胆固醇对血管内皮细胞的损伤

目的研究胆固醇对人血管内皮细胞的损伤作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,分别以浓度为6.25、12.50、25.00、50.00mg/L的胆固醇作用于ECV304细胞48h,检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactatedehydro-genase,LDH)活性,一氧化氮(nitricoxide,NO)浓度,一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)浓度。结果与无胆固醇组比较,胆固醇浓度为50.00mg/L时培养液中LDH活性显著增加;25.0mg/L,50.0mg/L浓度组培养液中NO浓度显著降低;胆固醇浓度为6.25、12.5、25.0、50.0mg/L组与无胆固醇组比较,随着胆固醇浓度提高,培养液中NOS活性逐渐降低,MCP-1浓度逐渐增高,有显著性差异。结论一定浓度的胆固醇能直接损伤人血管内皮细胞结构,影响内皮细胞的部分分泌功能。

胆固醇对血管内皮细胞基因组DNA甲基化的影响

目的:研究胆固醇对人血管内皮细胞基因组DNA甲基化水平的影响。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞ECV304,以50.00 mg/L的胆固醇作用于ECV304 48 h,提取细胞基因组DNA,用高效液相色谱法(HPLC)检测基因组DNA甲基化水平。结果:与无胆固醇的对照组比较,50.00 mg/L胆固醇使ECV304细胞中DNA甲基化水平显著下降(P<0.01)。结论:一定浓度的胆固醇能降低血管内皮细胞中DNA甲基化水平。

金雀异黄素抑制人血管平滑肌细胞中核因子κB的激活

目的研究金雀异黄素对氧化型低密度脂蛋白诱导的人血管平滑肌细胞中核因子κB激活的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法以体外培养的人脐静脉平滑肌细胞为对象,用50 mg/L的氧化型低密度脂蛋白作用细胞2 h,并加入不同浓度金雀异黄素(10,30,90 mol/L)对其进行干预,免疫细胞化学方法检测各组血管平滑肌细胞中核因子κB亚单位p65核移位阳性细胞数,Western blot法检测细胞内κB抑制蛋白-α含量变化,硝酸还原酶法测定各组细胞培养液中一氧化氮生成量。结果人脐静脉平滑肌细胞经氧化型低密度脂蛋白刺激2 h后,其核移位阳性细胞数为76.67±3.21,与空白组1.33±0.58相比明显增加(P<0.01),再与不同浓度金雀异黄素共同孵育2 h后,核移位阳性细胞数分别为28.33±2.52,19.67±1.53和15.67±2.89,与单纯给予氧化型低密度脂蛋白刺激相比明显减少(P<0.01),且随着浓度升高有递减的趋势;30,90μmol/L金雀异黄素能明显增加细胞内κB抑制蛋白-α的含量;各组细胞培养液内的一氧化氮生成量差异无显著性。结论金雀异黄素能抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞中核因子κB的活化;其作用机制可能涉及增加细胞内κB抑制蛋白含量,未发现与一氧化氮有关。

2014—2019年贵州某医院耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药及分布特点

目的分析贵州某三甲医院2014—2019年近5年耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae bacteria,CRE)的分布及耐药性。方法采用自动化仪器MIC法、纸片扩散法(K-B法)和E-Test法结合对临床分离CRE进行药敏试验,并按2019年CLSI标准判断药敏试验结果,采用WHONET 5.6软件做回顾性统计分析。结果2014—2019年共分离1163株CRE,其中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)667株占57.35%,耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CRECO)134株,占11.52%。CRE主要分离自重症监护室(ICU,148株,12.73%)、神经内科重症监护室(NICU,96株,8.25%)和急诊科重症监护室(EICU,87株,7.48%),以呼吸道标本(587株,50.15%)及尿液标本(187株,16.11%)来源为主。药敏结果显示CRE普遍耐药,其中CRKP对大多数抗菌药物耐药率在90.0%以上;CRECO对阿米卡星敏感,耐药率仅为20.1%;耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌对喹诺酮类抗菌药物左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率为30.6%、41.8%。结论CRE耐药情况严峻,临床应根据药敏结果制定合理的抗感染治疗方案,并加强医院感染控制措施的落实,减少耐药菌的产生。

中枢神经系统(脑脊液)感染病原菌分布特点及耐药性

目的探讨中枢神经系统感染病原菌分布与耐药性。方法选取贵州省人民医院2014年—2019年收治的中枢神经系统感染患者脑脊液标本,进行病原菌鉴定及药物敏感试验。结果共分离出350株病原菌,主要来源于神经外科(35.1%)、儿内科(14.3%)、儿科重症(13.1%)、神经内科(10.3%)及ICU(5.1%)。350株病原菌中,革兰阳性菌182株,占52%;革兰阴性菌168株,占48%。革兰阳性菌中屎肠球菌和粪肠球菌对青霉素G耐药率为10%以上、对利福平、红霉素、四环素耐药率60%以上,对万古霉素、利奈唑胺耐药率低。革兰阴性菌中大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、复方磺胺甲恶唑、四环素耐药率达65.0%以上,对碳青霉烯类敏感。鲍曼不动杆菌对常用的抗菌药物耐药率较高。结论了解中枢神经系统感染病原菌及耐药性,对指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。

贵州省人民医院综合ICU病区临床分离株的耐药及分布特点

目的了解ICU病区临床分离菌株耐药性的变迁,为临床合理用药提供依据。方法收集2014—2019年间ICU病区患者送检标本的细菌培养及体外药敏试验数据,使用WHONET5.6软件对数据进行统计分析。结果 2014—2019年共分离出非重复菌2426株,其中革兰阴性菌1894株(78.1%)、革兰阳性菌532株(21.9%);居前5位的革兰阴性菌是鲍曼不动杆菌(26.0%)、肺炎克雷伯菌(16.5%)、大肠埃希菌(12.0%)、铜绿假单胞菌(9.7%)和黏质沙雷菌(3.1%);居前5位的革兰阳性菌是金黄色葡萄球菌(29.3%)、屎肠球菌(21.8%)、粪肠球菌(10.5%)、肺炎链球菌(8.3%)、表皮葡萄球菌(7.0%);标本类型以痰液(70.3%)、血液(12.4%)、分泌物(4.7%)和尿液(2.4%)为主;鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药率分别>75%和 >20%,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对碳青霉烯类的药物耐药率分别为>35%和<3%。结论 ICU病区以鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为主,近年来肺炎克雷伯菌的分离率明显增高,非发酵菌和肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药率呈上升的趋势,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率呈逐年下降的趋势加。强医院内感染防控措施及细菌耐药监测,合理使用抗菌药物。

2018年贵州省人民医院细菌耐药监测报告

目的:了解贵州省人民医院2018年临床分离株对常用抗菌药物的耐药性.方法:采用自动化仪器MIC法,纸片扩散法(K-B法)和E-Test法对临床分离株进行药敏试验,并按美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2017年标准判断药敏试验结果,数据分析采用WHONET5.6软件,对2018年细菌耐药资料作回顾性调查分析.结果:2018年共收集非重复分离菌8534株,革兰阴性菌为67.8%(5784/8534),革兰阳性菌33.2%(2750/8534).排名前三的细菌分别为大肠埃希氏菌,肺炎克雷伯氏菌,金黄色葡萄球菌.其中分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)308株,检出率为37%(308/834);大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率分别为1.2%,18.5%;铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为22.1%;鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别为64.4%.结论:对细菌耐药性进行长期监测有助于了解我院细菌耐药性的变迁,为临床合理用药提供依据.

2014—2019年贵州省人民医院儿童患者感染病原菌分布及耐药性分析

目的了解儿童患者感染病原菌的分布及常见病原菌的耐药情况,为儿科临床合理应用抗菌药物提供参考。方法收集2014年至2019年贵州省人民医院儿童患者的各类临床标本,对病原菌的分布及其耐药情况进行回顾性分析。结果共分离出13802株病原菌,革兰阳性菌6110株,占44.3%;革兰阴性菌7692株,占55.7%。药敏结果显示,肺炎链球菌对红霉素、克林霉素以及四环素的耐药率超90.0%,对青霉素G耐药率达59.8%,对头孢菌素类、喹诺酮类抗菌药物敏感性高,未见利奈唑胺、万古霉素耐药菌株。流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率67.3%,对头孢呋辛耐药率为24.3%,头孢克洛耐药率为39.4%,对头孢菌素三代和四代药物、喹诺酮类、大环内酯类、碳青霉烯类敏感。卡他莫拉菌对氨苄西林耐药率为26.8%,复方磺胺甲恶唑耐药率14.5%,四环素10.8%,对喹诺酮类敏感,耐药率在1.0%以下,未见阿奇霉素、氨曲南、亚胺培南、美罗培南耐药。结论临床医生应尽可能在经验性用药之前留取标本,根据致病菌和药敏情况合理使用抗菌药物,以减少耐药菌的出现。

DC-CIK细胞联合治疗恶性肿瘤的免疫疗效分析

目的:探究DC-CIK细胞联合治疗恶性肿瘤的免疫疗效。方法:选择本院2012年4月至2016年4月100例恶性肿瘤患者,采取随机的方式,分为对照组与观察组,对照组采取常规化疗方式治疗,观察组采取DC-CIK细胞联合治疗,对比两组患者免疫功能变化及不良反应发生情况。结果:观察组患者免疫功能变化情况均优于对照组,P<0.05。观察组患者不良反应发生率2.00%,显著低于对照组,P<0.05。结论:采用DC-CIK细胞联合治疗恶性肿瘤患者,能够有效改善患者免疫功能,且降低了其不良反应发生率,值得应用。

2014—2019年贵州某医院下呼吸道感染病原菌分布及耐药性

目的分析2014—2019年贵州省人民医院下呼吸道感染患者分离细菌的分布及耐药性。方法采用美国BDphoenix100全自动细菌培养鉴定仪及配套试剂进行鉴定,药敏试验采用纸片扩散法及E-Test法,按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)中M100-S29的标准执行,采用WHONET 5.6软件对资料进行统计。结果2014年—2019年贵州省人民医院下呼吸道标本共分离23718株细菌,其中革兰阴性菌占75.66%,革兰阳性菌占24.34%,前10位细菌依次为肺炎链球菌14.64%(3742/23718)、流感嗜血杆菌14.03%(3327/23718)、肺炎克雷伯菌12.78%(3030/23718)、鲍曼不动杆菌9.20%(2182/23718)、金黄色葡萄球菌8.66%(2054/23718)、铜绿假单胞菌7.87%(2182/23718)、大肠埃希菌7.18%(1703/23718)、卡他莫拉菌4.97%(1179/23718)、嗜麦芽窄食单胞菌3.70%(878/23718)、阴沟肠杆菌3.61%(857/23718)。药敏结果显示,MRSA检出率35.7%,未发现万古霉素、利奈唑胺耐药菌株;肺炎链球菌对左氧氟沙星敏感;流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率在60.0%以上;肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药率在11.0%以上,大肠埃希菌及阴沟肠杆菌的耐药率均低于5.0%;鲍曼不动杆菌对米诺环素以外的其他抗菌药物耐药率在50.0%以上。结论贵州省人民医院下呼吸道分离细菌以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药率呈增长趋势,应继续加强抗菌药物合理应用的管理及医院感染防控。

某三甲医院2014—2019年泌尿道感染病原菌及其耐药性分析

目的分析贵州省人民医院2014—2019年尿培养阳性病原菌的分布、构成情况和耐药性,为泌尿道感染治疗和防控提供基础数据。方法通过WHONET5.6软件回顾性分析贵州省人民医院2014—2019年尿液标本培养分离出的病原菌的特点、分布情况及耐药性。结果尿培养阳性标本共分离出8658株病原菌,数量占前7位的分别为大肠埃希菌(3806株,35.6%)、屎肠球菌(1005株,11.6%)、粪肠球菌(994株,11.5%)、肺炎克雷伯菌(600株,6.9%)、奇异变形杆菌(230株,2.7%)、铜绿假单胞菌(204株,2.4%)和阴沟肠杆菌(172株,2.0%)。不同科室和不同性别患者感染病原菌的分布特点和构成具有差异。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢吡肟、头孢噻肟、氨苄西林、头孢唑林、四环素、复方磺胺甲噁唑和哌拉西林耐药率大于50.0%,对美罗培南、亚胺培南、哌拉西林/三唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸和阿米卡星耐药率分别低于10.0%和30.0%;屎肠球菌和粪肠球菌对利福平、环丙沙星和红霉素耐药率分别高于90.0%和50.0%,对高浓度庆大霉素耐药率分别为61.1%和45.4%,对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁敏感性高。结论不同科室和不同性别患者泌尿系统感染病原菌的构成及病原菌耐药性具有差异,临床医生应根据尿培养病原菌药敏试验结果合理选择抗生素,以提高疗效,减少耐药菌株产生和院内交叉感染。

贵州某医院2014—2019年老年患者临床分离菌的分布特点和耐药性分析

目的了解2014—2019年贵州某医院老年患者临床分离菌的分布特点及对抗生素的耐药性。方法采用phixone;100鉴定系统进行细菌鉴定,Kirby-Bauer纸片扩散法和全自动仪器进行药敏试验,按照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2019年标准判断结果。结果收集到老年患者临床分离菌12903株,其中革兰阳性菌占22.7%,革兰阴性菌占77.3%。呼吸道标本是病原菌的主要来源,占53.3%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率为38.7%、85.9%。青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)检出率为9.2%。肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率分别为10.7%、20.4%,对美罗培南的耐药率分别为10.4%和13.8%,鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均达到61.0%。结论通过对老年患者临床分离菌的分布特点和耐药性进行分析,对促进老年患者个体化抗感染治疗和遏制细菌耐药蔓延具有重要指导意义。

独活寄生汤提取物治疗椎间盘退变性疾病机理实验研究

目的：探讨独活寄生汤治疗腰椎间盘退变性疾病的机理。方法：选取6-8月龄雄性新西兰白兔24只，随机分为3组各8只。退变组和中药组白兔制作椎间盘退变模型，中药组给予独活寄生汤的水煎剂喂养，退变组、对照组不予中药喂养，8周后，每组取1只白兔对其进行椎间盘切片观察；24周后，对每组剩余的白兔取L4-L5椎间盘染色观察，培养软骨终板细胞，进行细胞形态学的观察，并测其上清液中的白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。结果：对照组软骨终板矢面观，周边较厚而中央较薄，中央部血管芽较多且较膨大，周边部血管较少且较细小。对照组软骨终板结构，可见深层软骨细胞胞体较大，胞核相对较小，呈圆形或椭圆形而表层软骨终板细胞胞体扁平，胞核亦呈扁平状，在软骨终板与椎体股之间可见潮标。中药组软骨终板厚，细胞数目较多，血管芽直接与软骨终板接触，潮标未见前移。退变组软骨终板较对照组明显变薄，细胞数亦减少，潮标明显前移，血管芽周围钙化，包裹血管芽大部分。退变组软骨终板变薄，细胞数减少，染色较淡。中药组软骨终板细胞培养液中IL-6和TNF-α的含量均高于对照组和退变组（P〈0．05），IL-1β的含量高于对照组（P〈0．05），但低于退变组（P〈0．05）。结论：独活寄生汤提取物对腰椎间盘退变模型白兔腰椎间盘IL-1β、IL-6、TNF-α有促进作用，可能为其治疗腰椎间盘退变性疾病的机制之一。

大豆异黄酮减轻大鼠非酒精性脂肪肝病变的作用研究

目的研究大豆异黄酮(SIF)对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)病变的影响及可能机制。方法2017年3月选取雄性SD大鼠24只,建立大鼠NAFLD模型,采用随机数字表法将大鼠分为健康对照组(7只)、健康给药组(5只)、模型组(7只)和模型给药组(5只)。采用苏木精-伊红染色观察大鼠肝脏病理改变,生化方法检测大鼠肝脏抗氧化因子变化,实时定量-聚合酶链反应检测大鼠肝脏炎性细胞因子单核细胞趋化蛋白(MCP-1) mRNA转录量,免疫组织化学法检测大鼠肝脏MCP-1蛋白表达量。结果成功建立大鼠NAFLD模型; SIF能减轻模型大鼠肝脏的病理改变,显著增加大鼠肝脏超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽的活力,降低丙二醛含量,明显抑制MCP-1 mRNA的转录,降低肝脏MCP-1蛋白的表达,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论 SIF可能通过增强肝脏抗氧化能力、抑制炎症相关基因表达,从而减轻高脂诱导的NAFLD大鼠肝脏的脂肪性改变。

单核细胞趋化蛋白-1诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的分子机制(英文)

本研究旨在探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotacitic protein-1,MCP-1)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,hUVECs)凋亡的分子机制。胶原酶消化收集hUVECs,体外培养细胞,用胰蛋白酶-EDTA混合液消化传代,用血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)和VEGF受体2(KDR)免疫染色证实培养细胞为内皮细胞;用不同浓度MCP-1(0.1、1.0、10、100ng/mL)分别作用hUVECs24h、48h;用流式细胞术及蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2、Bax的表达。如我们前期结果所示,MCP-1能诱导hUVECs的凋亡,其效应随浓度和时间的增加而增强;与对照组比较,MCP-1下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Fas、Bax的表达。以上结果表明,MCP-1能诱导hUVECs凋亡,其作用机制可能与上调Bax、Fas蛋白及下调Bcl-2蛋白表达有关。