六味地黄丸增效小鼠黑色素瘤HSV-tk/GCV自杀基因疗法的免疫机制

目的明确六味地黄丸是否增强单纯疱疹病毒核苷激酶/更昔洛韦(HSV-tk/GCV)自杀基因疗法对小鼠黑色素瘤的免疫杀伤效果,并对其相关机制进行探索。方法采用Western Blot实验、免疫荧光实验检测六味地黄丸对缝隙连接蛋白43(Cx43)表达水平及膜定位的影响;通过荧光黄染料、钙黄绿素荧光传输实验检测六味地黄丸对小鼠黑色素瘤细胞B16(B16细胞)缝隙连接通讯(GJIC)功能的影响;PI/Hoechst染色实验检测CD8+T细胞对B16细胞的免疫杀伤效果;CD8+T细胞激活实验观察GJIC在六味地黄丸增强对小鼠黑色素瘤免疫杀伤中的作用。结果自杀基因疗法联合六味地黄丸治疗较单独应用自杀基因疗法能更显著地抑制肿瘤生长;Western Blot及免疫荧光实验显示六味地黄丸组Cx43表达明显上调,荧光传输实验显示六味地黄丸组B16细胞GJIC功能显著增强;PI/Hoechst染色实验显示,六味地黄丸组CD8+T细胞对B16细胞的免疫杀伤效果更加显著,阻断Cx43后,对B16细胞的免疫杀伤效果则被逆转,同时CD8+T细胞的激活也被减弱。结论六味地黄丸可通过上调B16细胞中Cx43的表达,改善GJIC功能,促进肿瘤抗原的交叉提呈,更强地激活CD8+T细胞以增强其对肿瘤细胞的免疫杀伤效果。

提高医学检验人才检验水平和创新能力的改革思路

传统医学检验毕业生存在创新性人才匮乏,就业前景差的问题,其根本原因是专业课程设计和教学模式相对陈旧落后。广州中医药大学在2014年新设立了医学检验专业,我们作为课程负责人对新设医学检验进行了创新改革,对人才进行四个层次进阶式培养,包括基础理论的学习及基本实验操作能力培养,临床化学检验和分子检验的技能训练,实体与虚拟教学的结合促进自主能力培养,加入科研团队进行创新性课题研究。本文阐述的培养新模式旨在为培养适合现代医学检验需求的人才提供思路。

白藜芦醇诱导肾癌细胞凋亡的分子机制研究

目的研究白藜芦醇对肾癌786-O细胞周期和凋亡的影响及其分子机制。方法 CCK-8检测细胞活力;propidium iodide(PI)染色-流式细胞仪分析细胞周期和PI/AnnexinⅤ双染-流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫印迹法检测细胞周期和凋亡相关靶蛋白表达水平。结果白藜芦醇能够呈浓度依赖方式显著抑制786-O细胞生长活力(P<0.05,与正常组比较);周期图谱显示白藜芦醇引起G1期的786-O细胞比例减少,G2/M期的细胞比例增多,周期蛋白Cyclin和周期蛋白依赖激酶抑制子p21表达上调;另外,白藜芦醇呈药物浓度依赖诱导786-O细胞凋亡,促凋亡蛋白Bax和凋亡切割蛋白Caspase-3表达上调。结论白藜芦醇能抑制肾细胞癌786-O细胞增殖,使其阻滞在G2M期,并且诱导786-O细胞凋亡。p21和Bax参与了白藜芦醇诱导786-O细胞凋亡。