免疫脂质体微泡造影剂的制备及体外靶向研究

目的 制备抗人肝细胞癌免疫脂质体微泡造影剂 ,并探讨其体外靶向作用。方法 采用静电吸附法将抗人肝细胞癌单克隆抗体HAb18结合到本试验室研制的脂膜氟烷微泡造影剂表面 ,制备免疫脂质体微泡造影剂 ;采用玻片凝集实验、荧光免疫染色实验证明抗体与脂质体微泡的结合 ;通过花环形成及花环形成阻断实验研究免疫脂质体微泡的靶向作用。结果 静电吸附法可使单抗HAb18牢固地结合到脂质体微泡上 ;免疫脂质体微泡围绕靶细胞形成花环 ,花环形成率达 90 %以上。结论 采用静电吸附法制备的免疫脂质体微泡造影剂在体外能与人肝癌细胞高效特异结合。

一种新型声学造影剂对兔肾VX2肿瘤显像的实验研究

目的 通过与增强CT对比研究评价本科实验室制作的声学造影剂“脂氟显”对兔肾VX2肿瘤显像的能力。方法 14只左肾种植有VX2肿瘤的家兔 ,超声造影前和造影后观察肿瘤的大小、数目和能发现的最小肿瘤 ,在 2 4h内做CT平扫和增强对照 ,实验完后处死动物与病理对照。结果 14只兔声学造影后共发现 46个肿瘤 ,增强CT发现的肿瘤数为 44个 ,P值 0 .3 3 6,相关系数r =0 .988,病理肿瘤 5 2 ,与声学造影比较P值 0 .0 82 ,相关系数r=0 .978。声学造影能观察到最小肿瘤直径 0 .3 2cm ,增强CT发现的最小肿瘤直径 0 .3 2cm ,和病理比较无显著性差异。结论 脂氟显能有效增强兔肾肿瘤的显像 ,提高肾脏肿瘤的检出率 ,与增强CT相当 ,对肾窦肿瘤优于增强CT。

动脉血栓模型建立的方法学研究

目的建立一种简单、快速而又适合超声评价的动脉血栓模型。方法25只新西兰大白兔,分为3组,分别采用FeCl3化学腐蚀法(A组)、注入凝血酶法(B组)及动脉钳夹+挤压血管外膜法(C组)建立动脉血栓模型。结果A组及B组实验兔均成功建立腹主动脉血栓模型。C组兔股动脉梗阻性血栓模型成功建立,但实验段腹主动脉未见血栓形成。FeCl3腐蚀法形成的血栓为一种混合型血栓。结论FeCl3诱发的血栓模型可靠、形成简便、快捷,结构更接近于临床自发性血栓形成的组织学形态特征,有助于血栓症诊断与治疗实验的科学性和可信性。

携ICAM-1单抗超声造影剂体外评估兔腹主动脉内皮损伤实验研究

目的 探讨携ICAM 1单抗的超声造影剂评价血管内皮损伤的可行性及其价值。方法 FITC标记自制含氟碳声振白蛋白造影剂及携ICAM 1单抗的靶向超声造影剂。新西兰大白兔 8只 ,高脂饮食建立内皮损伤动物模型后 ,取兔腹主动脉做冰冻病理切片 ,随机分两组 ,分别滴加非靶向造影剂、靶向造影剂 ,比较两种微泡内皮分布情况及相应荧光染色度的差异。结果 靶向造影剂组内皮黏附微泡明显增多 ,荧光染色较强。结论 携ICAM 1单抗的造影剂微泡可靶向黏附于损伤内皮 。

动脉血栓靶向超声显像的体内实验研究

目的 探讨白蛋白血栓靶向超声造影剂体内增强动脉血栓超声显像的效果。方法 采用FeCl3 溶液诱发 3 0只健康新西兰大白兔腹主动脉非梗阻性新鲜血栓形成;经耳缘静脉团注 0.0 4ml/kg的白蛋白超声造影剂进行超声造影,分为靶向组(2 0只)和非靶向组(10只);采用视觉观察评价血栓显像增强效果。结果 2 9只(2 9/3 0 )兔模型建立成功;造影后视觉观察,靶向组 18例达到 2级增强效果,1例为 1级增强效果,1例死亡;非靶向组仅 2例达到 1级增强效果,两组比较差异显著(P <0.0 1)。结论 白蛋白血栓靶向超声造影剂可显著增强兔腹主动脉内新鲜血栓超声显像效果。

声学造影剂脂氟显的理化特性与实质性器官增强实验

目的 检测新型长效脂质声学造影剂“脂氟显”的基本物理化学特性 ,并观察其在实质性器官的持续增强效果。方法 用光镜观察微泡大小形态 ;用血球分析仪测定微泡浓度 ;Zeta SIZER 30 0 0电位仪测定 PH值及表面电位 ;粘度仪测量造影剂粘度。在体实验用 VX2肝肿瘤模型 ,观察肿瘤增强显影效果。实验超声诊断仪采用西门子 Sequoia5 12 ,脂质声学造影剂经耳缘静脉团注入 ,剂量 0 .0 2 ml/ kg。结果 新型长效声学脂质造影剂微泡的粒径范围为 3- 10μm,其中 98%在 8μm以下 ,多为 4μm;微泡浓度为 7× 10 9/ ml;p H值为 6 .4 2 ;生理盐水稀释 2 5倍后 ,造影剂黏度为0 .75 ;微泡表面电位为 (- 35 .5± 4 .0 ) mv。在体实验中 ,持续增强兔肝脏 VX2肿瘤长达 4 0 - 6 0 min。结论 新型脂质声学造影剂的物理化学性质中未发现有潜在的生物有害作用 ,在体实验中长时间持续增强实质器官。

三种兔肾VX2肿瘤模型制作方法的比较

目的 探讨三种建立兔肾 VX2肿瘤模型方法的有效性。方法 研究对象为健康家兔 36只 ,动物模型建立采用三种方法 :1超声引导下肿瘤组织混悬液注射法 ;2手术直视下肿瘤组织块包埋 ;3手术直视下肿瘤组织混悬液注射法。结果 健康成年家兔 36只 ,成功建立 VX2肿瘤模型共 2 6只家兔。其中采用超声引导下肿瘤组织混悬液注射法接种 2 2只家兔的 2 8个肾脏 ,其中 10只家兔接种成功 ,成功率为 (10 /2 8) 35 .71% ;手术直视下肿瘤组织块包埋法接种 12只家兔 ,接种成功 4个左肾 ,成功率 (4 /12 ) 33.33% ;手术直视下肿瘤组织混悬液注射法接种 14只家兔左肾 ,成功 12只 ,成功率 (12 /14 ) 85 .71%。结论 三种建立兔肾 VX2肿瘤模型的方法是可行的 ,其中手术直视下肾内 VX2肿瘤组织混悬液注射法建立兔肾

人BLyS免疫抑制分子的克隆、表达及纯化

目的用异源性T辅助细胞表位修饰人可溶性BLyS突变体(msBLyS),构建和表达BLyS的新型免疫抑制分子。方法经PCR方法构建msBLyScDNA,然后分别与鸡卵清溶菌酶(HEL)或卵清蛋白(OVA)Th表位DNA序列重组,行序列测定后,构建于高效原核表达载体pQE-80L并转化E.coliDH5α,经IPTG诱导表达,Ni-NTA层析纯化后,通过细胞增殖实验检测融合蛋白的生物学活性。结果DNA测序表明,重组HELmsBLyS和OVAmsBLyS的DNA序列与文献报道的序列完全一致。HELms-BLyS和OVAmsBLyS在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达。经Ni-NTA层析纯化后,目的蛋白的纯度可达90%以上。活性检测发现,重组蛋白均不能促进Raji细胞增殖。结论成功构建了BLyS的免疫抑制分子,并获得了高效表达及纯化,纯化产物已丧失了sBLyS所具有的细胞增殖活性,为进一步探讨其治疗作用打下了基础。

兔肾VX_2肿瘤声学造影与血管密度相关性分析

目的 分析兔实验肾肿瘤、肾皮质声学造影峰值强度与病理血管密度之间的相关性。方法 声学造影后视频灰阶、声学密度定量峰值强度,墨汁灌注肾脏记数肾肿瘤、肾皮质血管密度。结果 血管密度与视频灰阶分析和声学密度定量(AD)时间-强度曲线上的峰值均有相关性,但与AD时间-强度曲线上峰值的相关性更好。结论 声学造影峰值强度可评价肾肿瘤和肾皮质的血管密度。

静电吸附法制备抗αvβ_3靶向脂质微泡及体外寻靶实验

目的探讨静电吸附方法制备携带抗αvβ3单克隆抗体的靶向微泡的可能性,并初步评价该靶向微泡在体外的寻靶能力。方法将适量的负电荷脂质微泡造影剂与抗αvβ3单克隆抗体混合,利用静电吸附方法,制备亲黑色素瘤的靶向超声造影剂,并通过观察与黑色素瘤细胞的结合情况,验证该靶向微泡的靶向性。结果静电吸附方法能够使抗体与微泡结合。携带抗αvβ3单克隆抗体的靶向微泡粘附在黑色素瘤细胞表面的靶向微泡数目明显多于普通对照微泡。结论静电吸附法能够制备脂质靶向超声微泡,体外亲肿瘤细胞的寻靶试验验证了携带抗αvβ3单克隆抗体的靶向超声微泡具有一定的寻靶能力。

超声对中老年女性前列腺病的诊断价值分析

目的探讨超声对中老年女性前列腺病患者的，临床诊断价值。方法对18例排尿不畅的女性患者经腹部进行超声检查，适度充盈膀胱条件下观察膀胱颈形态，测量前后唇厚度，并与相同年龄段无症状的检查者作对比研究。结果2例患者膀胱颈前后径分别为12mm、13mm，余16例均大于15mm。结论超声对女性前列腺病是一种简便易行无创伤的检查手段。

二维超声对乳腺良恶性肿块的鉴别诊断

目的探讨乳腺良恶性肿块的二维声像图特征,评价其在良恶性肿块诊断中价值。方法回顾性分析119例乳腺肿块的超声特征如:纵横比、形态、边缘、内部回声、微钙化、后方回声。结果恶性肿瘤的超声征象有纵横比>1、形态不规则、边缘毛刺样、微分叶、周围强回声晕、微钙化和后方回声衰减。良性肿瘤超声征象有形态规则、边缘清晰光滑及包膜。结论乳腺良恶性肿瘤的特征性超声表现对诊断和鉴别诊断有重要价值。

超声引导下粗针活检术对乳腺肿物的诊断价值

目的探讨超声引导下粗针活检术(US-CNB)诊断乳腺肿物的临床应用价值。方法笔者对US-CNB的128例进行了回顾,其中65例乳腺肿物进行了手术切除的患者为研究对象,以手术切除病理检查结果为诊断标准进行分析。结果36例乳腺肿物手术切除病检结果为恶性,其中US-CNB病理诊断恶性33例,可疑恶性1例,导管不典型增生2例;29例手术切除病理为良性,US-CNB病理诊断亦均为良性。US-CNB诊断乳腺恶性肿瘤的敏感性为94.4%,特异性100%,准确性96.9%。结论US-CNB是诊断乳腺肿物的一项准确、快速、创伤小的方法。

非特异性附睾炎的彩色多普勒超声特征

目的探讨彩色多普勒超声(ColorDopplerultrasound,CDU)对非特异性附睾炎的诊断价值。方法回顾性分析45例非特异性附睾炎的超声表现。结果34例附睾病灶为局限性,其中尾部31例、头部3例;11例为附睾弥漫性肿大,6例同时累及睾丸;病灶均呈低回声。彩色多普勒显示病灶内有点条状血流信号,其中Ⅰ级2例,Ⅱ级11例,Ⅲ级32例。26例(57.8%)合并有鞘膜积液;19例(42.2%)伴有同侧精索静脉曲张。结论CDU是检测非特异性附睾炎一种有价值的方法。

人肝癌靶向脂质体微泡造影剂的鉴定及免疫学性质研究

目的 制备人肝细胞癌靶向免疫脂质体微泡造影剂 ,并对其免疫学性质进行研究。方法 静电吸附法制备免疫脂质体微泡造影剂 ;玻片凝集试验、荧光免疫染色试验证明抗体与脂质体微泡的结合 ;ELISA法检测免疫脂质体微泡的活性 ;花环形成试验、花环形成阻断试验及荧光免疫染色试验研究免疫脂质体微泡的靶向作用 ;细胞毒试验 (MTT法 )评价其安全性。结果 免疫脂质体微泡的玻片凝集试验、荧光免疫染色试验均为阳性 ;ELISA结果显示 ,免疫脂质体微泡中单抗的活性与游离单抗基本一致 ;免疫脂质体微泡围绕人肝癌细胞形成花环 ,花环形成率达 90 %以上 ;免疫脂质体微泡造影剂对人正常肝细胞的增殖没有影响。结论 采用静电吸附法成功制备了具有良好免疫活性的人肝细胞癌靶向免疫脂质体造影剂 ;该造影剂在体外能与人肝癌细胞高效特异结合 。

携CD54单抗的靶向超声造影剂增强兔腹主动脉内膜及粥样斑块显影的实验研究

目的 探讨携CD54单抗的超声造影剂在动脉粥样硬化中的诊断价值。方法 整和CD54单克隆抗体及白蛋白微泡制备靶向超声造影剂。新西兰大白兔 26只,高脂饮食建立动脉粥样硬化模型并随机分 3组。第 1、2组分别使用普通、靶向造影剂行腹主动脉超声造影,第 3组同时应用两种造影剂造影。视频密度法评价两种造影剂对动脉内膜、粥样斑块的造影增强效应,免疫组化检测白蛋白微泡在靶组织中分布情况。结果 各组造影后内膜、粥样斑块峰值视频密度与造影前基值相比均有显著增加 (P<0. 01)。第 1、2组间血管内膜、斑块峰值视频密度的差异有显著性意义 (P<0. 01)。第 3组使用普通造影剂的内膜、斑块峰值视频与使用靶向造影剂的对应峰值比较差异有显著性意义 (P<0. 05 )。腹主动脉壁上携CD54单抗的微泡免疫组化染色呈强阳性,普通微泡为弱阳性。结论 携CD54单抗造影剂对粥样硬化动脉内膜及斑块有靶向显影价值,可提高超声诊断敏感性。

兔VX_2微小肝癌超声造影的实验研究

目的采用声学造影剂经外周静脉超声造影,研究最大径＜5.0 mm的兔肝VX2微小肝癌在造影前后的检出率.方法10只荷VX2肝肿瘤的新西兰白兔经外周静脉注射长效声学造影剂'脂氟显',二次谐波显像扫描记录肝脏造影影像,最后与动物肝大体病理切面对照,评价超声造影对微小肿瘤检出的敏感性.结果10只动物肝脏大体病理检查共检出31个微小肿瘤,大小1.6～5.0 mm.其中3.0～5.0 mm的肿瘤结节造影前检出3个,造影后检出8个;1.0～3.0 mm的肿瘤结节造影前检出1个,造影后检出17个.微小肿瘤检出敏感性从造影前的12.9%提高到造影后80.6%.结论声学造影增强显著提高了5.0 mm以下微小肝癌的检出率.

亲血栓性靶向超声造影剂的制备及体外实验初步研究

目的 制备亲血栓性靶向超声造影剂,探讨其体外寻靶的特点和规律。方法 在自制的白 蛋白超声造影剂的基础上,采用交连法制备血栓靶向微泡造影剂。体外实验分3组:A组,将靶向造影剂 滴加于健康人新鲜血凝块上,光镜下观察微泡与血凝块的粘附情况;B组对照,普通白蛋白造影剂;C组对 照,6 肽阻断实验。结果 A组微泡在血凝块外围形成一条凝聚带,并顺着网格状的纤维素带延伸到血块 内部,而两对照组均未见微泡与血凝块的结合。结论 采用交连法可制备亲血栓性靶向白蛋白超声造影 剂;该造影剂微泡在体外能与人新鲜血凝块高效特异结合。