苗药杆努尽烟对慢性阻塞性肺疾病大鼠糖皮质激素耐药作用的分子机制

目的探讨苗药杆努尽烟对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠糖皮质激素耐药作用的分子机制。方法称取杆努尽烟全草制取水提物,选取10只Sprague-dawley(SD)大鼠作为对照组(正常饲养),40只大鼠采用烟熏结合脂多糖(LPS)气管注射法,制作COPD大鼠模型并随机均分为模型组(生理盐水灌胃)、杆努尽烟组(杆努尽烟水提液灌胃)、地塞米松组(雾化吸入地塞米松)及联合用药组(杆努尽烟灌胃联合地塞米松雾化吸入),造模同时给予相应药物干预28 d麻醉取心脏血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清白细胞介素-2(IL-2)的水平;处死大鼠,取肺组织采用苏木精-伊红染色(HE)法观察各组大鼠肺组织的组织学特征,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫印迹法(Western blot)测定各组大鼠肺组织中P38促分裂素原活化蛋白激酶(P38MAPK)、GC受体-α(GR-α)及热休克蛋白90(HSP90)mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,杆努尽烟组、地塞米松组、模型组及联合用药组COPD大鼠均有不同程度的喘息、咳嗽、精神状态不佳,其中联合用药组呼吸系统症状最轻;杆努尽烟组、地塞米松组血清IL-2含量较模型组降低(P<0.05),杆努尽烟组、地塞米松组及联合用药组COPD大鼠肺组织P38MAPK、GR-α及HSP90 mRNA和蛋白表达较模型组降低(P<0.05)。结论苗药杆努尽烟可改善COPD大鼠GC耐药作用,减轻肺组织炎症细胞浸润、降低血清IL-2水平,其机制可能与下调P38MAPK含量提高GR-α、HSP90表达有关。

LAMP方法鉴定玫瑰冠基因型研究

为了建立快捷的玫瑰冠等位基因分型方法,试验基于LAMP技术,设计特异性引物,在结合浊度法与金属离子指示剂法等方法下,对玫瑰冠等位基因分型进行可行性研究。结果显示:三组引物中,Rose1-1无特异性,Rose4-1和Rose4-2具有一定的特异性,其中Rose4-1在利用HNB作为染料,不添加环引物时的体系组合,可以在24个已知基因型的个体中准确筛选出纯合子与杂合子个体。结果表明,通过LAMP技术进行玫瑰冠个体基因分型具有可行性,同时也为优化其他性状的分子标记辅助选择提供了有益参考。