外抗氧化活性EC_(50)进行对比,结果表明经大孔树脂的富集,提取液的DPPH·清除能力可提高1倍,ABTS^(+)·清除能力可提高3倍,但羟自由基的清除能力有所降低,说明大孔树脂可有效富集具有DPPH·和ABTS^(+)·清除能力的水溶性抗氧化成分.