不同剂量和免疫次数对鸡毒害艾美耳球虫免疫保护力的影响

以相对增重率(RBWG)、饲料转化率(FCR)和盲肠相对卵囊产量(ROP)为指标,评价了1次或2次分别以1×103个或3×103个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)孢子化卵囊(SO)/鸡剂量免疫接种后特异性免疫力的产生和持续时间。笼养岭南黄肉雏鸡于3日龄1次或3日龄和10日龄2次分别接种不同剂量的E.necatrix SO后,于17日龄(2次免疫组为24日龄)、34日龄和50日龄时以14×104SO/鸡剂量的同源卵囊攻虫,结果表明,免疫后2周卵囊接种鸡已产生坚强免疫力,1次免疫接种者(17日龄)高、低2个不同剂量组的RBWG、FCR和ROP分别为95.5%、2.32、24.54%和101.4%、2.32、21.1%;而2次免疫组(24日龄)的上述指标则分别为106.5%、2.44、9.3%和98.2%、2.38、7.48%。至34日龄和50日龄攻虫时,这些指标均有不同程度的下降,且随着时间延长,下降更为明显,但2次免疫处理组的这些指标均明显优于1次免疫者;同一次处理的不同剂量组间无明显差异。结果揭示,雏鸡口服免疫接种一定剂量的E.necatrix孢子化卵囊后可迅速诱导鸡体特异性免疫力的产生,但免疫保护力在笼养条件下持续时间较短。

新型鹅细小病毒研究进展

鸭细小病毒病是由鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)或番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)引起的一种传染病。经典MDPV和GPV毒株引起的病鸭主要症状为腹泻、脚软、渗出性肠炎,三周龄内雏鸭感染发病率和死亡率都很高。但是2008年下半年以来,福建省、浙江省、安徽省及江苏省等地的雏半番鸭和樱桃谷鸭陆续出现一种新型细小病毒病,该病发病率10%~30%,病死率低于3%,临床症状主要为软脚、短嘴和生长障碍。通过对该病病原进行全基因组测序及系统发育树分析,结果发现该病原与鹅细小病毒亲缘性很近。本文通过比较新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,N-GPV)与经典的MDPV和GPV在基因组、感染宿主范围和致病性的区别,为新型鹅细小病毒病的防控提供理论依据。

鸡胚接种毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix的免疫研究

给15、17、19日胚龄的鸡胚经羊膜腔分别接种不同剂量的毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子,出雏后在无球虫环境中笼养,收集2～7日龄间全部粪便,以饱和盐水漂浮法检查卵囊的产生,并于17日龄时以1.2×105个/鸡的同源孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、病变计分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)评价免疫保护效果.结果表明,孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种后对鸡胚的孵化率无明显影响,所有接种组在出雏后2～7日龄间均能检获后代卵囊,攻虫后各免疫组的相对增重率由攻虫对照的38%～42.9%提高到73.2%～90.5%,病变计分减少率达50%～74.9%,相对卵囊产量为攻虫对照组的28.1%～60.2%,表明以一定剂量的E. necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种鸡胚,可诱导鸡在出雏后笼养条件下对同源艾美耳球虫的免疫保护力;比较不同剂量、不同胚龄的免疫效果,发现在试验设定条件下于17日胚龄接种8×104个子孢子/胚的效果最好.

奶牛乳房炎常见致病菌多重PCR检测方法的建立

为建立同时快速检测奶牛奶样中无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌和金黄色葡萄球菌的方法,根据无乳链球菌sip基因、停乳链球菌isp基因、乳房链球菌pauA基因和金黄色葡萄球菌nuc基因各设计1对特异性引物,建立多重PCR检测体系。结果显示,该检测方法具有高特异性,无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌和金黄色葡萄球菌敏感性分别为105、104、105、105 CFU/mL。对临床采集的460份奶样检测结果表明,建立的多重PCR体系可以用于临床上无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌和金黄色葡萄球菌感染引起的奶牛乳房炎的检测。

奶牛乳房炎病原检测技术研究进展

奶牛乳房炎是危害奶牛业最重要的疾病之一,不仅给奶牛业造成了巨大的经济损失,而且其某些病原体可引起人类感染。引起奶牛乳房炎的病原多达150种,及时、准确的诊断乳房炎并检测出致病菌,对奶牛乳房炎的综合防治有着重要意义。目前,检测乳房炎病原的方法主要有细菌分离鉴定法、免疫学检测法、基因芯片和PCR检测技术等。本文就奶牛乳房炎病原检测技术进行系统阐述,旨在为奶牛乳房炎的综合防治提供参考。

恒温热隔绝式PCR技术的原理与应用

由于常规PCR所使用的加热机制为热传导的热循环仪,需要一个精密的数字控制器来快速加热和冷却样品。近年来,越来越多的研究致力于开发一种快速、便携式的核酸检测PCR平台。而自然对流作为另一种热转换方式,能促进液体自发反复循环以提供工作所需的变性、退火和延伸温度,在核酸检测领域有很大的应用前景。恒温热隔绝式PCR(insulated isothermal PCR,iiPCR)就是采用Rayleigh-Be′nard自然对流原理,利用仪器底部单一热源对特殊聚碳酸酯毛细反应管底部的紫铜圈接触加热,毛细管上部置入隔热挡板,上下的温度差从而使毛细管内部流体对流自发形成可供PCR扩增反应的连续的温度梯度,LED屏上直接显示检测结果。与传统的PCR检测方法相比,具有操作简便、快速高效、特异性强、仪器成本低等优点,已开始运用于临床各种病原体的检测。

牛乳中乳房链球菌PCR检测方法的建立

奶牛乳房炎是危害奶牛业最常见的疾病之一,对奶牛业造成了严重的经济损失。引起奶牛乳房炎的病原菌较多,其中乳房链球菌是常见的致病菌之一。为快速准确地检测样品中的该菌,参照GenBank公布的乳房链球菌pauA基因序列设计引物,建立了乳房链球菌的PCR检测方法。对460份临床奶样进行检测,传统细菌分离方法共检出11份(2.39%)阳性奶样;PCR方法共检出40份(8.70%)阳性奶样,2种方法的吻合率为93.7%。结果显示,建立的乳房链球菌PCR检测法敏感性高,特异性强,适用于临床检测。

异亮氨酸对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和肠道微生物的影响

研究旨在探讨饲粮添加异亮氨酸(isoleucine,Ile)对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和肠道微生物的影响。选取体重为(7.82±0.52)kg的杜×长×大健康仔猪180头,随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复5头仔猪。6组试验猪分别饲喂含0.78%(对照组)、0.87%、0.94%、1.01%、1.09%、1.16%Ile水平的饲粮。试验期为21 d。结果表明:饲粮Ile水平对断奶仔猪的平均日采食量、平均日增重和饲料转化率均无显著影响(P>0.05)。当饲粮中Ile水平为1.01%时,仔猪血清中免疫球蛋白A(IgA)水平显著高于0.87%、0.94%、1.09%、1.16%Ile水平(P<0.05)。饲粮Ile水平为0.94%时,尿素(UREA)水平显著高于0.78%Ile水平(P<0.05)。同时,当饲粮Ile水平为1.01%时,与0.78%Ile水平相比,提高了有益菌Norank_f_norank_o_Clostridia_UCG_014的丰度,增加了断奶仔猪肠道健康。综上所述,饲粮Ile水平对断奶仔猪的生长性能无影响,与0.87%Ile水平相比,1.01%Ile水平可以显著提高断奶仔猪的血清免疫水平和肠道有益微生物丰度。在本试验条件下,推荐8~17 kg断奶仔猪饲粮Ile水平为1.01%。

无乳链球菌恒温热隔绝式PCR快速检测方法的建立

为建立快速检测无乳链球菌的方法,本研究针对无乳链球菌表面免疫原性蛋白sip基因的保守区域设计特异性引物,建立了快速检测无乳链球菌的恒温热隔绝式PCR(iiPCR)方法。该检测方法能在30 min内迅速扩增出大量大小为105 bp的目的条带;并与肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、乳房链球菌、停乳链球菌均无交叉反应;检测下限为10~2拷贝/μL,优于普通PCR方法。本研究建立的检测方法具有操作简便、高特异性、高敏感性及高扩增效率的特点,适用临床或基层实验室使用。

过硫酸氢钾复合盐对鸡新城疫病毒杀灭效果观察

目的观察硫酸氢钾复合盐对鸡新城疫病毒的杀灭效果,为禽类圈舍消毒提供依据。方法采取悬液定量方法,对过硫酸氢钾复合盐杀灭鸡新城疫病毒的效果进行观察,同时与二氧化氯泡腾片作并行比较。结果以浓度为138 mg/L的过硫酸氢钾复合盐作用30 min,对悬液内鸡新城疫病毒达到完全杀灭;用浓度为1 300 mg/L二氧化氯消毒液作用10 min,可完全杀灭悬液内鸡新城疫病毒。结论低浓度过硫酸氢钾复合盐消毒液对鸡新城疫病毒有较好的杀灭效果。