辣椒制品中苏丹红Ⅰ快速检测的方法研究

为建立一种辣椒制品中苏丹红Ⅰ的快速检测方法,通过直接提取法、固相萃取法和皂化法对辣椒制品中苏丹红Ⅰ进行提取净化,用胶体金免疫层析法对其进行检测,并进行方法学验证。结果显示:辣椒制品直接提取法在检测时,检测限较高,无法满足检测要求;固相萃取法适用于辣椒酱和辣椒油的快速检测,检测限为10μg/kg;皂化法适用于辣椒粉的快速检测,检测限为10μg/kg。方法学验证表明:以辣椒酱、辣椒油和辣椒粉作为空白基质的检测限为10μg/kg,灵敏度均为100%,特异性为87.5%~100%,假阳性率为12.5%,假阴性率为0。该方法快速准确、灵敏度高,可适用于辣椒制品苏丹红Ⅰ的快速检测。

食源性病原菌的富集与检测复合技术研究进展

食源性致病菌对食品安全及人体健康造成威胁。食品中极低浓度的病原菌需要通过前处理再结合有效的检测技术才可检出。现有快速检测方法受到增菌液成分、食品成分或菌体浓度低的影响,需要进行致病菌的分离富集后才能缩短检测时间、进行准确检测。本文分析了单一的致病菌富集法,包括裸磁珠及功能化磁珠的富集法。进而综述了富集与检测一体法,包括电泳技术、微流控技术等。对于致病菌的特异性富集,需要进一步提高吸附率及灵敏度。富集检测复合技术的检测灵敏度及检测限有待不断改进。

环境介质中有机磷农药残留检测方法的研究与进展

在我国农业生产中,有机磷农药大量用于果蔬中,成为广谱、高效的病虫害防治手段。然而,由于有机磷农药长期不合理及过量使用,造成农作物、土壤和水等环境介质中出现有机磷农药或是其代谢物的残留,对消费者的健康产生极大威胁,农药残留问题已成为威胁食品安全的重大隐患。开发检测环境介质中有机磷农药残留的高灵敏和高准确性的方法具有极其重要的意义。本文对色谱分离仪器检测法、光谱法、酶抑制法、免疫学技术以及电化学传感器这5种常见的有机磷农药检测方法的优点和不足进行对比,以期为有机磷农药检测方法的研究提供借鉴。

茉莉酸调控植物应对逆境胁迫作用的研究进展

植物在其生长发育周期中,很容易受到外界不利因素的影响,导致农林业发展造成很大的影响。植物激素是植物体内响应外界刺激和信号传导的化学信号分子,对植物的生命过程有着重要的调控作用。近年来,研究发现茉莉酸(jasmonic acid,JA)作为一种重要的植物激素广泛参与植物形态发育相关的多种生物学过程,调节植物对外源生物或者非生物胁迫的防御响应,在植物防御病原体入侵的过程中扮演了不可或缺的角色。本文中,笔者综述了茉莉酸的发现历程、生物功能、合成路径以及其在调控植物应对生物胁迫(虫害、病原菌)及非生物胁迫(干旱、盐碱、重金属、农药)等方面的研究进展,总结了茉莉酸的抗逆机制,以期为绿色农业的发展提供理论依据。

新型磁性分子印迹电化学传感器对食品中敌草隆的检测

将分子印迹技术与电化学相结合,构建了能同步提取和检测敌草隆的快速新型电化学传感器。采用表面印迹法合成了对敌草隆具有特异性吸附功能的磁性分子印迹聚合物,通过磁分离快速提取食品介质中的敌草隆;进一步通过磁吸附作用,将磁性印迹材料固定在磁性玻碳电极表面,在含有KCl的铁氰化钾和亚铁氰化钾的混合溶液中,利用示差脉冲伏安法测定敌草隆含量。该方法在0.0004~0.03 mmol/L敌草隆浓度范围内有良好的线性关系(R^2=0.9929),检测限为1.3×10^-5 mmol/L。在实际样品自来水、茶饮料、大白菜中的加标回收率为95%~110%,相对标准偏差0.7%~8.1%,能较好地应用于实际样品的检测。综上,此传感器能实现提取检测一体化,具有较好的实时检测能力,其方法灵敏度高、重现性和稳定性较好,在食品安全领域具有很好的应用前景。

安徽三界地区恙虫病东方体SJ_(2)株基因重组抗原的制备及活性分析

为制备恙虫病东方体SJ_(2)株基因重组抗原和恙虫病血清学诊断备选抗原,根据恙虫病东方体56 kDa外膜蛋白基因序列设计特异性引物,经PCR扩增东方体SJ_(2)株56 kDa型蛋白羧基端部分基因,序列测定并用软件Bioedit与我国主要东方体流行株56kDa蛋白进行氨基酸序列比对分析。然后克隆至载体pET-28a并在BL21菌体中诱导表达,通过His镍柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western-blot鉴定分析。结果显示,成功扩增出恙虫病东方体SJ_(2)株56 kDa蛋白708 bp基因片段,氨基酸序列比对显示,该截短蛋白含2个保守区和1个可变区。经IPTG诱导表达后,蛋白电泳在27 kDa处出现明显目标条带。Western-blot结果显示,该蛋白与恙虫病病人血清有特异性免疫反应,与正常人血清不反应。结果表明,诱导表达的重组56 kDa蛋白具有良好的免疫原性,可能备选为恙虫病诊断抗原用于恙虫病血清学检测。

液相色谱-串联质谱检测鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的残留量

目的建立一种检测鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量分析方法。方法优化检测条件:用乙腈进行样品提取,选择C18固相萃取小柱和无水硫酸镁对提取样品净化后进行液质联用检测。结果经过优化后液相条件:流动相由2mmol/L的甲酸铵水溶液和甲醇组成,采用梯度洗脱方式在C18反相色谱柱中进行分离,进样量为4μL。质谱条件:离子源采用ESI负离子,通过SRM模式对样品中氟虫腈及其代谢物进行定量检测。优化后,氟虫腈及其代谢物在0~20ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,R2均>0.9993,检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别0.2~0.4μg/kg和0.66~1.32μg/kg。实际样品中添加4.0、20.0、40.0μg/kg 3个质量浓度水平下,平均回收率在76.60%~98.24%,相对标准偏差(RSD)为1.03%~3.41%,符合定量检测要求。结论该方法操作简便、灵敏度高,可满足鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的检测要求。

2种罗丹明多环芳烃聚苯乙烯固相传感器检测Hg^2+的荧光差异

合成了2种用于Hg 2+检测的新型罗丹明聚苯乙烯固相荧光传感器PS-RB-2和PS-R6G-2,并对其荧光传感特性进行了详细的研究。通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和扫描电子显微照片(SEM)对其进行表征。PS-RB-2传感器对Hg^2+表现出更高的选择性、灵敏度以及更低的检测限(0.065μmol/L)。基于晶体结构,从理论层面提出并探讨了由Hg^2+螯合诱导的罗丹明螺环开环的检测机制。值得关注的是,该传感器可以回收利用,并将环境友好的传感器PS-RB-2成功用于荧光检测实际水和鱼类样品中的Hg^2+。在加标回收实验中,相对误差均低于10%,表明该传感器为实际食品样品中Hg^2+检测提供了一种简单、有效且具有潜力的方法。同时开发了一种可通过肉眼观察颜色变化进行快速检测Hg^2+的固相萃取柱。

茉莉酸对莱茵衣藻代谢降解杀菌剂三氯生的影响机制

三氯生是一种广谱抗菌剂,广泛应用于日用化学品之中。长期以来,三氯生随生活污水排放至水环境中,对动植物产生毒性作用,进一步通过食物链对人类健康产生威胁。开发高效绿色的三氯生降解方法具有重要的现实意义。微藻作为重要的水环境分解者,参与水体中外源化学物的代谢降解。茉莉酸是一种常见的植物激素,能诱导高等植物对环境胁迫的抗逆性,但其对微藻类低等植物防御体系的影响还未见报道。因此,本文中,笔者考察了不同浓度茉莉酸处理对莱茵衣藻应答三氯生胁迫作用及对三氯生代谢的影响。结果发现,0.05、0.15和0.45μmol/L茉莉酸处理不同程度缓解了三氯生对莱茵衣藻的氧化胁迫,但高浓度茉莉酸(0.45μmol/L)会抑制莱茵衣藻的生长。与三氯生单独处理的莱茵衣藻样本相比,0.15μmol/L茉莉酸处理显著提高了谷胱甘肽S转移酶和多酚氧化酶活力,降低了体内过氧化物酶活力。此外,茉莉酸处理莱茵衣藻体内三氯生积累量显著小于未处理组,而培养液中三氯生残留量无显著差异,说明茉莉酸促进了衣藻对三氯生的代谢降解。进一步通过高分辨质谱鉴定了6种三氯生在莱茵衣藻体内的代谢产物,其中有4种只在茉莉酸处理组中检出,说明在茉莉酸处理下莱茵衣藻代谢三氯生的方式更加多样化,降解效率更高。

猪链球菌组氨酸三联体蛋白多抗的制备及Dot-ELISA检测方法的建立

目的建立一种猪链球菌的快速、简便检测方法。方法根据猪链球菌2型强毒株05ZYH33组氨酸三联体蛋白HtpsC蛋白基因序列设计特异性引物,将HtpsC蛋白基因克隆至原核表达载体pET-30a并转化至大肠杆菌BL21(DE3),经0.2 mmol/L IPTG、15℃条件下诱导表达HtpsC蛋白。经Ni-IDA纯化后免疫新西兰白兔获得抗血清,通过亲和层析纯化制备Anti-HtpsC多克隆抗体。在此基础上,建立检测猪链球菌的斑点酶联免疫吸附检验法(Dot-ELISA),进一步优化了检测条件,并对该方法的特异性和敏感性进行评价。结果通过原核表达成功制备了HtpsC蛋白。Western blot结果显示,制备的Anti-HtpsC多克隆抗体可特异性结合HtpsC蛋白。优化的最佳多抗使用浓度为2.5μg/mL,最佳酶标二抗稀释倍数为1∶3000。特异性试验结果表明,含HtpsC蛋白基因的多种血清型猪链球菌均可呈现清晰的黄褐色斑点,但不含该蛋白基因的9型猪链球菌除外。而其他对照菌株:大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、化脓性链球菌、无乳链球菌和粪肠球菌均无斑点出现。灵敏度试验结果表明,该方法的检测限为1×10^(6)CFU/mL。结论本研究建立的Dot-ELISA方法特异性强,灵敏度良好,可用于检测多种血清型猪链球菌。