水通道蛋白1、5在LPS诱导大鼠急性肺损伤组织中的表达

目的探讨水通道蛋白1、5(AQP1、AQP5)在脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)组织中的表达变化及意义。方法将Wistar大鼠48只随机分为对照组(NC)和急性肺损伤(ALI)组,ALI组通过尾静脉注射脂多糖(LPS),分别于2、6、12和24 h采集标本。HE染色观察肺组织病理;测定肺湿/干重比(W/D)、肺通透指数;ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)水平;Western blot、免疫组化和real-time PCR法检测肺AQP1、AQP5蛋白和mRNA变化。结果与对照组比较,ALI组TNF-α、MIP-1α均有显著性升高(P<0.05),至24 h点逐渐恢复。注射LPS后2 h出现肺泡和间质水肿,炎性细胞浸润,以12 h最明显;肺W/D比、肺泡灌洗(BALF)蛋白含量、肺通透指数均较对照组明显升高(P<0.05),12 h点达峰值。ALI组各时间点肺AQP1及AQP5mRNA及蛋白表达均较对照组明显下调(P<0.01),以12 h点下降最明显。肺AQP1、AQP5 mRNA表达与肺W/D比、血清TNF-α,MIP-1α存在明显负相关。结论脂多糖诱导大鼠急性肺损伤,其肺水肿的形成可能与AQP1、AQP5的表达下调有关。

脂多糖对大鼠肺损伤及肺组织中AQP1和AQP5表达的影响

目的:探讨大鼠经静脉注射脂多糖(LPS)对急性肺损伤(ALI)及肺组织中水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,阐明其作用机制。方法:SPF级2月龄雄性Wistar大鼠48只随机分为对照组和LPS组(n=24),分别经尾静脉注射生理盐水和LPS,每组分别于注射后2、6、12和24h时间点采集标本,每个时间点6只。HE染色观察肺组织病理学变化;测定大鼠肺湿/干质量(W/D)比、肺渗透指数;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP^(-1)α)水平;采用Western blotting、免疫组织化学和Real-Time PCR方法检测大鼠肺组织中AQP1和AQP5蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,LPS组大鼠血清TNF-α和MIP^(-1)α水平在注射LPS后2、6和12h时间点均明显升高(P<0.05),至24h时逐渐恢复正常。HE染色,注射LPS后2h大鼠肺组织出现水肿和炎性细胞浸润,以12h时间点最明显;LPS组各时间点大鼠肺W/D比、肺渗透指数均较对照组明显升高(P<0.05),12h时间点最明显。与对照组比较,LPS组各时间点大鼠肺组织中AQP1和AQP5mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P<0.01),以12h时间点下降最明显。结论:LPS可导致大鼠ALI和肺组织中AQP1及AQP5表达水平下调,并参与了肺水肿的形成。

地塞米松对内毒素性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5表达的影响

目的探讨内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）大鼠肺水通道蛋白1、5（AQP1、AQP5）表达的变化及不同剂量地塞米松（DEX）对其干预作用。方法将Wistar大鼠随机分为五组：对照组（NC）、ALI组、三种剂量的DEX干预组（小剂量0．5mg／kg、中剂量1．0mg／kg、大剂量5．0mg／kg）。ALI组通过尾静脉注射LPS，干预组注射LPS后给予不同剂量的DEX，于2、6、12和24h采集标本。HE染色观察肺组织病理，测定肺湿／干质量比（W／D）、肺通透指数，ELISA检测血清TNF-α、MIP-1α水平；Western blot、免疫组化和Real—TimePCR法检测肺AQPl、AQP5蛋白和mRNA变化。结果与对照组比较，AL1组TNF—α、MIP—1α均明显升高（P〈0．01），至24h逐渐恢复；与ALI组比较，DEX干预各组上述炎症因子随时间延长逐渐下降（Pc0．05）。ALI组出现肺泡和间质水肿，炎性细胞浸润，以12h最明显；而DEX干预各组肺损伤病理明显减轻。经LPS处理各组肺W／D比值、肺通透指数均较对照组明显升高（P〈0．05），12h达峰值；与ALI组比较，DEX干预各组上述指标随时间延长逐渐下降（P〈0．05），但各干预组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Au组各时间点肺AQP1及AQP5表达均较对照组明显下调（P〈0．01），以12h时间点下降最明显；与ALI组比较，DEX干预各组AQP表达上调，随时间延长，AQP表达逐渐恢复，但各干预组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论LPS能诱导大鼠ALI，DEX对肺损伤具有保护作用，其作用机制可能与DEX上调AQP1、AQP5的表达有关，与DEX剂量无量效关系。

不同剂量地塞米松对脓毒症肾损伤大鼠血管紧张素Ⅱ及其受体、NO水平变化的影响

目的:探讨内毒素(LPS)所致脓毒症急性肾损伤(AKI)大鼠血管紧张素II(AngII)及其受体、NO表达的变化及不同剂量地塞米松(DXM)对其干预作用。方法:将Wistar大鼠随机分为5组:对照组(NC)、LPS组、三种剂量的DXM干预组(小剂量0.5 mg/kg、中剂量1.0 mg/kg、大剂量5.0 mg/kg)。AKI组通过尾静脉注射LPS,DXM干预组注射LPS后给予不同剂量的DXM,于2、6、12和24 h采集标本。HE染色观察肾组织病理,全自动生化分析仪测定血清肌酐、尿素氮,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)水平;应用放射免疫分析法检测血浆及肾组织中AngII浓度变化,Western blot、免疫组化法检测肾组织血管紧张素受体1(AT1R)、血管紧张素受体2(AT2R)蛋白变化,应用硝酸还原酶法检测血清、肾组织NO变化。结果:与对照组比较,LPS组血清TNF-α、MIP-1α、肌酐、尿素氮、血浆及肾组织AngII、肾组织AT2R、血清及肾组织NO均明显升高(P<0.05),而肾组织AT1R表达明显下降(P<0.05);病理显示LPS组出现肾小球内中性粒细胞浸润,肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性、坏死,随着LPS作用时间的延长,病理损伤越明显;与LPS组比较,DXM干预各组血清TNF-α、MIP-1α、肌酐、尿素氮、血浆及肾组织AngII、肾组织AT2R、血清及肾组织NO下降(P<0.05),而肾组织AT1R表达明显升高(P<0.05),肾损伤病理明显减轻;其中,血清TNF-α、MIP-1α、血浆AngII以大剂量DXM干预组下降最为显著(P<0.05),血清肌酐、尿素氮、肾组织NO以小、中剂量地塞米松干预组下降更为明显(P<0.05),肾组织AngII以中剂量地塞米松干预组下降最为明显(P<0.05),肾组织AT1R以中、大剂量地塞米松组干预效果明显(P<0.05),肾组织AT2R、血清NO各地塞米松干预组差异无统计学意义。结论:LPS能诱导大鼠AKI,DXM对肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与DXM下调炎症因子、AngII、AT2R、NO及上调AT1R表达有关,且针对不同的效应分子,不同剂量地塞米松的干预作用不同。

利妥昔单抗治疗儿童频复发肾病综合征9例并文献复习

目的探讨利妥昔单抗(Rituximab,RTX)在儿童频复发肾病综合征中的疗效和安全性。方法回顾性分析2021年12月至2023年6月在厦门市儿童医院肾脏专科诊治并接受RTX治疗的9例频复发肾病综合征患儿的临床资料。结果①接受RTX治疗的9例患儿中,男8例,女1例,随访时间为12(9,16)个月。接受RTX治疗时平均年龄为6.2岁。②接受RTX治疗后有3例患儿(33.33%)在激素减量过程中复发,各复发1次,其余6例(66.67%)在随访期间无复发。应用RTX后复发次数(0.3次/半年)较使用前(2.6次/半年)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。③随访过程中无复发的6例均在RTX治疗后3个月内停激素,其余3例也能在未使用其他免疫抑制剂的情况下逐渐减量至小剂量(<隔日0.5 mg/kg)。激素使用量明显减少,治疗前平均为(1.16±0.33)mg/(kg·d),治疗后为(0.35±0.16)mg/(kg·d),差异有统计学意义(P<0.05)。④RTX治疗前及治疗后最后一次随访时的白蛋白、肌酐水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);RTX治疗后免疫球蛋白IgG水平较RTX治疗前上升,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤治疗过程中,2例患儿出现轻微输液反应,随访过程中无严重感染、恶性肿瘤的发生。结论RTX治疗儿童频复发肾病综合征可减少复发,同时减少激素的使用剂量。频复发肾病综合征患儿可以考虑早期使用利妥昔单抗。

血管紧张素Ⅱ及其受体在脂多糖诱导的大鼠急性肺、肾损伤中的变化

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体在脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺、肾损伤中的表达变化及意义。方法将Wistar大鼠48只随机分为对照组和LPS组,LPS组通过尾静脉注射LPS,对照组通过尾静脉注射等量的生理盐水,分别于2 h、6 h、12 h和24 h采集标本。通过HE染色观察肺、肾组织病理;测定肺湿/干重比、血清肌酐、尿素氮;应用放射免疫分析法检测血浆及肺、肾组织中AngⅡ浓度变化,Western blot、免疫组织化学法检测肺、肾组织血管紧张素受体1(AT1R)、血管紧张素受体2(AT2R)蛋白变化。结果与对照组相比,LPS组大鼠肺、肾组织病理显示不同程度损伤,肺湿/干重比、血清肌酐、尿素氮水平显著升高(P<0.05),血浆AngⅡ含量在2 h、6 h明显升高(P<0.05);肺、肾AngⅡ含量在各时间点均显著升高(P<0.05),肺、肾AT1R蛋白表达明显下降(P<0.05),AT2R蛋白表达明显升高(P<0.05),且AngⅡ、AT2R与肺、肾功能损伤指标呈正相关,AT1R与肺、肾功能损伤指标呈负相关。结论LPS导致大鼠的肺、肾功能出现损伤及肾素-血管紧张素系统改变,且AngⅡ及血管紧张素受体变化与肺、肾损伤存在相关性,血管紧张素Ⅱ及其受体可能参与内毒素诱导的肺、肾损伤。