罐下自动采样器对食用油扦样可行性的验证

食用油行业样品采样主要依据GB/T5524—2008《动植物油脂扦样》执行,标准中列举了几种常见扦样器,包括简易配重扦样罐、盛放扦样器的配重笼、带底阀的扦样筒、底部扦样器、扦样管和扦样铲。在实际工作中,除了上述扦样器以外,还演变出了采样勺、采样管和自动扦样器等设备。

姜黄素逆转结肠癌裸鼠移植瘤多药耐药的研究

目的探讨姜黄素体内对人结肠癌耐长春新碱细胞株HCT-8/VCR多药耐药的逆转作用及其可能机制。方法将HCT-8/VCR种植于裸鼠皮下,建立肿瘤耐药模型。移植瘤裸鼠20只依据治疗方法的不同分为对照组(PBS)、长春新碱(Vincristine,VCR;2 mg/kg)组、姜黄素(50 mg/kg)组、姜黄素联合VCR(50 mg/kg姜黄素+2 mg/kg VCR)4组,每组5只。治疗2周后收集标本,称量各组瘤体质量,采用RT-PCR、Western blot分别检测瘤组织内MDR1 mRNA、survivin mRNA和P-gp、survivin蛋白的表达水平,HE染色观察瘤组织细胞形态学变化,评估姜黄素在不同处理因素中逆转肿瘤多药耐药的效果。结果姜黄素联合VCR能显著抑制瘤体的生长,姜黄素联合VCR组瘤质量[(0.42±0.23)g]明显低于对照组[(1.21±0.25)g]、VCR组[(1.13±0.27)g]、姜黄素组[(0.75±0.27)g](P<0.05)。RT-PCR、Western blot结果显示姜黄素能够下调MDR1 mRNA、survivin mRNA和P-gp、survivin蛋白的表达,姜黄素联合VCR组MDR1 mRNA(0.18±0.05)、survivin mRNA(0.63±0.04)、P-gp(0.15±0.02)、survivin(0.31±0.09)和姜黄素组MDR1 mRNA(0.39±0.11)、survivinmRNA(0.80±0.12)和P-gp(0.34±0.07)、survivin(0.40±0.11)蛋白表达明显低于对照组MDR1 mRNA(0.99±0.23)和survivin mRNA(1.19±0.32)表达,以及P-gp(0.71±0.23)、survivin(0.88±0.15)蛋白表达(P<0.05)。HE病理切片显示姜黄素组和姜黄素联合VCR组较其他2组有较多的淋巴细胞浸润,核固缩较多,核分裂相少,坏死更为广泛。结论多种机制参与姜黄素体内逆转肿瘤多药耐药,姜黄素可能通过下调MDR1、survivin mRNA表达和P-gp、survivin蛋白的表达,促进肿瘤细胞凋亡等多种途径逆转肿瘤的多药耐药性。

喜盐芽孢杆菌D8基因文库的构建及甘氨酸甜菜碱转运蛋白betH基因的筛选

喜盐芽孢杆菌(Halobacillus)D8是一株产生芽孢的革兰氏阳性中度嗜盐菌,能够耐受2 5 %NaCl。以其总DNASau3AI部分酶切的片段为供体、pUC18为载体,构建了该菌株的基因文库,共获得约90 0 0个重组质粒。通过菌落原位杂交、菌落PCR检测及DNA序列测定,从该文库中筛选到含有完整的甘氨酸甜菜碱次级转运系统基因的重组质粒,将此基因命名为betH基因。序列分析发现,betH基因的大小为15 15bp ,编码由5 0 5个氨基酸组成的BetH蛋白,分子量为5 6 1kD。经蛋白疏水性分析,推测为含有12个跨膜区的跨膜蛋白,与Oceanobacillusiheyensis甘氨酸甜菜碱转运蛋白、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)OpuD、楚氏喜盐芽孢杆菌(Halobacillustrueperi)BetH、单核细胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)BetL、嗜盐海球菌(Marinococcushalophilus)BetM和耐盐芽孢杆菌(Bacillushalodurans)甘氨酸甜菜碱转运蛋白的氨基酸同源性分别为6 4 %、5 1%、4 9%、4 8%、4 3%和4 4 %。

术中回收自体输血对脑动脉瘤患者术后疗效及感染发生率的影响

目的 探讨术中回收自体输血对脑动脉瘤患者术后疗效及感染发生率的影响.方法将62例脑动脉瘤患者采用随机数字表法分为观察组与对照组,各31例.观察组术中回收自体输血,对照组异体输血.比较两组术后恢复情况、感染发生率及手术前后的红细胞、血红蛋白、炎性因子及红细胞免疫指标水平.结果观察组术后恢复总优良率为87.1%,对照组为64.5%,观察组显著优于对照组(P<0.05).观察组无感染,对照组总感染率为12.9%,观察组显著低于对照组(P<0.05).手术后第3 d及第7 d观察组红细胞及血红蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01),降钙素原、超敏C反应蛋白及干扰素-γ水平显著低于对照组(P<0.01).手术后第3 d及第7 d观察组红细胞C3b受体、红细胞免疫黏附促进因子及肿瘤红细胞花环水平均显著高于对照组,免疫粘附抑制因子水平显著低于对照组(P<0.01).结论术中回收自体输血可以促进脑动脉瘤患者术后恢复,降低感染发生率,降低免疫反应及炎性反应,临床应用价值更高.

瑞芬太尼对胃癌手术患者应激激素水平及血流动力学指标的影响

目的 探讨瑞芬太尼对胃癌手术患者应激激素水平及血流动力学指标的影响.方法将132例择期行胃癌手术的患者采用随机数字表法分为观察组与对照组,各66例.观察组给予瑞芬太尼静脉麻醉,对照组给予芬太尼静脉麻醉.比较两组苏醒时间、自主呼吸恢复时间、拔管时间、吞咽反射恢复时间、肠道功能恢复时间、住院时间及麻醉诱导前、插管后1 m in、插管后5 m in、切皮时、切皮后30 m in、手术结束时的血糖、皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素水平及心率、收缩压、舒张压.结果观察组术后苏醒时间、自主呼吸恢复时间、拔管时间、吞咽反射恢复时间、肠道功能恢复时间、住院时间显著短于对照组(P<0.01).插管后1 min、插管后5 min、切皮时、切皮后30 m in及手术结束时观察组血糖、皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素水平均显著低于对照组(P<0.01);收缩压、舒张压及心率均显著低于对照组(P<0.01).结论瑞芬太尼能减轻胃癌患者手术中过强的应激反应,降低应激激素水平,维持理想、稳定的血流动力学水平,有利于保证手术麻醉安全,降低手术风险.

应用型高校《微生物学》双语课程本科教学的研究与实践

本文以青岛农业大学《微生物学》双语课程为例,从开展双语教学的必要性、双语教学模式、教学方法和配套措施等方面,对《微生物学》双语教学现状进行了初步的研究和实践,以期探索适合应用型高校特点的双语教学方法。

省属农业高校设立创新班的探索与实践——以青岛农业大学生物科学专业(创新班)为例

青岛农业大学生命科学学院为该校最早成立创新人才培养实验班的学院之一。本文从该学院对创新班的创新人才培养理念、人才培养目标、选拔方案、课程体系优化、教学模式、教学方法和学生评价体系等方面所做的探索和实践进行了总结。

省属农业高校微生物学双语课程教学方法的改革与实践

微生物学是高等院校生物类专业的一门重要专业基础课。以本课程为试点,在省属农业高校推广双语课程的本科教学,我们对该课程的教学方法进行了改革和探索,从教师授课前、课堂、授课后多媒体的使用,以及授课过程中中英文所占比例进行了实践和讨论,以期为双语教学的实施积累实践经验。

斑点免疫金银染色法检测鸡传染性支气管炎病毒抗原的研究

用建立的斑点免疫金银染色（ＤｏｔＩＧＳＳ）法检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗原，确定兔抗ＩＢＶ血清工作浓度为１∶４００，ＳＰＡ胶体金探针的工作浓度为１∶８０，该法对纯化ＩＢＶ抗原的最低检出量为０．４３１４ｎｇ／点。用ＤｏｔＩＧＳＳ与斑点酶联免疫吸附试验（ＤｏｔＥＬＩＳＡ）同时检测１５只人工感染ＩＢＶ鸡的气管、肺、肾病料，ＩＢＶ阳性检出率均为１００％；对３２份疑似ＩＢＶ感染鸡病料检测，ＩＢＶ阳性检出率分别为３４．５％和３１．０％，阳性符合率为９３．３％（Ｐ＞０．０５）。

乳腺癌患者术前睡眠质量对围术期丙泊酚和瑞芬太尼用量的影响

目的:探讨乳腺癌患者术前睡眠质量对围术期丙泊酚和瑞芬太尼用量的影响,为临床术前睡眠质量的干预提供理论依据。方法:选取2014年1月-2016年12月我院收治的82例乳腺癌且拟接受乳腺癌改良根治术患者,根据匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI),将PSQI评分≤7分的48例患者分为睡眠正常组,将PSQI评分>7分的34例患者分为睡眠紊乱组。比较两组麻醉前、麻醉后5 min、切皮时以及清醒时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)以及血氧饱和度(SpO_2)的变化情况;比较两组手术时间、意识消失(LOC)剂量、丙泊酚的用药总量以及瑞芬太尼的用药总量。结果:两组麻醉前、麻醉后5 min、切皮时以及清醒时的MAP、HR、SpO_2比较,差异均无统计学意义(P>0.05);睡眠正常组的LOC剂量为(107.93±26.57)mg,丙泊酚用药总量为(737.53±128.06)mg,瑞芬太尼用药总量为(0.63±0.31)mg,均低于睡眠紊乱组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌患者术前良好的睡眠质量有助于减少围术期丙泊酚和瑞芬太尼的用量。

中度嗜盐菌相容性溶质机制的研究进展

生活在高盐环境中的中度嗜盐菌不仅能抗衡外界的高渗透压胁迫,而且还能迅速适应短时间内的渗透冲击。为适应该环境,中度嗜盐菌依赖于一种被称为相容性溶质的物质,以执行渗透保护功能。这类物质属于极性的、易溶的和低分子量的有机化合物,其中包括糖类、氨基酸类、甜菜碱类和四氢嘧啶类等。中度嗜盐菌主要采用相容性溶质机制来适应盐环境。在此,就中度嗜盐菌的盐适应机理、相容性溶质的种类和特点,以及其作用的分子机制进行了阐述和讨论。

姜黄素逆转人结肠癌细胞株HCT-8/VCR多药耐药的研究

目的探讨姜黄素对人结肠癌耐药细胞株HCT-8/VCR多药耐药性的逆转作用及可能机制。方法运用MTT法进行药敏试验,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(Rh123)的表达,RT-PCR法检测多药耐药基因mdr1 mR-NA水平的变化,Western blot法检测mdr1基因蛋白产物P糖蛋白(P-gp)表达水平的变化。结果经25μmol/L姜黄素处理后,增强了HCT-8/VCR细胞对VCR的敏感性,其逆转倍数为4.58倍,增加了细胞内Rh123的蓄积(P<0.05),明显抑制了多药耐药基因mdr1 mRNA及其蛋白的表达(P<0.05)。结论本研究结果提示姜黄素能抑制耐药基因的表达及功能,提高细胞对化疗药物的敏感性,从而逆转结肠癌细胞的多药耐药性。

冠心病患者术前应用盐酸戊乙奎醚后心肌氧耗及心率变异性的变化

36例拟行冠状动脉搭桥术患者随机平分为两组,Ⅰ组术前给予东莨菪碱0.006 m g/kg,Ⅱ组术前给予盐酸戊乙奎醚0.01 m g/kg。观察静注前,注药后1、3、5、10、20、30 m in的HR、SBP、DBP、RPP、HRV等变化。结果证明盐酸戊乙奎醚作为冠心病患者术前用药优于东莨菪碱,心率、血压、心率变异性基本稳定,不增加心肌氧耗,安全可靠。

RAPD和SRAP分子标记在真姬菇菌种鉴定中的应用

利用RAPD及SRAP分子标记技术对从国内外收集到的12个真姬菇菌株进行遗传多样性分析。结果表明,20条RAPD引物共扩增出多态性条带285条,18对SRAP引物共扩增出多态性条带176条。在相似系数0.800水平时,RAPD和SRAP分子标记分别将12个真姬菇菌株分为5个和6个类群。两种方法均适用于真姬菇种内鉴定,而SRAP标记较RAPD标记稳定性好,更适于真姬菇的种内鉴定。

Prdx2在结直肠癌细胞增殖、凋亡中的作用及其机制研

目的观察Prdx2基因对结直肠癌细胞SW480增殖及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法将干扰片段(Prdx2-shRNA)及空载体(阴性对照)经慢病毒转染结直肠癌细胞株SW480,1.25μg/ml嘌呤霉素筛选,建立稳定细胞株,以野生型SW480细胞作为空白对照。采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRT-PCR及Western blotting检测Prdx2及survivin的mRNA和蛋白表达情况。结果沉默Prdx2基因对结直肠癌细胞株SW480的生长和增殖有明显抑制作用。与阴性对照(5.59%±0.63%)及空白对照(5.79%±0.60%)比较,Prdx2基因沉默后,细胞凋亡率明显增加(26.60%±4.39%,P<0.05)。qRT-PCR、Western blotting结果显示,干扰Prdx2基因明显降低了survivin mRNA及蛋白表达。结论沉默Prdx2基因可抑制结直肠癌细胞增殖,增加凋亡,其机制可能与下调survivin的表达有关。

绣球菌多糖诱导K562、THP-1细胞凋亡的研究

旨在研究绣球菌多糖对K562、THP-1细胞凋亡的诱导作用。利用MTT比色法测定绣球菌多糖对K562、THP-1细胞增殖的抑制作用;通过吖啶橙染色观察K562、THP-1细胞形态学上的改变;同时利用DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的情况。结果表明:经绣球菌多糖处理后,K562、THP-1细胞的生长受到了显著抑制,最大抑制率分别为46.57%和59.82%;K562、THP-1细胞出现了细胞凋亡的形态学典型特征;同时,琼脂糖凝胶电泳呈现DNA梯形条带。由此说明,绣球菌多糖可在体外抑制K562、THP-1细胞生长并诱导其凋亡。

绣球菌驯化栽培

从野生的绣球菌（Sparassis crispa）子实体中分离纯化绣球菌菌株,通过平板试验、液体发酵试验筛选绣球菌菌丝生长的最佳固体和液体培养基,并用预处理过的松木屑等为材料栽培绣球菌,结果表明：最佳培养基分别为M6（啤酒酵母1.0%、蜂蜜粉0.3%、蛋白胨0.1%、大豆粉0.1%、KH2PO40.1%、琼脂2%p、H 4.5）、L4（M6去掉琼脂）;菌丝在23-25℃条件下培养,约2个月显蕾,菇蕾在12-15℃培养,约4个月得到成熟的子实体,生物转化率约57%。

姜黄素对人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR蛋白质双向电泳图谱的影响

目的探讨姜黄素处理对人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR蛋白质表达谱的影响。方法实验分两组,姜黄素处理组用25μmol/L的姜黄素作用于人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR 24h,对照组加入相应体积的生理盐水。应用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离姜黄素处理组与对照组人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR的总蛋白,凝胶银染显色,采集凝胶图像,用PDQuest 8.0软件分析并比较两者之间差异表达的蛋白质。结果获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT-8/VCR细胞系2-DE图谱,姜黄素处理组和对照组图像的平均蛋白质点数分别为1030±69和1070±96,两者的差异点共33个,姜黄素处理组有8个蛋白点表达上调,18个表达下调,2个在姜黄素处理组特异表达,5个在对照组特异表达。结论建立了经或不经姜黄素处理的人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR的双向凝胶电泳图谱,识别了33个差异表达的蛋白质点,对这些差异蛋白点的进一步分析有助于研究姜黄素逆转结肠癌多药耐药的分子机制。

急性高血容量血液稀释并控制性降压在骨科大手术中的应用

为探讨急性高容量血液稀释（AHHD）并控制性降压（CH）用于骨科大手术对减少术中出血及对Hb、HCT和凝血功能的影响。将96例骨科大手术病人随机平分为AHHD并CH组（T组）48例和对照组（C组）48例，均采用气管插管全麻。T组于麻醉后切皮前输入6％贺斯20ml·kg^-1，以每分钟50ml输注，并泵入硝普钠控制MAP55—70mmHg，分别于稀释前、后、术毕、术后1天、3天抽血查血常规及凝血功能。并记录术中输血量、输液量、出血量、尿量及术后引流量。结果显示，T组仅有12例病人需要输注浓缩红细胞，而C组38例病人需要输血。T组输血量80±54ml。较C组696nd±112ml明显减少。稀释后，Hb、HCT较稀释前明显下降，凝血功能示APTT、PT延长，PLT、FIB减少（P〈0．05），但却都在正常范围，T组术中出血量明显减少，术后引流量无明显区别。表明AHHD并CH可安全用于骨科大手术，明显减少或避免输注异体血。

真姬菇在高温胁迫下的差异表达蛋白分析

采用双向电泳分析Tris-饱和酚法获得的真姬菇菌丝体全蛋白,利用PDQuest8.0软件分析双向电泳图谱,比较最适温度(25℃)和高温胁迫条件下(42℃)真姬菇菌丝体蛋白的表达差异,筛选出与高温胁迫相关的蛋白,并对获得的差异蛋白进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。结果显示,共鉴定7个蛋白点中,Spa2同源结构域的表达量下调,DEHA2G15532p、肽酶M76家族、HSP70、SNF2家族的DNA修复蛋白、细胞色素p450及AM域家族和锌指蛋白的混合物的表达量上调。这些蛋白参与了信号转导、蛋白处理、DNA修复等多种抗逆反应生理过程。