目的:分析富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨分裂原活化抑制剂(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路在其中发挥的作用。方法:收集2019年9月~2021年6月期间本院接受手...目的:分析富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨分裂原活化抑制剂(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路在其中发挥的作用。方法:收集2019年9月~2021年6月期间本院接受手术治疗的84例NSCLC患者癌组织与相应癌旁组织,实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定并比较各组织以及正常肺上皮细胞HBEpiC、NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292中SPARCL1信使RNA(m RNA)表达水平,选取A549、HCC827培养并分组,分为对照组、NC si RNA组、SPARCL1 si RNA组、U0126组(MEK/ERK特异性抑制剂)、SPARCL1 si RNA加U0126组,细胞计数法(CCK8)以及平板克隆法测定A549、HCC827细胞增殖,流式细胞仪测定A549、HCC827细胞凋亡,Transwell小室法测定A549、HCC827细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(western blot)检测SPARCL1、p-MEK、MEK、p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达。结果:SPARCL1在NSCLC组织中m RNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05);与HBEpiC细胞相比,NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292细胞中SPARCL1 m RNA表达水平降低(P<0.05);与对照组相比,SPARCL1 si RNA组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率降低(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05),U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05);与SPARCL1 si RNA组相比,SPARCL1 si RNA加U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:SPARCL1可能通过调控MEK/ERK通路影响NSCLC A549、HCC827细胞增殖、侵袭与凋亡。展开更多
文摘目的:分析富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨分裂原活化抑制剂(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路在其中发挥的作用。方法:收集2019年9月~2021年6月期间本院接受手术治疗的84例NSCLC患者癌组织与相应癌旁组织,实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定并比较各组织以及正常肺上皮细胞HBEpiC、NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292中SPARCL1信使RNA(m RNA)表达水平,选取A549、HCC827培养并分组,分为对照组、NC si RNA组、SPARCL1 si RNA组、U0126组(MEK/ERK特异性抑制剂)、SPARCL1 si RNA加U0126组,细胞计数法(CCK8)以及平板克隆法测定A549、HCC827细胞增殖,流式细胞仪测定A549、HCC827细胞凋亡,Transwell小室法测定A549、HCC827细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(western blot)检测SPARCL1、p-MEK、MEK、p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达。结果:SPARCL1在NSCLC组织中m RNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05);与HBEpiC细胞相比,NSCLC细胞A549、HCC827、H1299、H292细胞中SPARCL1 m RNA表达水平降低(P<0.05);与对照组相比,SPARCL1 si RNA组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率降低(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05),U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05);与SPARCL1 si RNA组相比,SPARCL1 si RNA加U0126组A549、HCC827细胞SPARCL1 m RNA表达水平与蛋白表达、凋亡率升高(P<0.05),OD_(450)、克隆形成数、侵袭细胞数、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:SPARCL1可能通过调控MEK/ERK通路影响NSCLC A549、HCC827细胞增殖、侵袭与凋亡。