HPLC测定棉籽粕中游离棉酚含量

建立了棉籽粕中游离棉酚（ FG ）的高效液相色谱法（ HPLC ）测定。结果表明, HPLC测定FG的最佳色谱条件为：流动相V（甲醇＋0.2%磷酸）∶V（V（乙腈）∶V（水）=1∶3）=85∶15（分别使用2个进样器）,柱压16.2 MPa,柱温25℃,流速1.0 mL/min,进样量20μL,Waters XTerra？ MS C18不锈钢色谱柱（250 mm ＆#215;4.6 mm,5μm）,UV检测波长235.5 nm。在最佳条件下,能更好地检测棉籽粕中的游离棉酚,棉酚标准溶液的质量浓度与其峰面积呈正相关,相关系数为0.9999,在0.15-5μg/mL之间呈良好线性关系,平均回收率在95.67%-98.99%之间,相对标准偏差在1.28%-2.03%之间。

固氮施氏假单胞菌bifA基因的功能分析

环二鸟苷酸(c-di-GMP)是细菌中一种重要的第二信使,能够调控多种生理活动。C-di-GMP由两个GTP分子经环化酶(DGCs)合成,而被磷酸二酯酶(PDEs)降解,在铜绿假单胞菌中bifA基因为降解c-di-GMP的基因,参与了胞内c-di-GMP的浓度调节。以固氮施氏假单胞菌A1501中的bifA基因为研究对象,构建了bifA基因突变株;鉴定了bifA基因在c-di-GMP降解及生物膜形成中的功能。结果表明,bifA基因的突变造成了A1501菌中c-di-GMP的积累,同时增强了菌株的生物膜形成能力。此外bifA突变株运动能力大幅下降。由此推测bifA为c-di-GMP降解的关键基因,通过调节胞内c-di-GMP水平间接参与调控了生物膜形成以及菌体运动等生理活动。该结果为解析固氮微生物的信号传递及环境适应机制提供了理论基础。