氨氯地平和缬沙坦对人冠状动脉内皮细胞NADPH氧化酶亚基gp91^(phox)和p22^(phox)表达的影响

目的研究不同浓度的氨氯地平和缬沙坦对人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91phox和p22phox的影响。方法对照组:体外贴壁培养HCAEC,不进行其他干预;实验组:相同培养条件下分别加入不同浓度氨氯地平(1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8、1×10-9mol/L)和不同浓度缬沙坦(1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8mol/L)体外培养24 h。提取各组细胞的膜蛋白,应用Western blot法测两组细胞中p22phox和gp91phox的表达水平,对结果进行统计分析并比较。结果不同浓度氨氯地平对HCAEC内NADPH氧化酶亚基p22phox表达均有促进作用(P<0.05),高浓度氨氯地平对gp91phox有抑制作用(P<0.05),低浓度则会促进gp91phox的表达(P<0.05)。不同浓度缬沙坦对p22phox与gp91phox的表达均有显著的抑制作用(P<0.05),且有随着药物浓度增高抑制作用增强的趋势(P<0.05)。结论缬沙坦有抑制氧化应激的效力,并随浓度增高而增强,呈现浓度依赖的趋势;氨氯地平仅在高浓度时抑制部分NADPH氧化酶亚基(gp91phox)的表达,低浓度时反而可能增加氧化应激水平。

p22-phox在P19细胞向心肌细胞分化前后的变化

目的探讨P19细胞向心肌细胞分化前后p22-phox水平的变化。方法贴壁培养P19细胞,取合适细胞株,应用0.9%二甲基亚砜(DMSO)诱导培养,收集诱导不同时间的细胞,通过Western blot检测其肌钙蛋白I(c Tn I)水平,以确定分化,并行Western blot检测P19细胞向心肌细胞分化前后细胞中p22-phox蛋白水平。结果1 P19细胞经0.9%DMSO诱导分化后,于第8天开始检测到c Tn I表达阳性,后c Tn I表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。2P19细胞向心肌细胞分化后细胞内p22-phox水平较分化前高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p22-phox在P19细胞向心肌细胞分化后表达增加,氧化应激水平增高。

P19细胞向心肌样细胞分化前后gp91-phox的变化

目的:探讨诱导P19细胞向心肌样细胞分化前后gp91-phox水平的变化。方法:P19细胞经0.9%二甲基亚砜(DMSO)于细菌培养皿中悬浮诱导培养4 d,待细胞聚集体形成,吸取聚集体接种于组织培养皿,贴壁培养至第13天。行Western blot检测肌钙蛋白I(cTnI),以鉴定心肌样细胞的分化,并检测P19细胞向心肌样细胞分化前后细胞中gp91-phox蛋白水平。结果:(1)经0.9%DMSO诱导分化,P19细胞于第7天开始表达cTnI,随后cTnI表达明显增高并趋于稳定;(2)P19细胞分化为心肌样细胞后细胞内gp91-phox蛋白水平较分化前高(P<0.05)。结论:P19细胞向心肌样细胞分化后gp91-phox表达上调,氧化应激水平增加。