高温湿热酸法破壁提取法夫酵母胞内虾青素

法夫酵母是一种能积累虾青素的红酵母,对其进行破壁是当前虾青素工业化提取生产的瓶颈工艺。研究在高温湿热条件下,低浓度盐酸对法夫酵母破壁而提取其胞内虾青素的工艺。探讨了不同破壁温度、盐酸浓度、液料比与破壁处理时间等因素对法夫酵母破壁后虾青素及类胡萝卜素提取率的影响,确定了高温湿热酸法破壁提取虾青素的最佳条件为:饱和蒸汽压力0.1MPa(121°C),盐酸浓度0.5mol/L,液料比(V/W)30mL/g,破壁时间2min。在最佳条件下进行中试放大实验,可得到虾青素与类胡萝卜素的提取率分别为:(84.8±3.2)%,(93.3±2)%。经优化后的新破壁工艺安全高效,不会有毒性残留,具有良好的工业应用前景。

鲤鱼红色肉中金属蛋白酶的分离纯化与性质分析

通过硫酸铵盐析、DEAE—Sephacel离子交换、Sephacryl S-200凝胶过滤、High-Q离子交换和Gelatin—Sepharose亲和层析等方法，从鲤鱼红色肉中纯化得到分子量为75ku的金属蛋白酶．该酶在碱性条件下显示活性，活性温度范围为30～50℃．金属蛋白酶抑制剂EDTA和EGTA能够完全抑制该酶的活性，而其他蛋白酶类抑制剂则不起抑制作用．进一步研究发现，该酶能够有效分解Ⅰ型胶原蛋白和明胶，说明其在鱼体死后肌肉软化过程中起着重要作用．

鳜鱼(Siniperca chuatsi)幽门垂中两种胰蛋白酶的cDNA克隆及其生物信息学分析

采用RT-PCR、3′-RACE及5′-RACE技术从鳜鱼幽门垂组织中克隆了两种胰蛋白酶(分别命名为TRS-A与TRS-B)cDNA全长序列。将测序结果递交GenBank数据库,分别获得登录号为ACD70339和ACD70340。采用生物信息学的方法和工具预测了鳜鱼胰蛋白酶的理化参数及其高级结构,并构建了系统进化树。结果表明:(1)TRS-A和TRS-B的cDNA开放阅读框编码的蛋白序列中均含有一段长度为15个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸残基组成的激活肽、222个氨基酸残基组成的成熟蛋白区域;(2)TRS-A成熟蛋白的相对分子量为24.1kDa、理论等电点为5.69,TRS-B的相对分子量为24.2kDa、理论等电点为5.75;(3)建立了TRS-A和TRS-B的三维结构模型,预测了其活性位点及12个半胱氨酸残基形成二硫键的位置。