马铃薯渣作培养代料的两种侧耳属食用菌菌糠中两种饲用酶活性的检测研究

本研究以培养代料含马铃薯渣的凤尾菇菌糠、小白侧耳菌糠为研究对象,检测其中植酸酶及β-葡聚糖酶的酶活。凤尾菇菌糠植酸酶酶活在pH2.5下为0.0822U/g,在pH5.2下为0.0786U/g。小白侧耳菌糠植酸酶酶活在pH2.5下为0.1052U/g,在pH5.2下为0.1027U/g。凤尾菇菌糠β-葡聚糖酶酶活0.0260U/g,侧耳β-葡聚糖酶酶活为0.0354U/g。结果表明,加入马铃薯渣做培养代料的凤尾菇、小白侧耳菌糠具有一定的饲用酶活性,用其作禽畜饲料加工时,可适量减少饲用酶的加入量,以节约成本。

三个拟南芥NAC同源基因突变体的ABA响应及下游基因表达分析

在获得拟南芥NAC同源基因(NAC019、NAC055和NAC072)双突变体和三突变体纯系的基础上,进一步分析它们对ABA响应的生理差异及其ABA诱导相关下游基因的表达变化,深入探讨它们与ABA响应的关系。结果表明,在种子绿胚建成的过程中,NAC055和NAC072基因与ABA响应相关;在根生长方面,三者在ABA响应中作用不明显。经ABA处理后,突变体nac072和nac055nac072与野生型比较,RAB18、RD29A和RD29B基因表达上调显著,推测在ABA响应的基因表达调控过程中,NAC072和NAC055起负调控协同作用,而NAC019则发挥拮抗作用。

TLR4在LPS诱导的结肠炎症恢复中的作用

目的:研究Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4)在结肠炎症中的作用,探讨LPS在炎症性肠病中的治疗作用。方法:取正常肠上皮细胞进行体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预培养。采用慢病毒转染技术,构建TLR4低表达、正常表达及高表达的肠上皮细胞亚组。正常表达组(normal组)及高表达组(high组)培养基中加入LPS诱导细胞炎症,刺激时间分别为0、2、4 h。Western blot法检测TLR4的表达;收集细胞上清液,ELISA检测各亚组细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的水平。收集细胞,qPCR检测细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1βmRNA的表达水平。划痕试验观察对比2组细胞的迁移能力。结果:LPS干预培养细胞后,TLR4的表达量显著增加(P<0.05)。ELISA和qPCR检测高表达组与正常表达组组间细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1β的蛋白和mRNA水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。划痕试验提示TLR4高表达组的细胞迁移能力明显高于正常对照组。结论:LPS影响TLR4炎症通路的活化,促进前炎症因子及辅助刺激分子的释放,起到调节炎症反应的作用。

重组人胰激肽原酶在大肠杆菌中的表达

根据人胰激肽原酶的氨基酸序列,采用大肠杆菌偏爱密码子,设计合成目的基因片段约750 bp。将设计得到的片段连接到pET-22b(+)表达载体中并测序,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达。将IPTG诱导表达的菌体进行SDS-PAGE电泳,在相对分子质量24 kD处可明显观察到高表达带,主要以包涵体形式存在,质量分数可达21.6%,进一步测得蛋白活性为2.27 nmol/s。利用MALDI串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定蛋白,蛋白得分106,大于可信得分83(P<0.05),确定了蛋白一级结构的正确性。

基于文献计量学的中国甲状腺外科热点分析

目的分析1989-2018年我国甲状腺外科研究的热点和相关方向,以及探索不同区域研究热点差异性。方法以中国生物医学文献数据库(sinomed数据库)为目标数据源,用主题词的检索方式,检索时间定位于1989年1月至2018年12月。采用聚类分析方法,用书目共现分析系统获得相关数据资料的统计值;采用文献计量学方法,用布拉德福定律的应用公式可求得核心区期刊文献数量P=2Ln(e^E×Y),便可近似的分析出1989年到2018年中国专业学术期刊发表的有关甲状腺外科文献的主题词相关热点研究、核心期刊分布与文献量、地区文献研究差异,并获得甲状腺外科的近三十年总体的发展趋势。结果发文量和核心期刊分布特点:最终获得相关文献总量共7686篇。主题词分布特点:“手术后并发症”“喉返神经”“出血”在1989-1998年、1999-2008年、2009-2018年3个时段中出现频次均最高。地区文献的研究特点:分布在32个省(市)和地区。其中以广东省发文量最多,达到951篇,约占文献总量的13%。同时发现热门主题词在东中西三部的差异不具有统计学差异。结论我国甲状腺外科文献数量近三十年总体呈明显增长趋势;“手术后并发症”“甲状腺癌”“喉返神经”“甲状旁腺”和“出血”等主题词一直是甲状腺外科研究热点;不同地域间的甲状腺外科的研究方向不具有差异性,以广东、浙江为主的东南部省份发文量较多。

甲状腺肿瘤的循环肿瘤细胞检测以及临床应用

循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTCs)指自发的或者是诊疗过程中进入外周血液循环的肿瘤细胞。因此在外周循环中检测到肿瘤细胞即预示着有可能已经发生了肿瘤转移。所以,CTCs的检测作用对于临床诊断、病情监测及发现早期存在的微转移等具有重要意义。本文对CTCs现有的富集、检测方法及其在甲状腺肿瘤诊断与治疗中的研究进展进行概括、总结,并提出CTCs的临床应用前景。

响应面法优化马铃薯渣在凤尾菇培育中的应用研究

使用响应面分析法优化了马铃薯渣作为培养基代料的凤尾菇培育方法,得出了温度为20℃、pH为7.0、培养基含马铃薯渣9%的最优培育条件。于此条件下实际收获凤尾菇171g,与理论值174.555g接近,既提高了凤尾菇产量,又合理地利用了马铃薯渣。由此法获得的凤尾菇质量高,菇形饱满,色泽鲜亮且菇香浓郁。

响应面法优化两种食品工业废料在小白侧耳培育中的应用研究

将土豆渣、凤尾菇菌糠——两种食品工业常见废料用于小白侧耳培育,并以响应面法对培养基配比进行分析和优化。得到温度为18℃,pH值为7.0,培养料含土豆渣29%、凤尾菇菌糠58%的最优培养条件。于此条件下实际收获小白侧耳98g,与理论值104.717g接近。所收获之菌菇色泽纯白,香气浓郁。该方法合理有效地消耗和利用了价值几乎为零的两种工业废料,变废为宝,节约废旧材料处理人物力成本的同时,亦有效增地加了经济价值。

正交法优化马铃薯渣作培养代料培育凤尾菇及其菌糠中β-葡聚糖酶和植酸酶活性的检测研究

使用正交法优化了马铃薯渣作为培养基代料的凤尾菇培育方法,得出了温度为20℃、马铃薯渣加入量为8%、棉籽壳加入量为70%、pH为7.0最优培育条件,于此条件下实际收获凤尾菇172 g。对菇体采摘后的菌糠进行了2种酶活检测,β-葡聚糖酶活性为0.0260 U/g,植酸酶活性在pH2.5下为0.0822 U/g,在pH5.2下则为0.0786 U/g,活性均偏低,不宜提取,但可在其用作饲料加工时相应减少2种酶添加量,以降低成本。该法在提高凤尾菇产量的同时合理利用了马铃薯渣,并为菌糠酶的开发利用做了探索研究。

马铃薯淀粉废水处理新工艺的开发研究

研究将物理、化学及生物等方法相结合用以马铃薯淀粉废水处理。经过蛋白质沉淀、加热、离心、脱色、过滤等物化处理后,再利用葡萄糖氧化酶将马铃薯淀粉废水进行生物酶降解反应。实验得出最优反应条件:马铃薯淀粉废水在pH4.0条件下蛋白沉淀、80℃加热、加入1%活性炭脱色,化学需氧量(COD)下降约30%,理化方法处理后水样接近无色透明状。pH6.0、温度40℃下利用葡萄糖氧化酶进行酶解反应,其还原糖含量下降约90%,而化学需氧量(COD)下降约85%。