降钙素原与(1,3)-β-D葡聚糖对肺部感染诊断的临床效能

目的评价临床常规工作状态下降钙素原（PCT）与（1,3）-β-D葡聚糖（G试验）单独及联合应用诊断肺部感染的实际效能。方法收集病例1 027例,统计痰涂片及培养阳性分离菌分布组成,分别与微生物检验和胸部CT比对研究PCT和G试验的诊断价值,并研究微生物检验阳性与CT推断性诊断时G试验值分布,系统评价G试验与PCT联合应用对肺部感染的预测能力。结果病原菌分离以烟曲霉菌、多重耐药菌、结核分枝杆菌为主;与微生物检验比较时PCT特异性41.2%,敏感性66.4%;在微生物检验与CT均诊断为肺曲霉菌感染的病例中,G试验中位数与均数均小于临界值;与微生物检验比较,G试验特异性84.1%,敏感性13.2%;在一致病例中G试验中位值112.91,95%CI分布60∽768;CT为参照,G试验特异性75.0%,敏感性21.4%;疑似肺源性败血症病例中,PCT的中位值7.51,三个病例PCT低于阈值;三个病例G试验假阳性。两项检查同时阳性对肺部真菌感染的预测能力仅2.30%,对细菌感染为5.40%;大部分肺部真菌感染的患者PCT并不升高;某些细菌感染G试验也可能升高。结论对于PCT与G试验测定应该谨慎对待,合理分析,综合评价后有选择性的参考。

超声波辅助快速酶法革兰阴性杆菌鉴定系统的研制

目的缩短非发酵菌、弧菌及肠杆菌科革兰阴性杆菌的鉴定周期,加快微生物检验报告时间.方法研制一种可不需经过分科即能实现细菌的种级鉴定的21项7位码的细菌酶学生化反应鉴定系统(包括鉴定卡和检索系统),制定超声波粉碎最佳方案并采用超声波粉碎细菌加快酶的释放,将细菌酶提取液注入鉴定卡中,35℃孵育4～8h观察结果.以标准菌株为质控,传统生化反应方法为金标准,同时与国产鉴定系统GYZ系列(15e、15n、9v)作比较,用室间质控菌株和临床菌株分别进行测试.最后对比经超声波粉碎与不经粉碎的差别,统计该鉴定系统相对于传统方法和国产鉴定系统GYZ系列对测试菌株的符合率,并计算出该鉴定系统鉴定各科细菌时所需时间.结果经标准菌株测试,超声波粉碎细菌前后生化反应无差别(快慢1h内)的有:糖类分解、硝酸盐还原、靛基质、硫化氢、尿素水解、七叶苷水解;轻微差别(快2h)的有:苯丙氨酸脱氨、DNA水解;差异显著(快4h以上)的有:精氨酸双水解、赖氨酸脱羧、鸟氨酸脱羧、ONPG试验.3株标准菌株54项生化反应一致率96.3%;12株室间质控菌株鉴定种级符合率75%,属级92%,错误1株;65株经金标准传统双歧图表法确定的菌株鉴定种级符合率86%,属级95%,错误3株;与GYZ系列平行对照共测试临床分离菌株138株,117株结果相同,一致率85%(χ2＝1.4546, P ＞0.05).本方法对肠杆菌科和弧菌科细菌的鉴定只需4～6h,而对非发酵菌的鉴定为6～8h,比GYZ系统快12～40h.结论该鉴定系统能在不经过分科鉴定的情况下快速鉴定非发酵菌、弧菌及肠杆菌科革兰阴性杆菌至种级水平,为感染疾病的诊断节省宝贵的时间.与传统方法及国产鉴定系统GYZ系列有较好的种属级符合率.说明该系统有较好的研究和应用前景.

以痰涂片形态学为核心的肺曲霉病诊断六步法的介绍

介绍根据工作实践建立的肺曲霉病诊断六步法:以痰涂片镜检为核心,包括不染色标本查看脓细胞、1.78 mol/L KOH透明后集菌镜检查菌丝、革兰染色观察菌丝的包裹现象以及中性粒细胞的退行性变化,另外综合应用培养、GM试验、CT、PCR等多种手段进行肺曲霉病的诊断。肺曲霉病诊断六步法是以痰涂片形态学为核心的综合应用多种诊断手段相结合的诊断体系,可提升该类疾病的检出率,一定程度上减少漏诊。

改良血琼脂的评价与应用

目的 :评价改进配方后的血琼脂平皿细菌分离效果 ,将之应用于临床标本的检测 ,提高苛养菌的检出 ,借以提高总体阳性率。方法 :对 2 9株已知分别来自不同科属的细菌进行GI值的测定和比较 ;采用羊血琼脂和改良血琼脂对2 0 0 0份临床标本 (大便标本除外 )进行测试 ,统计和比较苛养菌的分离率差异及细菌在这两种培养基上的菌落特征一致率。结果 :2 9株已知菌在改良血琼脂培养基上的GI值明显高于传统羊血琼脂培养基 (t =6.72 ,P <0 .0 0 1)。对 2 0 0 0份标本苛养菌的分离率 ,改良血琼脂明显高于羊血琼脂 ( χ2 =394,P <0 .0 5 ) ;细菌菌落特征一致率 96 7%。结论 :改良血琼脂培养基的分离率高且不改变菌落特征。使用该培养基可有效提高分离率 。

新生儿李斯特菌败血症9例临床分析

目的探讨新生儿李斯特菌败血症的临床特点,提高对新生儿李斯特菌败血症的认识。方法回顾性分析2011年1月-2016年6月诊治的9例经血培养确诊的新生儿李斯特菌败血症的临床特点。结果 9例均为早产儿,剖宫产;临床表现主要为发绀(7例)、发热(5例)、气促(4例)、肌张力减弱(4例)、呼吸窘迫(3例)等。9例新生儿血培养均检出李斯特菌,3例在痰液、1例在脑脊液中同时培养出李斯特菌;药敏试验显示,李斯特菌对氨苄西林、青霉素和复方新诺明敏感率最高。9例均在血培养确诊李斯特菌败血症后调整抗感染药物治疗,均痊愈或好转出院。结论新生儿李斯特菌感染是一种严重的感染性疾病。对有发热症状的孕妇,应警惕李斯特菌感染。尽早行病原学检测和目标性治疗有助于改善预后。

痰液细菌学检验的标准化操作程序初探

目的提高痰液细菌学检验的临床符合率的同时,尽可能缩短检验时间,促进呼吸科感染病诊治水平的提高和抗生素滥用的控制。方法通过对痰标本质量和首代分离培养基质量控制的改进,合理搭配使用多种选择性培养基,坚持在直接涂片镜检结果的指导下分离鉴定,采用具有培养鉴定作用的多功能培养基配合快速酶法编码鉴定系统进行鉴定并在鉴定的同时进行药敏试验;以病历调查统计临床符合率。结果痰标本合格率仅为20%～30%,筛选后2000份合格标本分离率为64.7%,苛养性细菌分离率24.7%,其中肺炎链球菌分离率14.4%,流感嗜血杆菌分离率20.8%;629株常见细菌的鉴定正确率97.0%,与常规微量生化编码法对556株非苛养菌的鉴定比较,x2=13.56,P<0.005,差异具有显著性;所有常见菌全部试验可在45h～96h内完成;400份病历初步调查,临床符合率74%。结论痰标本采集合格率低是影响痰液临床符合率的主要因素;应用作者建立的痰液细菌学标准化操作程序(SOP)可提高痰液细苗学检验的阳性率和临床符合率,在一定程度上缩短试验时间,加快报告的进程。

巧克力培养基作为流感嗜血杆菌药敏培养基的可行性探讨

目的巧克力（CHO）培养基作为流感嗜血杆菌药敏培养基可行性探讨，判断巧克力培养基能否代替有效期短需现用现配的嗜血杆菌属试验培养基（HTM培养基）作为流感嗜血杆菌的药敏培养基，为各级医院减少工作量，节约检验成本。方法收集2012年5～12月临床标本分离的流感嗜血杆菌49株，分别用巧克力培养基和CLSI推荐培养基HTM培养基进行抗菌药物敏感试验，并以HTM培养基为参考标准，分析巧克力培养基上流感嗜血杆菌的抗菌药物敏感试验（以下简称药敏试验）结果，计算极重要误差、重要误差、次要误差，一致率。结果在所做的8种抗菌药物中，药物氨苄西林（AMP）、头孢呋辛（CXM）、复方磺胺甲恶唑（SXT）、环丙沙星（CIP）、头孢曲松（CRO）、亚胺培南（IPM）、阿奇霉素（AZM）未出现极重大误差，出现的重要误差均小于5％，这几种抗菌药物可以用巧克力培养基药敏试验结果取代HTM培养基药敏试验结果；但由于四环素（TCY）药敏试验出现了比较高的次要误差（32．7％），因此对于TCY的药敏试验不能用巧克力培养基代替HTM培养基。结论不推荐用巧克力培养基来代替HTM培养基来进行流感嗜血杆菌的体外药敏试验。

三年间住院病人下呼吸道病原菌组成及常见高耐药菌比例变迁

目的对成都市第五人民医院细菌室2005~2007年间下呼吸道标本细菌培养结果作回顾性分析,以探讨三年来该医院住院病人下呼吸道感染病例的病原菌组成及常见耐药菌株例变迁。方法回顾性分析,对比我院住院病人在2005、2006、2007年间所分离的下呼吸道病原菌的组成及常见耐药菌比例变迁。并统计连续三年来的G+球菌与G-杆菌的构成比,苛养菌比例。结果三年间各分离细菌(754株、540株、696株)和真菌(165株、112株、84株),其中烟曲霉菌(20株、8株、33株)呈现上升趋势。病原菌组成的变迁:前五位细菌2005年依次为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌,2006年依次为肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌,2007年依次为肺炎链球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、鲍曼不动杆菌。高耐药菌株比例分别为(PNSP,77%、87%、74%;MRSA,62%、66%、30%;产ESBLs的大肠埃希菌,23%、19%、39%;产ESBLs肺炎克雷伯菌,10%、8%、11%;产高水平AMPC酶的阴沟肠杆菌,36%、100%、80%;产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌,7.5%、8.0%、7.0%;产金属β-内酰胺酶的鲍曼不动杆菌,9.4%,12.5%、8.3%;HLAR屎肠球菌,71%、67%、48%)。苛养性细菌的检出率(肺炎链球菌,39.7%、25.2%、16.7%;流感嗜血杆菌,13.1%,6.8%、7.9%),G+球菌与G-杆菌的构成比(1:1.3、1:1.7、1:3.0)。结论导致住院病人下呼吸道感染的病原菌的主流仍然是肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌等常见呼吸道感染菌;由肠杆菌、非发酵菌等G-杆菌引起的感染比例呈现上升趋势,降低常见高耐药菌株感染将是我们长久而艰巨的任务;与此同时,烟曲霉菌检出例数的增加又给我们控制呼吸道感染提出了一个更加严峻的课题:抗生素合理化应用与严格管理必须进一步落实和加强。

某院流感嗜血杆菌临床分布特点及其耐药性分析

目的了解该院流感嗜血杆菌临床分布特点及其耐药性，为临床医生合理利用抗菌药物提供依据。方法收集该院2012年全年流感嗜血杆菌共132株资料，利用WHONET5．6统计软件进行统计分析。结果在所收集的132株流感嗜血杆菌资料中，产β-内酰胺酶64株，产酶率48.5％；耐药性分析显示：2012年全年该院临床分离出的132株Hin对四环素耐药率最高，达81.1％，其次复方新诺明71.9％，氨苄西林48.5％，而对头孢曲松、亚胺培南、环丙沙星、阿奇霉素仍具有很好的敏感性，无1例耐药。结论头孢第2代、第3代、第2代喹诺酮类、大环内酯类、碳青霉烯类，可作为临床经验治疗的首选药；而四环素、磺胺类抑菌活性稍差（耐药率大于或接近50％），说明此类药物不适宜作为临床经验治疗。

降钙素原与(1,3)-β-D葡聚糖单独及联合对肺部感染的诊断价值评价

目的完全随机评价降钙素原(PCT)与(1,3)-β-D葡聚糖(G试验)单独以及联合的情况下诊断肺部感染的实际价值。方法收集2013年1月24日-2014年1月25日1 027例拟诊下呼吸道感染患者;统计痰培养阳性分离菌分布组成;分别以痰涂片及培养和胸部CT为参照对比研究PCT和G试验的诊断价值;观察特定条件下PCT分布;研究以痰培养与CT诊断为参照时G试验值分布;痰培养与血培养结果相同的单独讨论;最后,分别评价PCT与G试验阈值上下4种组合情况下,G试验与PCT联合应用对肺部曲霉菌及细菌感染的检出能力。结果病原菌分离以烟曲霉菌、多重耐药菌、结核分枝杆菌为主;在疾病时,PCT为一偏态分布,中位数为2.06 ng/m L。PCT单独与联合痰培养具有相似分布;以痰培养作为参照时PCT特异度为66.4%,灵敏度为41.2%;在痰培养与CT均诊断为肺曲霉菌感染的病例中,G试验中位数与均数均小于临界值;以痰培养为参照,G试验特异度为84.1%,灵敏度为13.2%;在痰培养与G试验均阳性病例中,G试验中位数为112.91 pg/m L;以CT为参照,G试验特异度为75.0%,灵敏度为21.4%;痰培养与血培养结果相同病例中,PCT的中位数为7.51 pg/m L,3例PCT低于阈值;3例G试验假阳性。在PCT与G试验联合诊断评价中,认为同时阳性不能确认,同时阴性不能排除肺部感染。结论对于PCT与G试验测定应该谨慎对待,合理分析,综合评价后有选择性地参考。

2013年常见分离菌分布及耐药变迁

目的了解2013年常见分离菌分布情况、耐药组成以及主要多重耐药菌的耐药变迁,为临床合理选用抗菌药物及控制医院感染提供科学依据。方法纳入2013年1月1日-12月31日就诊患者送检的细菌培养标本累计32 566份。采用手工双歧索引鉴定与半自动鉴定药物敏感性(药敏)系统相结合的方法鉴定细菌;按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)规范进行药敏试验以及常见耐药机制检测。根据2011年欧洲疾病预防控制中心(CDC)、美国CDC、CLSI以及美国食品药品监督管理局形成的国际共识定义判断多重耐药菌。采用WHONET5.6统计软件进行数据统计分析。分析多重耐药菌从2012年到2013年的耐药变迁。结果检出的3 684株分离菌中,G-菌占76.08%,G+菌占16.80%,真菌占7.11%;苛养菌占17.29%;前10位分离菌分别是:大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、烟曲霉菌、卡他莫拉菌及弗劳地枸橼酸杆菌。其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌检出率从2012年第1季度的40.23%,上升到2013年第4季度的53.54%,产ESBL肺炎克雷伯菌从14.28%上升到34.78%,广泛耐药鲍曼不动杆菌从62.38%上升到99.25%,产金属酶铜绿假单胞菌从7.37%到25.37%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌从23.81%上升到58.70%,耐万古霉素肠球菌从0.00%上升到28.12%。结论在2013年分离菌中,G-菌所占比例最高,各种多重耐药、泛耐药菌检出率持续上升,提示应重视病原学检测,减少经验性用药,合理使用抗菌药物,做好医院感染控制,减少耐药菌株出现,防止耐药菌流行。

肺炎链球菌鉴定方法分析

目的对从临床标本中分离出的302株成对或短链排列形似肺炎链球菌的革兰阳性球菌进行系统准确鉴定,借此探讨肺炎链球菌鉴定常规方法的不足,提出较为科学的方法。方法自2013年12月-2014年11月两所医院59 607份临床标本中分离出形似肺炎链球菌302株,以形态学、奥普托欣(OP)敏感试验、肺炎链球菌乳胶凝集作为初步鉴定手段,再结合胆汁溶菌等传统生化反应试验,以及Lancefield抗原乳胶试剂凝集试验,对细菌进行系统鉴定。结果 113株细菌被最终鉴定为肺炎链球菌,124株鉴定为C群或F群链球菌,其中87株既与肺炎链球菌乳胶试剂发生非特异性凝集又与Lancefeild C/F乳胶凝集;8株链球菌OP敏感但生化反应和乳胶均不支持;OP耐药乳胶凝集与生化反应支持的有7株,OP敏感生化反应支持但乳胶凝集均阴性的有3株;以生化反应符合加上OP与乳胶凝集中的一种试验符合作为最终鉴定结论,计算出肺炎链球菌乳胶试剂的假阴性为2.6%、假阳性为46.0%。结论鉴定肺炎链球菌,传统生化反应方法不可废弃,综合使用多种手段鉴定细菌可以有效防止鉴定错误。

(1,3)-β-D-葡聚糖在肺曲霉菌感染中的诊断价值

目的探究1,3-β-D-葡聚糖(G试验)与痰培养对临床肺部曲霉菌感染的诊断价值,为临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析2013年1月1日-12月31日呼吸系统感染患者送检27 560份痰液标本,150份曲霉菌属检出阳性,其中有41份进行G试验,比较G试验、痰培养与CT诊断结果之间的一致性,数据采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果 41份曲霉菌属阳性标本中G试验结果阳性12份符合率29.3%,CT结果阳性28份符合率68.3%;G试验结果与痰培养及CT结果均一致有9份,CT与G试验对肺曲霉菌的诊断差异有统计学意义(P<0.005),CT阳性率高于G试验。结论 G试验与痰培养及CT检查之间的符合率低,不能作为肺曲霉菌感染的诊断指标,痰培养仍不失为肺曲霉菌感染的重要参考方法。