新一代PEG在修饰抗原和药物缓释中的应用

聚乙二醇及其衍生物是具有许多优良性质的高分子化合物,由于良好的生物相容性、无毒、无免疫原性,广泛用于生物医学领域。本文总结聚乙二醇的发展历史和新一代聚乙二醇的特点,阐述聚乙二醇化修饰的目的,特别是在抗原修饰、血型改造和细胞移植等方面的应用,重点对聚乙二醇在药物缓释方面的应用进行了系统的综述。

阴道炎用药，跟着感觉走？

从幼年时期到老年阶段，女性的一生中都有可能感染阴道炎。阴道炎因治疗周期长、容易复发等原因，已成为许多女性的难言之隐。据世界卫生组织对中国妇女的调查显示，在我国的育龄女性中，约有41%患有不同程度的妇科炎症，已婚女性发病率更高达70％，其中阴道炎就是最常见的妇科炎症之一。然而，在遭遇阴道炎的时候，相当多的女性并不能及时到医院进行诊治，而是习惯于到药店买药，进行自我治疗，根据广告宣传、朋友的推荐买药，就能治好阴道炎吗？在阴道炎用药方面，女性真的可以跟着感觉走吗？

高强度聚焦超声消融子宫肌瘤的MRI评价

目的观察高强度聚焦超声(HIFU)消融治疗子宫肌瘤的客观疗效、不良反应和临床转归情况。方法2006年12月-2008年3月解放军第307医院参与多中心临床验证的子宫肌瘤确诊患者38例(包括多发肌瘤患者17例),使用HIFU治疗系统一次性消融治疗子宫肌瘤47个,其中肌瘤最大直径11.6cm。观察不良反应并定期随访,随访期间应用增强磁共振(MRI)评价HIFU治疗后子宫肌瘤的消融坏死体积及消融率,测量治疗后子宫和肌瘤体积的变化,判断临床转归规律。结果治疗后随访37例共46个肌瘤,增强MRI显示所有肌瘤均出现消融坏死区并持续存在,HIFU消融率为65.1%±21.7%。与治疗前相比,治疗后不同时间子宫和肌瘤体积均有显著缩小,1、3、6、12个月时子宫肌瘤的缩小率分别为24.1%±17.3%、39.8%±23.4%、44.6%±24.7%、60.3%±17.2%(F=15.31,P<0.01),呈现出随时间延长逐渐缩小的变化规律。HIFU治疗后的主要并发症为局部疼痛、发热等,均为轻中度,并可在1周内自行缓解。结论HIFU消融治疗子宫肌瘤安全可行,局部消融效果确切。

RNA干扰对肝素酶在肝癌细胞中表达及其肿瘤生长抑制的作用

目的:采用RNA干扰(RNAi)技术抑制肝癌细胞系HepG2肝素酶(Hpa)的表达,体内观察其对肿瘤生长的抑制作用.方法:以脂质体介导的方法将构建的2个抗Hpa短发卡式RNA(Hpa-shRNA)真核表达载体稳定转染人肝癌细胞株HepG2(高表达Hpa),并设空载体对照组;流式细胞技术鉴定转染稳定性,Western blot及RT-PCR检测肝素酶蛋白和mRNA表达;将干扰组和对照组的肿瘤细胞皮下接种裸鼠,比较各组肿瘤的体质量和体积大小,免疫组化法检测肝素酶在肿瘤组织的表达.结果:与空载体组相比,干扰后的HepG2细胞中Hpa mRNA和蛋白表达明显降低,干扰组裸鼠的肿瘤生长速度明显变慢,统计结果表明干扰组在抑制肿瘤生长方面与空载体组、空白对照组存在显著差异(P<0.05),两干扰组无显著差异(P>0.05).结论:应用RNAi技术沉默Hpa基因可以有效下调肝癌肿瘤细胞中Hpa mRNA及蛋白的表达,抑制体内肿瘤生长.

COX-1在宫颈恶性肿瘤组织中的表达及其意义

目的探讨环氧化酶-1(COX-1)在宫颈恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法收集1999年1月-2005年3月在解放军307医院行手术或活检的62例患者的组织标本,包括31例宫颈癌、15例宫颈上皮内瘤变、16例正常宫颈组织,应用免疫组化SP法检测3种组织中COX-1蛋白的表达差异,并分析COX-1蛋白与患者临床病理特征间的相关性。结果COX-1蛋白主要在细胞质中表达,其次在细胞膜上表达。COX-1蛋白在宫颈癌中呈强阳性表达,在宫颈上皮内瘤变中呈弱阳性表达,表达率分别为81%和13%,差异有统计学意义(P<0.01),而在正常宫颈组织中未见明显阳性表达。COX-1的表达与肿瘤分化程度、临床分期及患者年龄无明显相关性(P>0.05)。结论COX-1蛋白表达可作为宫颈癌的诊断、治疗选择及判断预后的辅助指标。

儿童及青少年卵巢恶性肿瘤

卵巢恶性肿瘤在<19岁的青少年、儿童中非常罕见,不到儿童所有恶性肿瘤的1%,却是最常见的青少年妇科恶性肿瘤。与成人卵巢肿瘤主要来源于上皮组织不同,青少年儿童卵巢肿瘤以生殖细胞肿瘤为主,包括畸胎瘤、性腺母细胞瘤、内胚窦瘤(又称卵黄囊瘤)、胚胎癌、多胚癌及绒癌。非生殖细胞肿瘤包括性索-间质肿瘤和上皮性肿瘤,性索-间质肿瘤包括卵泡膜-纤维瘤、Sertoli-Leydig细胞肿瘤及幼年型颗粒细胞肿瘤。与成人卵巢癌就诊时大多为晚期不同,青少年、儿童卵巢肿瘤患者就诊时大多处于临床早期,可行保守性手术。有效地治疗肿瘤的同时保留卵巢及生育功能是青少年卵巢肿瘤治疗的目标。

GST-π类同工酶基因在卵巢癌组织中的表达及其与癌变的关系

目的:检测GST- π基因在卵巢癌组织中的表达,探讨GST- π与卵巢癌癌变的关系。方法:采用免疫组化和RT- PCR 方法,检测正常卵巢及卵巢良、恶性肿瘤组织中GST- π m RNA 及蛋白水平的变化。结果:GST-π在卵巢组织中的表达与肿瘤的进展密切相关,即正常组织中GST- π几乎不表达,良性肿瘤中水平略有升高,交界性肿瘤多为低、中度表达,但阳性率明显升高,接近卵巢癌组织的水平。癌变组织则为中、高度表达且随临床分期的发展而逐渐增高。免疫组化与RT- PCR 的结果符合率较高,但以RT- PCR 法较为灵敏。结论:GST- π是与卵巢癌发生、发展密切相关的标志酶,它的表达异常与卵巢癌的预后有关。

环氧化酶-1在妇科恶性肿瘤诊断中的作用研究

目的 探讨血清环氧化酶 - 1(COX - 1)的检测在妇科恶性肿瘤诊断中的应用价值。方法 应用ELISA法检测血清COX - 1水平。结果 31例卵巢癌 ,4 5例宫颈癌 ,4 0例子宫内膜癌的患者 ,其血清COX - 1的浓度较正常对照组显著升高 (P <0 0 0 1) ,阳性率分别为 6 5 %、 71%和 5 5 % ,卵巢囊肿阳性率仅 8% ,14例子宫良性肿瘤全部为阴性。结论 血清COX - 1浓度的检测可作为妇科恶性肿瘤 ,尤其是卵巢癌和宫颈癌的辅助诊断指标。

异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取组织中的RNA

为寻找一种简便、低消耗、提取高质量ＲＮＡ的方法，基于异硫氰酸胍酚氯仿一步法，省去变性液Ｄ二次溶解ＲＮＡ提取组织中的ＲＮＡ。结果：从２００多例肿瘤组织中提取出高质量的ＲＮＡ，所需费用与购买试剂盒相比节约了７５％。结果提示：异硫氰酸胍酚氯仿一步法是一种简便、经济、适合大量样本的ＲＮＡ提取方法。

谷胱甘肽硫转移酶同功酶基因在食管癌组织中的表达

采用ＲＮＡ斑点杂交分析方法，对４０例食管癌组织和相对应的正常粘膜组织中谷胱甘肽硫转移酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴｓ）同功酶基因ＧＳＴπ、ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因的表达情况进行研究，结果食管癌组织中ＧＳＴπ基因表达阳性率为７７．５％，在相应的正常粘膜组织中表达的阳性率为９０．０％。在食管癌组织中ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因表达水平较低，表达阳性率分别为３５．０％和２０．０％，而正常粘膜组织中ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因表达的阳性率分别为２０％和１５％，ＧＳＴｓ在癌组织中表达阳性率与正常粘膜组织相比，Ｐ＞０．０５。ＧＳＴπ基因表达阳性率明显高于ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因，Ｐ＜０．０５。结果提示：ＧＳＴｓ同功酶基因在食管癌发生发展中基因转录水平增高，ＧＳＴπ是食管癌中ＧＳＴｓ同功酶存在的主要形式。

原发性食管癌组织中多药抗药性基因1的表达

用ＲＴＰＣＲ方法，定量检测了３０例食管癌和相应切断正常粘膜组织中多药抗药（ＭｕｌｔｉＤｒｕｇＲｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）性基因１的表达。结果：癌组织中３３．３％的病例存在ＭＤＲ１基因的表达，而相对应的切断正常粘膜组织中，仅有１３．３％的病例存在ＭＤＲ１基因的表达，皆为低中度表达。Ｐ＜０．０５，２者间差异有显著性。但ＭＤＲ１基因的表达与食管癌临床病理资料如性别、年龄、肿瘤大小、分级、淋巴结转移、ＴＮＭ分期等无关。结果提示：ＭＤＲ１基因的表达在食管癌的发生中起一定的作用，它可能与食管癌的原发性耐药有关。

RT-PCR检测食管鳞癌组织中GST-π基因的表达

为了解原发性食管癌组织中ＧＳＴπ基因的表达情况，用ＲＴＰＣＲ方法定量检测了食管癌组织及相对应的正常食管粘膜组织中ＧＳＴπ基因的表达。结果：在癌组织中ＧＳＴπ基因表达的阳性率为８０．０％，在癌旁正常粘膜组织中为８６．６％。但在癌组织中ＧＳＴπ基因表达的强度大于正常粘膜组织。食管癌组织分化越差，ＧＳＴπ基因阳性表达率越低，Ｐ＜０．０５。结果提示：在原发性食管组织中ＧＳＴπ基因存在较高频率的阳性表达，在食管癌的发生发展中可能起着重要作用。

PLGA包裹的紫杉醇缓释微球的理化性质及抑瘤活性研究

用化学材料聚乳酸和乙醇酸的共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)制备了紫杉醇缓释微球.用扫描电镜观察了微球的形态和大小,用HPLC法测定了紫杉醇在介质中的释放情况,用MTT法测定了IC50,通过荷瘤裸鼠实验评价了体内抑瘤活性.结果表明,PLGA-紫杉醇微球呈光滑球形,平均粒径7～37μm,微球包封率在90%以上.PLGA-紫杉醇微球具有缓释作用,其抑瘤活性与紫杉醇从微球内的释放密切相关,微球可以维持较长时间的有效药物浓度,达到了更好的抑瘤效果.

活体电穿孔法辅助HE4基因免疫小鼠制备单克隆抗体

目的：采用电穿孔辅助DNA免疫方法制备小鼠抗人附睾蛋白4（HFA）单克隆抗体（mAb）并对其生物学特性进行鉴定。方法：利用逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）从卵巢癌患者组织中获得人HFA基因编码序列，将其亚克隆至pPICZαA表达载体中并测序鉴定。采用活体电穿孔法免疫BALB／c小鼠。单抗制备采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合，经多次克隆化培养，筛选出特异分泌鼠抗人HFAmAb的杂交瘤细胞株。采用Westernblot，Ig亚型分析和mAb表位分析等对mAb的生物学特性进行鉴定。结果：获得2株持续、稳定分泌鼠抗人I-IFAmAb的杂交瘤细胞株，命名为1—7-C和3-12-C。ELISA和Westernblot结果均显示本实验获得的2株mAb能够特异识别有天然构象的HFA蛋白，2株mAb的Ig亚类均为IgM，轻链均为入链。结论：成功地构建了pPICZαA-HE4表达载体，并获得2株鼠抗人HFA杂交瘤，其所分泌的抗体能特异地识别HFA蛋白。

肺良性转移性子宫平滑肌瘤临床病理分析并文献复习

目的:探讨肺良性转移性子宫平滑肌瘤(benign metastasizing leiomyoma,BML)的临床病理学特点及临床治疗。方法:对1例肺良性转移性子宫平滑肌瘤进行临床资料、病理形态学形态及免疫组织化学观察,并结合文献对其诊断及鉴别诊断、临床治疗、预后进行探讨。结果:肿瘤形态类似子宫平滑肌瘤,瘤细胞呈梭形,无细胞的非典型性,未见坏死,核分裂像罕见。免疫组织化学染色示肿瘤细胞:ER、PR、SMA、Calponin强阳性。结论:BML非常罕见,肺是常见转移部位,因缺乏对其认识,易与其他肿瘤混淆导致误诊。提高对BML的认识对避免误诊非常重要。

霍介格运用风药治疗放射性肠炎经验撷菁

[目的]总结霍介格教授运用风药治疗放射性肠炎的临床经验。[方法]介绍霍师对放射性肠炎病因病机的认识,阐述风药的源流以及功效,分析霍师临床运用风药治疗放射性肠炎的依据,并附案例加以验证。[结果]霍师认为放射性肠炎是癌瘤消耗气、血、阴、阳的同时,放射线之"火、热、毒"邪入侵人体,损伤脾胃及肠道所致。病机总属本虚标实,病位在肠腑,病理因素为湿、气、毒、瘀、虚,且多夹杂并见,临证遣方可配伍风药祛风燥湿、疏肝理气、开阖玄府、化瘀通络、升阳举陷,针对放射性肠炎复杂的病因病机进行治疗,临床上收效甚佳。所举案例,霍师辨为脾气亏虚、湿毒内聚,治以健脾益气、祛风化湿解毒,以胃苓汤加减利水止泻、健脾祛湿,配伍白芷、升麻、羌活等风药,升举阳气的同时可防渗利太过,在整个组方中起到了画龙点睛之效。[结论]霍师治疗放射性肠炎,谨守病机,辨证选方的基础上灵活运用风药,为放射性肠炎临床治疗提供了新思路,值得学习效法。

霍介格运用和法治疗恶性肿瘤术后失眠验案4则

失眠是临床常见的症状,尤其是恶性肿瘤术后患者,多伴有不同程度的睡眠障碍[1],不仅影响其生活质量[2],还可导致免疫力下降及引起焦虑、抑郁等不良情绪,与原发病相互交织,形成恶性循环,影响疾病预后。霍介格教授为江苏省名中医,从医30余载,擅治各种肿瘤及其并发症,对恶性肿瘤术后失眠的诊治有着独到的见解,临证中常运用和法,疗效颇佳,现择其验案4则介绍如下。