定量检测PAX1甲基化诊断宫颈癌前病变的应用分析

目的探究宫颈癌前病变诊断中PAX1甲基化定量检测的应用价值。方法136例高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染患者为研究对象,以病理结果为依据分为四组,即甲组(正常宫颈,28例)、乙组(低级别病变,32例)、丙组(高级别病变,33例)、丁组(癌变,43例)。收集四组宫颈刮片、组织标本,对PAX1基因甲基化水平进行定量检测,分析测定结果。结果甲组PAX1基因甲基化患者0例,发生率为0;乙组PAX1基因甲基化患者2例,发生率为6.25%;丙组PAX1基因甲基化患者15例,发生率为45.45%;丁组PAX1基因甲基化患者43例,发生率为100.00%。甲、乙、丙、丁四组患者的PAX1基因甲基化发生率逐渐提高,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。甲组HPV阳性患者9例,阳性率为32.14%;乙组HPV阳性患者26例,阳性率为81.25%;丙组HPV阳性患者30例,阳性率为90.91%;丁组HPV阳性患者40例,阳性率为93.02%。甲、乙、丙、丁四组患者的HPV阳性率逐渐提高,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。丁组患者宫颈组织、宫颈刮片中的PAX1基因甲基化水平均高于甲组、乙组、丙组,丙组高于甲组、乙组,乙组高于甲组,差异具有统计学意义(P<0.05)。通过绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)得知,PAX1基因甲基化诊断高、低级别癌前病变、正常宫颈的ROC曲线下面积为0.88。结论宫颈癌前病变诊断中PAX1甲基化定量检测具有一定的应用价值,可对高级别宫颈癌前病变进行有效鉴别。

TPX2蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的宫颈鳞状细胞癌最有效的治疗方法之一是根治性同步放化疗(DPP周疗),但是治疗效果却因为治疗抵抗而非常有限。在这项研究中,我们探讨Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xklp2,TPX2)表达与宫颈鳞状细胞癌患者临床病理特征和预后的相关性。方法采用免疫组织化学法对2009年1月1日至2012年12月31日在本院初始接受了根治性放射治疗的宫颈鳞癌患者142例的活检组织进行TPX2蛋白检测。结果宫颈鳞癌组织中TPX2的表达与淋巴转移(χ2=11.255,P=0.007),肿瘤大(χ2=7.074,P=0.008),低血红蛋白水平(χ2=5.494,P=0.019)和复发(χ2=27.168,P <0.001)有统计学意义的关联,而与年龄等因素无关联(P> 0.05)。根治性放射治疗近期疗效反应与TPX2表达水平有关联,高表达者放疗效果差(χ2=10.649,P=0.003)。RFS和OS的影响因素有淋巴转移(χ2=10.026,P=0.002;χ2=5.785,P=0.016)、肿瘤大(χ2=9.105,P=0.003;χ2=6.945,P=0.008)、低血红蛋白水平(χ2=8.588,P=0.003;χ2=12.438,P <0.001)、TPX2高表达(χ2=20.848,P <0.001;χ2=14.876,P <0.001),然而RFS和OS的独立不良预后因素只有TPX2高表达[P=0.006,HR=4.016,95%CI(1.502-10.753)]、[P <0.001,HR=4.505,95%CI(1.456-14.085)]。结论 TPX2可能是宫颈鳞癌的放疗疗效和预后估计的一个指标。

宫颈癌甲基化标志物联合TCT、HPV检测对宫颈癌筛查的临床意义

宫颈癌是我国女性第二大恶性肿瘤,严重威胁女性健康。目前宫颈癌筛查方法是液基细胞学(TCT)和高危型人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测,但是这些方法均缺乏特异性且主观性强,常导致临床漏诊和误诊。探索有效的生物学标志物和合适有效的早筛方法对于宫颈癌的防治具有重要意义。研究表明宫颈癌DNA甲基化在早期筛查中发挥重要作用。目前研究较多的FAM19A4、mir124-2、PAX1、SOX1、DAPK11、RARB、TWIST1和CDH13等基因的表观遗传学改变与宫颈疾病的严重程度具有较大的相关性。新近研究提示,利用人的全基因组CpG岛微阵列芯片技术在上述基因中筛选出的6个新型DNA甲基化标志物组合(甲要基化试剂盒)可较好用作HPV阳性妇女进展风险分级及预后判断的参考指标。本研究拟收集本院100例高危型HPV阳性患者及20例宫颈癌术后患者的宫颈脱落细胞,利用宫颈癌甲基化检测试剂盒,采用PCR方法进行DNA甲基化检测,比较分析HPV分型及TCT检测结果,以期评估该项检测技术是否可以用于宫颈癌临床辅助诊断及HPV阳性患者的分流管理。

支气管肺泡灌洗液中SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测对肺癌的诊断价值

肺癌是我国恶性肿瘤发病率和死亡率双第一的癌症。大多数肺癌患者发现时已属中晚期,因此肺癌早期筛查对提高患者的五年生存率至关重要。当前支气管镜下样本肺泡灌洗液常用的病理确诊方法是脱落肿瘤细胞学检测,但该技术检测敏感性低且受人为因素影响大。目前越来越多研究团队将重点放在新型分子标志物DNA 甲基化上,以期提高肺癌诊断效力。矮小同源盒基因 SHOX2 是肺癌早期检测最灵敏的指标,同时也是目前在肺癌诊断中应用最广泛的甲基化指标,与器官发育密切相关。RASSF1A基因是肿瘤抑制基因,与基因转录、信号转导、细胞骨架、细胞周期、细胞黏附及凋亡有关。本研究拟选取本院100例临床肺癌疑似患者,之后联合检测 SHOX2 和RASSF1A 基因在肺泡灌洗液中甲基化的状态,然后比较Lung-Me甲基化检测在不同大小肺结节中辅助诊断的临床价值。并对基因甲基化检测与常规细胞学检测对肺癌的诊断效能进行比较,以期提高早期肺癌检出率,进一步辅助临床诊断,并为肺部良恶性病变的鉴别提供依据。

外周血Septin9基因甲基化检测在结直肠早癌筛查中的应用

结直肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,88%的结直肠癌患者发现时已为中晚期,因此降低我国结直肠癌的发病率和死亡率是刻不容缓的重大临床科学问题。目前用于临床的结直肠癌筛查手段主要有便潜血检测(FOBT)、癌胚抗原检测(CEA)、CT 结肠造影等方式,但上述手段均易出现假阳性结果,检测稳定性较差。结直肠镜作为结直肠癌检查的金标准,属于有创检查,患者依从性较差。已有研究表明,Septin 9基因发生甲基化会抑制其正常表达,并最终导致细胞分裂和癌变,在结直肠癌发生中扮演抑癌基因的作用。由此,有研究团队认为可以通过检测血浆中Septin 9基因的甲基化程度来判断结直肠是否发生癌变,但其具体临床效果和意义有待于进一步临床验证。现对我院结直肠高危患者分别进行便潜血及Septin 9基因甲基化大肠癌(简称S9)检测,并结合病理诊断,分析S9基因检测对结直肠癌的临床指导意义,形成S9基因检测技术在结直肠癌临床应用中的评价与报告。