miR-155靶向CARHSP1参与动脉粥样硬化泡沫细胞形成的分子机制

本刊编委，武汉市中心医院检验科卢忠心教授（通讯作者）指导硕士研究生李晓怡（第一作者）等在《Scientific Reports》（2016Feb22；6：21789，IF：5．578）发表了题为＂miR-155 acts as an anti-inflammatory factor in atherosclerosis- associated foam cell formation by repressing calcium-regulated heat stable protein 1＂的研究论文，主要内容如下：

LMP1与细胞凋亡

LMP1为EBV编码的病毒瘤蛋白,具有促进细胞增殖、调控细胞凋亡等多种生物学效应。LMP1有可能成为EBV相关肿瘤治疗的分子靶标。

端粒酶活性调节的研究进展

端粒是真核细胞线性染色体末端6bp重复序列及相关蛋白质组成的特殊结构,端粒酶是合成端粒DNA重复序列的逆转录酶。普遍认为端粒酶在肿瘤的发生发展中具有重要作用。端粒酶在体内是如何被调节的,目前还知之甚少。对端粒酶活性调节的研究包括激活与抑制两个方面,抑制端粒酶以治疗肿瘤,激活端粒酶以延缓衰老。

蛋白质组学研究在确定新的肿瘤标志物中的意义

随着蛋白质组学技术、高通量技术及生物信息学技术的发展 ,越来越多的肿瘤标志物被发现 ,并将逐步应用于临床 ,这些进展必将为肿瘤的早期检测和风险评价提供可靠的依据。现综述蛋白质组学研究策略在肿瘤标志物的筛选和鉴定中的应用。

两步电泳法测定血清中间密度脂蛋白和β-极低密度脂蛋白

测定血清中间密度脂蛋白(IDL)和β-极低密度脂蛋白(β-VLDL)在临床诊断Ⅲ型高脂蛋白血症上是很有用的。目前IDL和β-VLDL测定方法有连续超速离心法和琼脂糖电泳法。本文应用Regina提出的两步电泳法,井进行改良来定量测定血清中的IDL和β-VLDL。

联合检测hs-CRP、PCT和BNP在COPD急性恶化期中的诊断价值

目的探讨联合检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)和B型脑钠肽(BNP)水平在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性恶化期的诊断价值。方法选择56例COPD稳定期患者及44例COPD急性恶化组患者,分别测定其血常规、PCT、hs-CRP及BNP,同时进行痰细菌培养。结果 COPD急性恶化期患者的hs-CRP、PCT、BNP水平明显高于COPD稳定期患者(P<0.05),hs-CRP、PCT、BNP的ROC曲线下面积分别为0.66、0.79、0.82,敏感性和特异性分别为80.2%、88.5%、91.3%和58.8%、71%、73.2%。联合检测hs-CRP和BNP对COPD急性恶化期诊断的ROC曲线下面积为0.88,敏感性和特异性分别为92.8%和75.7%;联合检测PCT和BNP对COPD急性恶化期诊断的ROC曲线下面积为0.93,敏感性和特异性分别为96.3%和81.3%。结论在COPD急性恶化期,联合检测hs-CRP、PCT和BNP是较好的诊断指标,在呼吸系统细菌感染的判断上,PCT较hs-CRP更有诊断价值,BNP可提示病情的严重程度。

槐耳颗粒联合化疗对乳腺癌患者术后机体免疫功能的影响

目的:探讨槐耳颗粒联合化疗对乳腺癌患者术后外周血细胞免疫功能的影响。方法:将90例乳腺癌术后患者随机分为两组,分别采用FEC(CTX0.6/m^2,d1,EPI100 mg/m^2,d1,5-Fu0.5/m^2,d1)方案化疗和槐耳颗粒联合FEC方案治疗,化疗后对患者免疫功能进行评价。结果:观察组治疗后外周血NK细胞、CD_3^+、CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+比值较治疗前明显升高(P<0.05),而对照组NK细胞、CD_3^+、CD_4^+、CD_4^+/CD_8^+比值较治疗前降低(P>0.05)。观察组治疗后KPS评分提高率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:槐耳颗粒作为乳腺癌术后患者化疗的辅助性用药,能增强机体免疫功能,提高患者生活质量,值得临床进一步观察。

微RNA参与中药抗肿瘤作用的研究进展

微RNA（microRNA,miRNA）是一类长度约为22个核苷酸的非编码小分子RNA。已有研究认为,miRNA可作为癌基因或抑癌基因参与到肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭转移和血管生成等过程,并可能为癌症治疗提供理想而有效的靶点。中草药及其提取物因毒副作用小,药理作用独特,已成为重要的抗肿瘤药物,但其抗肿瘤机制仍不明确。近些年的研究报道提示,miRNA广泛参与到中药抗肿瘤的作用过程中。中药作用后,癌基因性miRNA表达降低,抑癌基因性miRNA表达增加,上调或下调的miRNA通过进一步促进其靶基因降解或抑制其靶基因的翻译来发挥中药抗肿瘤的实质性作用。

CD64对白血病合并细菌感染的早期诊断价值

目的探讨CD64对白血病合并细菌感染的早期诊断价值。方法选取白血病合并细菌感染患者50例、白血病非细菌感染患者48例和体检正常者38例,静脉抽取外周血,分别用流式细胞术检测CD64的表达及CD4/CD8比值,免疫比浊法检测降钙素原(PCT)和C-反应蛋白(CRP),以及电阻抗法检测中性粒细胞百分比(NEU%)。结果 1白血病合并细菌感染组CD64的表达显著高于白血病非细菌感染组和正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。2白血病合并细菌感染组的淋巴细胞CD4/CD8值要显著低于白血病非细菌感染组和正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),提示其细胞免疫功能受到抑制。3从ROC曲线可以得出,PCT作为诊断早期感染的指标准确性优于CRP和NEU%,而CD64诊断早期合并细菌感染时的特异度和敏感度略高于PCT,所以CD64在诊断早期合并细菌感染时显示了更大的优势。结论 CD64对于白血病合并细菌感染具有良好的特异度,其对白血病合并细菌感染的早期诊断具有重要价值。

淋巴瘤患者循环microRNA-21的检测及其临床意义

目的分析淋巴瘤患者外周血中循环microRNA-21(miR-21)的表达,探讨循环miR-21在淋巴瘤早期诊断中的意义。方法收集60例临床确诊的淋巴瘤患者外周血,50名健康体检人群外周血作为正常对照组,用FQ-PCR方法检测miR-21的表达;同时检测对应的临床确诊淋巴瘤患者肿瘤组织及外周血中miR-21的表达,判断二者的相关性。结果 FQ-PCR检测结果显示,淋巴瘤患者外周血中循环miR-21的表达显著高于正常对照组,差异有统计学意义(t=6.9,P<0.000 1);且淋巴瘤患者外周血中循环miR-21的表达与肿瘤组织中miR-21的表达密切相关(r2=0.931,P<0.000 1)。结论外周血循环miR-21检测有望成为淋巴瘤早期诊断的新的分子标志。

白花丹醌对人肝癌SK-hep-1细胞增殖及侵袭的影响

背景与目的:白花丹醌是中药白花丹的主要活性成分,对多种肿瘤细胞具有杀伤作用。本研究旨在观察白花丹醌对人肝癌SK-hep-1细胞增殖及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:在体外应用MTS法、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术及Transwell小室观察白花丹醌对细胞增殖及侵袭的影响;并通过RTPCR检测白花丹醌对p21、MMP-2及MMP-9的mRNA表达影响。结果:白花丹醌能够明显抑制肝癌SK-hep-1细胞的增殖和克隆形成,且具有剂量依赖性,其半数抑制率为22.04μmol/L。细胞周期分析显示,白花丹醌处理后S期细胞数减少,G0/G1期细胞增多;并且白花丹醌能够抑制SK-hep-1细胞的黏附和侵袭转移。RT-PCR结果显示白花丹醌能够促进p21表达,而抑制MMP-2及MMP-9的表达。结论:白花丹醌可能是通过上调p21及下调MMP-2/MMP-9的表达水平,抑制人肝癌SK-Hep-1细胞增殖和侵袭。

PCR技术对侵袭性真菌感染诊断的研究进展

侵袭性真菌病（invasivefungaldisease，IFD），又称侵袭性真菌感染，是真菌侵入人体组织和血液，并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理、生理过程。近年来，由于环境因素的危害和药物因素影响（如免疫移植、肿瘤放化疗、大剂量广谱抗生素的长期使用、糖皮质激素和免疫抑制剂的广泛应用等），造成了IFD的患病率和病壳率均呈显著上升趋势。

miR-218表达水平与宫颈癌侵袭转移及预后的关系

目的探讨miR-218与宫颈癌侵袭转移和不良预后因素之间的关系。方法用qRT-PCR的方法检测112例宫颈癌患者和21例正常对照的宫颈组织和外周血中miR-218的表达水平,所得数据结合临床资料进行相关分析。结果 miR-218在宫颈癌组织的表达水平明显低于宫颈正常上皮组织,差异有统计学意义(P<0.001)。miR-218的表达水平与宫颈癌FIGO分期、淋巴结转移、深间质浸润、阴道壁累及、脉管浸润有关。结论miR-218在宫颈癌组织中表达下调,且与宫颈癌侵袭转移和不良预后因素密切相关,提示miR-218在宫颈癌的侵袭转移机制中发挥了重要作用。

槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖抑制及诱导凋亡的影响。方法制备不同浓度的槐耳清膏(0、3、6、9 mg/ml)和羟基喜树碱100μg/ml作用于A549细胞,分别于24、36和48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果槐耳清膏与羟基喜树碱均可诱导A549细胞凋亡,槐耳清膏各浓度组与阴性对照组相比差异显著(P<0.05),且这种抑制存在浓度和时间依赖性,槐耳清膏浓度在3.0 mg/ml 36 h后抑制作用最强,羟基喜树碱组与之比较无显著差异(P>0.05),各浓度槐耳清膏组在与A549细胞作用36 h后达到抑制高峰。结论槐耳清膏在体外能抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,诱导细胞凋亡作用。

神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响

目的探讨不同的神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响。方法将原代培养的神经元进行缺氧处理,不同的时长(0.5、1、2、4h)后,复氧处理24h,收集神经元条件培养液(neuron-conditioned media,NCM),然后将NCM刺激原代培养的小胶质细胞24h(NCM∶小胶质细胞培养液=1∶1,V/V)。采用Western blot法检测小胶质细胞内的M2表型标记物精氨酸酶-1(arginase-1)和激活标记物离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)的表达变化规律,采用免疫荧光法检测arginase-1的表达变化规律。同时,采用ELISA法检测小胶质细胞培养液上清中的营养因子,如脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和炎性因子,如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的分泌变化规律。最后,将不同损伤度的NCM诱导小胶质细胞形成不同表型,将小胶质细胞和缺氧处理2h后的神经元共培养24h,MTT法检测神经元的活力。结果轻微损伤(缺氧0.5、1h)的NCM明显下调M2型标记物arginase-1的表达水平,中度(缺氧2h)和重度(缺氧4h)损伤的NCM能够上调arginase-1的表达,各种损伤度的NCM都能上调Iba-1的表达水平,提示其在一定程度上激活小胶质细胞。同时,轻微损伤的NCM明显上调小胶质细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌,而中度和重度损伤的NCM对这些促炎因子的释放没有影响,各种损伤度的NCM都能明显上调营养因子的分泌。MTT法检测表明,轻微和重度损伤处理的NCM刺激的小胶质细胞进一步加重缺氧处理的神经元损伤,而中度损伤的NCM对缺氧处理后的神经元具有保护作用。结论神经元损伤度是决定小胶质细胞表型的重要因素,进而使小胶质细胞进一步发挥神经毒性或保护作用。

槐耳清膏对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的影响及顺铂耐药逆转作用

目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制率,并运用流式细胞术检测顺铂联合槐耳清膏对A549/DDP细胞的变化,以及增敏作用效应。结果:槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖有明显抑制作用,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增加,具有明显的量-效关系(P<0.05)。顺铂40μmol/L作用于A549及A549/DDP细胞48 h后,其凋亡率分别为(27.61±3.45)%和(17.93±1.73)%,两组间有统计学差异(P<0.01)。槐耳清膏1 mg/m L作用于人肺腺癌A549和A549/DDP细胞40 h后,再以相同浓度顺铂诱导,A549细胞凋亡率为(32.35±2.68)%,A549/DDP细胞凋亡率为(30.01±3.65)%,两组间无统计学意义,但与单独DDP作用相比,差异具有显著意义(P<0.01)。结论:槐耳清膏能显著抑制人肺腺癌A549及A549/DDP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,还可以增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。

MKK4蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨MKK4蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法分别检测90例鼻咽癌组织和20例鼻咽慢性炎症组织中MKK4蛋白的表达情况,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果:MKK4蛋白在鼻咽癌组织中阳性表达率为75.6%(68/90),鼻咽慢性炎症组织中阳性表达率为95.5%(19/20),差异有统计学意义(P<0.05)。MKK4蛋白在有淋巴结转移、分化程度较差的组织中的高表达率明显低于无淋巴结转移、分化程度相对较好的组织(P<0.05),但不同年龄、性别、原发部位、T分期并不影响MKK4蛋白的阳性高表达率,无统计学差异(P>0.05)。结论:MKK4在鼻咽癌组织中的表达明显低于鼻咽慢性炎症组织中的表达,差异具有统计学意义;MKK4蛋白在有淋巴结转移、分化程度较差和临床分期较晚的组织中的表达明显低于无淋巴结转移、分化程度较好及临床分期较早的组织,差异具有显著性;但年龄、性别、原发部位、T分期在鼻咽癌组织中MKK4蛋白的表达均无显著性差异。

血培养常见病原菌菌群分布及耐药性分析

目的了解武汉市中心医院2007年7月至2009年9月血培养病原菌菌群分布及常见致病菌的耐药情况,为临床合理应用抗菌药物提供参考。方法采用美国BD公司BACTEC9050全自动血培养仪进行培养检测,分离出的致病菌用法国生物梅里埃公司API鉴定系统进行鉴定,药敏试验采用纸片扩散法,以2007版美国临床实验室标准化研究所标准对药敏试验结果进行判定,运用WHONET5.4软件进行分析。结果 2256例标本共分离出病原菌269株,血培养阳性率11.9%,检出革兰阳性菌129株(47.96%);革兰阴性菌116株(43.12%);真菌24株(8.92%)。主要致病革兰阳性菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺100%敏感,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南100%敏感,铜绿假单胞菌和不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦较敏感。结论武汉市中心医院败血症的病原菌以条件致病菌为主,革兰阳性病原菌的分离率略高于革兰阴性菌,以葡萄球菌居多。病原菌的耐药情况严重,应及时监测病原菌变化及耐药趋势,指导临床用药。

网织血小板比率在严重感染性疾病早期诊断中的价值

目的进一步提高严重感染性疾病的早期诊断率。方法选取228例体温>38℃、中性粒细胞数>8×109/L和血小板数>150×109/L疑似感染的重症患者,根据细菌学检测结果分为感染组(154例)和非感染组(74例),测定其外周血网织血小板比率(IPF),应用受试者工作特征曲线(ROC)进行诊断价值评估。结果感染组IPF显著高于非感染组(P<0.05),IPF在ROC曲线下面积为0.910,高于传统炎症指标C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)及分类(P均<0.05)。结论网织血小板比率可作为早期鉴别诊断严重感染性疾病的指标。