蟾酥诱发人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用机制研究

目的探究蟾酥对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及可能作用机制。方法取雄性C57BL/6J小鼠30只,制备空白血清和不同浓度(2.5%和5%)的蟾酥含药血清。取传代培养MG-63细胞,实验分为3组:2.5%蟾酥含药血清组和5%蟾酥含药血清组分别加入相应浓度的蟾酥含药血清培养,对照组加入等体积PBS培养。CCK-8法检测MG-63细胞增殖活性,PNPP法检测细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红法检测细胞成骨能力,Transwell法检测MG-63细胞侵袭、转移情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率及MG-63细胞中整合素α4(Integrinα4)表达情况。结果不同浓度蟾酥含药血清组各时间点细胞增殖率均明显低于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组均明显低于同期2.5%蟾酥含药血清组(P均<0.05);不同浓度蟾酥含药血清组细胞凋亡率、ALP活性均明显高于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组均明显高于2.5%蟾酥含药血清组(P<0.05);茜素红染色显示,不同浓度含药血清组有橘红色结节、边界清楚细胞增多;不同浓度蟾酥含药血清组侵袭性细胞和转移性细胞数量均明显少于对照组(P均<0.05),Integrinα4表达占比均明显低于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组细胞数量均明显少于2.5%蟾酥含药血清组(P均<0.05),Integrinα4表达占比明显低于2.5%蟾酥含药血清组(P<0.05)。结论蟾酥可以促进MG-63细胞凋亡,抑制细胞增殖、侵袭和转移,改善细胞分化和成骨功能,机制可能与下调Integrinα4表达有关。

骨关节炎的氧化应激相关基因和免疫浸润分析

背景:目前对于骨关节炎的发病机制尚不清楚,缺乏有效控制疾病的手段,且研究多集中在免疫领域,对氧化应激领域研究较少。目的:探索氧化应激与免疫浸润在骨关节炎中的作用,并预测相关miRNA和治疗药物。方法:从GEO数据库中获取GSE55235数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)和GSE55457数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)进行合并,获取差异表达基因,并结合氧化应激基因得到差异表达氧化应激基因。对差异表达氧化应激基因进行KEGG、GO富集分析,并使用GSEA富集分析评价骨关节炎通路和生物过程。使用STRING在线平台和Cytoscape软件建立了蛋白质相互作用网络,运行Degree算法得到关键基因,从GEO数据库中获取GSE1919作为验证数据集,对关键基因进行差异分析及受试者工作特征曲线分析,得到核心基因。此外,用CIBERSORT对免疫浸润进行评估,并探索核心基因与免疫细胞的相关性,使用TargetScan对核心基因进行miRNA预测及使用DSigDB数据库对靶点药物进行预测。结果与结论:①确定了65个差异表达氧化应激基因和5个核心基因(IL1B、CXCL8、MYC、NFKBIA、JUN);②富集分析结果显示,差异表达氧化应激基因的主要聚焦点包括氧化应激、白细胞介素17、破骨细胞分化、流体剪切应力以及动脉粥样硬化等通路;③5个核心基因的受试者工作特征曲线下面积均>0.85,说明对诊断骨关节具有良好的特异性和敏感性,且与免疫细胞密切关联;④miRNA的预测结果是hsa-miR-3937,治疗小分子药物包括二甲双胍、离子霉素和塞来昔布等。结果表明:骨关节炎中存在氧化应激与免疫浸润,且免疫浸润参与激活氧化应激。核心基因及预测的miRNA可作为诊断骨关节炎的新型标志物,预测的小分子药物可治疗骨关节炎。

基于ERK5通路探讨蟾酥抑制人骨肉瘤MG-63细胞的作用机制

目的:研究蟾酥对人骨肉瘤细胞MG-63的作用效应及作用机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞MG-63,采用不同浓度的蟾酥含药血清(0%、2.5%、5%)进行干预,采用qPCR法检测各组c-myc、caspase-9的mRNA表达量,采用免疫荧光法检测各组整合素α4的含量并采用Western Blot法检测MEK5、Nur77的表达情况。分别采用ERK5抑制剂XMD8-92、XMD8-92联合5%蟾酥含药血清、MEK5过表达腺病毒干预人骨肉瘤细胞MG-63,采用Western Blot法检测c-myc、caspase-9及整合素α4的表达量。结果:相较于空白对照组(%),2.5%、5%蟾酥含药血清干预后的c-myc及整合素α4表达下降,caspase-9表达上升(P<0.05),且蟾酥含药血清干预后MEK5、Nur77表达下降(P<0.05),与干预浓度呈负相关;相较于5%蟾酥含药血清干预组,XMD8-92联合5%蟾酥含药血清组c-myc及整合素α4表达下降、caspase-9表达上升(P<0.05),而过表达MEK5联合5%蟾酥含药血清组的表达情况相反(P<0.05)。结论:蟾酥可以通过调控ERK5通路抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖、转移并促进细胞凋亡。

淫羊藿苷调节PTEN激活成骨基因表达缓解大鼠骨质疏松症的实验研究

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)调节PTEN激活成骨基因表达缓解大鼠骨质疏松症(OP)的相关作用机制。方法:术中收集患骨质疏松症和骨质正常者股骨骨髓8mL,诱导骨髓间质干细胞(BMSCs)成骨分化14d后,采用qRT-PCR检测PTEN的表达;随后选取7周龄的雌性大鼠36只,采用经典的雌性大鼠卵巢切除法复制绝经后骨质疏松症大鼠模型,术后12周鉴定为骨质疏松模型后开始给药干预,在同等饲养条件下造模大鼠以ICA处理或/和抑制PTEN表达治疗10周后,采取颈椎脱臼法处死大鼠,取双侧股骨干骺端骨组织,采用qRT-PCR法检测大鼠骨组织中PTEN及成骨基因(RUNX2、OPN)的表达、Western blot法检测成骨标志蛋白(RUNX2、OPN)的表达,并制成石蜡切片,采用IHC染色观察PTEN在细胞中的表达、HE染色观察骨组织微观结构。结果:PTEN在OP患者骨组织中高表达,诱导BMSCs成骨分化14d后表达被抑制,造模组大鼠骨组织中PTEN表达也较高,IHC染色见细胞中PTEN表达呈阳性、HE染色骨小梁明显稀疏;ICA处理或/和抑制PTEN表达后PTEN的表达被显著抑制,同时逆转了其对成骨基因表达的抑制作用,HE染色显示骨质疏松大鼠经ICA处理或/和抑制PTEN表达后骨小梁增多、排列紧密,部分新生骨组织形成,可有效缓解大鼠骨质疏松症。结论:ICA可有效抑制PTEN激活成骨基因表达,促进BMSCs成骨分化,缓解大鼠骨质疏松症。

两种内固定方式治疗股骨颈骨折的疗效比较

目的比较股骨颈复合加压系统(CCS)和倒三角空心钉(ITCS)内固定治疗股骨颈骨折的疗效。方法将50例股骨颈骨折患者按照内固定方式不同分为观察组(采用CCS固定治疗,25例)和对照组(采用ITCS固定治疗,25例)。记录两组手术时间、术中出血量、骨折愈合时间、拄双拐下地时间。采用Harris评分评价髋关节功能恢复情况。结果患者均获得随访,时间5~7个月。骨折均解剖复位。切口无感染,均一期愈合。手术时间、术中出血量两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);骨折愈合时间观察组明显短于对照组(P<0.05)。拄双拐下地时间:44例(观察组23例,对照组21例)于术后1.5个月,6例(观察组2例,对照组4例)于术后2.0个月。术后3个月Harris评分观察组明显高于对照组(P<0.05)。结论CCS和ITCS固定治疗股骨颈骨折均可获得满意疗效,但CCS固定治疗具有骨折愈合时间快、患者可早期功能锻炼、髋关节功能恢复较好的优势。

淫羊藿通过ICA-miR-335-5p轴缓解骨质疏松症的生物信息学分析及实验研究

目的:通过生物信息学结合动物实验探讨淫羊藿苷(ICA)上调miR-335-5p促进大鼠成骨分化缓解OP的分子机制。方法:利用TCMSP数据库筛选淫羊藿的主要活性成分及靶点,通过GEO数据库进行miR-335-5p的差异性分析,采用相应数据库预测miR-335-5p和OP的基因靶点,对淫羊藿、miR-335-5p和OP靶点求交集,筛选出淫羊藿干预miR-335-5p治疗OP的基因;利用Metascape数据库进行富集分析,并用String数据库构建PPI网络筛选出Hub基因后,在AutoDock Tools 1.5.6软件中进行分子对接,模拟药效结合过程;采用RT-qPCR测定miR-335-5p在OP患者骨组织、骨质疏松症大鼠骨组织的表达,并测定成骨诱导OP患者BMSCs分化14 d后的miR-335-5p表达,口服ICA和/或过表达miR-335-5p治疗骨质疏松症大鼠10周后,检测成骨基因的表达,HE染色观察大鼠股骨干骺端骨组织微观结构。结果:淫羊藿主要活性成分有23个、作用靶点有221个,淫羊藿调控miR-335-5p治疗OP的作用靶点有40个,富集分析涉及多条通路,分子对接结果显示淫羊藿苷与Hub蛋白均可形成稳定化合物发挥作用。实验研究发现,miR-335-5p在OP患者和OP大鼠的骨组织中低表达,ICA处理和/或过表达miR-335-5p可促进大鼠BMSCs成骨分化;HE染色显示造模大鼠经ICA处理和/或过表达miR-335-5p后骨小梁增多、排列紧密,部分新生骨组织形成,有效缓解了大鼠骨质疏松症。结论:淫羊藿苷可通过ICA-miR-335-5p轴促进大鼠成骨分化来缓解OP,为中药单体治疗OP提供了新的研究思路。

改良夹板外固定治疗克雷氏骨折

目的：通过改良夹板外固定和石膏托外固定治疗克雷氏骨折,对患者症状体征计分,比较改良夹板外固定和石膏托外固定方法治疗克雷氏骨折的临床疗效。方法：40例克雷氏骨折患者随机分为治疗组（改良夹板外固定组）和对照组（石膏托外固定组）,比较两组间的疗效。结果：对照组20例患者整复后16例X线片示骨折愈合,解剖对位,腕关节及前臂旋转功能正常,无疼痛;2例X线片示骨折愈合,功能复位,外观无明显畸形,掌倾角5°～9°,尺偏角16°～20°,腕关节及前臂旋转功能正常,偶有疼痛;2例X线片示骨折愈合,骨折远端轻度桡偏或背侧移位,腕关节功能轻度受限,局部轻度疼痛,劳累后加重,掌倾角0°～5°,尺偏角10°～15°。总的优良率为90%。治疗组20例治疗后18例X线片示骨折愈合,解剖对位,腕关节及前臂旋转功能正常,无疼痛;1例X线片示骨折愈合,功能复位,外观无明显畸形,掌倾角5°～9°,尺偏角16°～20°,腕关节及前臂旋转功能正常,偶有疼痛;1例X线片示骨折愈合,骨折远端轻度桡偏或背侧移位,腕关节功能轻度受限,局部轻度疼痛,劳累后加重,掌倾角0°～5°,尺偏角10°～15°。总的优良率为95%。整复1个月后治疗组症状体征积分（89.55±3.95）,对照组症状体征积分（83.75±4.09）（P〈0.05）,治疗组治疗效果优于对照组;整复3个月后治疗组和对照组症状体征评分比较没有明显差别（P〉0.05）。结论：改良小夹板外固定治疗克雷氏骨折早期疗效较好,操作简便,患者功能恢复快,痛苦小,优于石膏外固定。

过伸复位外固定法治疗胸腰椎压缩性骨折

目的:评价过伸复位外固定法治疗胸腰椎压缩性骨折的临床疗效和安全性。方法:将84例胸腰椎压缩性骨折患者随机分成两组,一组应用垫枕复位法,另一组应用过伸复位外固定法进行治疗,将患者复位前后的复位率及临床症状、体征评分进行比较。结果:过伸复位外固定治疗组在压缩椎体复位率和症状体征评分方面明显优于垫枕复位组,具有统计学意义(P<0.05),过伸复位外固定组各临床中心复位率比较无统计学意义。结论:过伸复位外固定法治疗胸腰椎压缩骨折,具有操作简单、安全、适应性广、疗效满意等优点。

手术联合抗生素珠链置入治疗慢性骨髓炎

目的:观察手术联合抗生素珠链置入治疗慢性骨髓炎的临床效果。方法:将50例慢性骨髓炎患者行病灶清除,根据细菌培养结果选用万古霉素或达力新,与骨水泥混合制成的抗生素珠链置入。结果:40例愈合,5例复发,再次置入后治愈。5例无效。结论:病灶彻底清除、联合抗生素骨水泥置入治疗慢性骨髓炎疗效确切。

加味桂枝加葛根汤治疗颈型颈椎病25例

本文通过探讨加味桂枝加葛根汤治疗颈型颈椎病的疗效,得出结论 :加味桂枝加葛根汤治疗颈型颈椎病疗效显著。

骨髓间充质干细胞成骨分化的研究进展

骨髓间充质干细胞的成骨分化是近10年来骨组织工程种子细胞的研究热点,本文查阅相关文献,对近年骨髓间充质干细胞成骨分化进行综述。

闭合空心螺钉治疗大龄儿童股骨头骨骺滑脱

股骨头骨骺滑脱（slipped capital femoral epiphysis,SCFE）是一种股骨头骨骺经生长板移位为特征的儿童和青少年髋关节疾病。[1]好发于11~16岁之间,患者常伴有肥胖、内分泌、代谢异常（如甲状腺功能减退、垂体功能减退）等疾病。此病因为发病率较低,临床上少见,容易造成误诊或漏诊,延误诊治,容易造成患者髋关节功能障碍。

中药熏洗疗法研究概况

从临床和动物实验研究等方面,对中药熏洗的作用机制、毒理学研究、体外透皮研究、仪器研究、方案研究、在踝关节损伤中的应用及禁忌症和注意事项的研究进展情况进行了系统的概述。参考文献25篇。

活血止痛散外洗治疗踝关节急性软组织损伤的临床研究

目的:优化活血止痛散外洗治疗急性踝关节损伤的治疗方案,建立踝关节损伤治疗技术操作规范。方法:纳入病例317例,随机分为6组,试验1组:药液40℃,外洗30 min;试验2组:40℃,60 min;试验3组:35℃,30 min;试验4组:35℃,60 min;试验5组:30℃,30 min;试验6组:30℃,60 min。用药0,3,7,10,90 d,患处以视觉模拟评分法(VAS评分)评定疼痛程度以及患踝肿胀消退比率、症状体征计分。结果:试验4组第10天VAS评分与其他试验组比较P<0.05,有统计学意义;试验4组第7天与第10天踝关节肿胀消退率、症状体征评分与其他试验组比较P<0.05,有统计学意义。结论:试验4组的治疗方法为活血止痛散外洗治疗踝关节损伤最优治疗方案。

“动静平衡”在胫骨平台骨折术后功能康复中的应用

目的:研究"动静平衡"原则指导胫骨平台骨折术后功能康复的作用。方法:选择60例胫骨平台骨折手术治疗后患者,随机分为四组,A组、B组、C组分别以不同的康复量进行功能活动,D组以传统的"无痛"功能康复方法指导功能活动。评价四组膝关节功能康复情况。结果:A组、B组、C组与D组在膝关节功能及活动度方面比较有显著性差异(P<0.05),A组、B组、C组间疗效比较无显著性差异(P>0.05)。结论:胫骨平台骨折术后在"动静平衡"原则指导下,可以在安全有效的康复范围内以最少的康复量达到最佳的治疗效果。

一次性被动活动法在胫骨平台骨折术后功能康复中的应用

目的:观察一次性被动活动法在胫骨平台骨折术后膝关节功能康复中的疗效。方法:选择胫骨平台骨折钢板内固定患者44例,随机分为两组,A组为主动活动组,B组为一次性被动活动组。对骨折愈合后的膝关节活动度(ROM)及膝关节功能进行评价。结果:B组的膝关节功能评分和ROM明显优于A组(P<0.05),尤其表现在膝关节活动度的恢复方面。结论:胫骨平台骨折术后一次性被动活动法功能锻炼对膝关节功能及关节活动度恢复具有良好疗效。

带锁髓内钉与加压钢板内固定治疗肱骨骨折后骨不连的疗效观察

目的探讨带锁髓内钉与加压钢板内固定在肱骨骨折后骨不连治疗中的应用价值。方法选取2018年4月至2019年4月山东中医药大学附属医院收治的76例肱骨骨折后骨不连患者,根据手术方式的不同分为髓内钉组(40例,采用带锁髓内钉内固定治疗)和加压钢板组(36例,采用加压钢板内固定治疗)。比较两组的手术时间、切口长度、术中出血量、手术效果、术后并发症发生情况等。结果两组手术时间比较差异无显著性(P>0.05)。髓内钉组的切口长度、住院时间、骨折愈合时间明显短于加压钢板组,术中出血量、术后引流量明显低于加压钢板组,差异有显著性(P<0.05)。髓内钉组的手术治疗优良率为95.00%,明显高于加压钢板组的83.33%,差异显著性(P<0.05)。末次随访时两组的日常生活能力评分均明显低于术前,且髓内钉组明显低于加压钢板组,差异显著性(P<0.05)。髓内钉组的术后并发症总发生率为2.50%,明显低于加压钢板组的16.67%,差异显著性(P<0.05)。结论与加压钢板内固定相比,带锁髓内钉内固定治疗肱骨骨折后骨不连的手术创伤小,术后并发症少,骨折愈合效果良好。

股二头肌长头肌腱断裂1例

患者,男,58岁,摔倒时左膝部着地并拉伤右大腿后内侧,伤时即感右大腿酸胀、疼痛以及左膝部疼痛,3 d后门诊就诊,医师详细查体并仔细阅片后以“右股二头肌长头肌腱断裂”于2020年12月7日收入院治疗。入院查体:患者右大腿后内侧酸胀无力,自觉异物感,行起立动作时酸胀症状加重,右大腿伸直活动略受限;右股二头肌肌力Ⅳ级,左股二头肌肌力Ⅴ级。

全膝关节置换术后股骨远端假体周围骨折1例

患者,女,75岁,10年前因左膝骨关节炎行左侧全膝关节置换术治疗,术后恢复良好。2020年10月12日,患者摔伤致左膝关节疼痛伴活动受限8 h至山东中医药大学附属医院就诊。查体:左膝关节疼痛肿胀,活动受限,可扪及骨擦感及异常活动,膝前侧可见一长约12cm手术愈合瘢痕,肢端血运、活动及感觉可。