致肾盂肾炎大肠杆菌粘附基因群的克隆及其抗血清的制备

以柯斯质粒pHC79为载体构建致肾盂肾炎大肠杆菌代表株E.coli J96染色体基因文库,获得两个能够表达粘附特性的重组柯斯质粒.进一步用鸟枪法亚克隆到载体pACYC184,得到三个阳性重组体.其中pCT10/E.coli K-12 p678-54能够稳定表达P菌毛和MRHA,分子量为14.6kb.用该克隆子免疫新西兰白兔,抗血清用带有载体质粒的受体菌(pACYC184/E.coli K-12 P678-54)吸收后,经菌毛粗提物的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blotting和血凝抑制试验检测,其特异性仅针对致肾盂肾炎大肠杆菌的粘附基因群,可用于临床菌株的鉴定.

大肠杆菌asd基因PCR引物设计及其长模板PCR扩增

目的获得大肠杆菌全长ａｓｄ基因。方法采用计算机引物设计软件，长模板ＰＣＲ扩增法及限制性内切酶酶切分析。结果设计一对Ｅ．ｃｏｌｉａｓｄ基因ＰＣＲ引物；经长模板ＰＣＲ扩增获得１５１０ｂｐＰＣＲ扩增片段；经限制性内切酶酶切分析，证明该片段与电脑查询的Ｅ．ｃｏｌｉａｓｄ基因酶切谱相同。结论以本文设计的引物用长模板ＰＣＲ扩增法得到的片段初步确认为Ｅ．ｃｏｌｉａｓｄ基因。

聚合酶链反应在诊断结核性脑膜炎中的应用

聚合酶链反应在诊断结核性脑膜炎中的应用吴钢，许国英，林应锵，占丽钦，高凤鸣，包幼迪，慕容慎行聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术作为结核性脑膜炎（简称结脑）的基因诊断技术，与传统的诊断方法比较，具有特异、敏感、快速的优点［１、２］。目前，国内外报道较多［１、２...

儿童支气管哮喘外周血T细胞亚群检测及特点分析

应用单抗致敏红血球玫瑰花环实验，对18例支气管哮喘患儿及25例正常儿童进行外用血CD3（成熟T细胞），CD4（辅助／诱导T细胞）、CD8（抑制／杀伤T细胞）及CD4／CD8比值的检测。结果表明与正常儿童相比．支气管哮喘患儿CD8细胞降低，CD4细胞和CD4／CD8比值增高，而CD3细胞无明显变化，提示支气管哮喘患儿存在细胞免疫功能异常。