目的探究miR-335-5p对人关节软骨细胞蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、Ⅹ型胶原蛋白(CollagenⅩ)、基质金属蛋白酶(MMP)13的调节作用。方法通过取人创伤后截肢的膝关节软骨,分离并提取软骨细胞。miR-335-5p模拟物(mimics)、...目的探究miR-335-5p对人关节软骨细胞蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、Ⅹ型胶原蛋白(CollagenⅩ)、基质金属蛋白酶(MMP)13的调节作用。方法通过取人创伤后截肢的膝关节软骨,分离并提取软骨细胞。miR-335-5p模拟物(mimics)、抑制剂(inhibitor)、mimicsNC、inhibitorNC分别转染至软骨细胞,利用qRT-PCR和Western印迹分别检测各组ACAN、CollagenⅡ、CollagenⅩ、MMP13的表达情况。结果与mimicsNC组相比,mimics组显著下调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著上调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);与inhibitorNC组比较,inhibitor组显著上调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著下调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论 miR-335-5p能够抑制ACAN、CollagenⅡ并促进MMP13、Collagen X mRNA转录及蛋白合成,对OA的发病起到潜在的推进作用。展开更多
文摘目的探究miR-335-5p对人关节软骨细胞蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、Ⅹ型胶原蛋白(CollagenⅩ)、基质金属蛋白酶(MMP)13的调节作用。方法通过取人创伤后截肢的膝关节软骨,分离并提取软骨细胞。miR-335-5p模拟物(mimics)、抑制剂(inhibitor)、mimicsNC、inhibitorNC分别转染至软骨细胞,利用qRT-PCR和Western印迹分别检测各组ACAN、CollagenⅡ、CollagenⅩ、MMP13的表达情况。结果与mimicsNC组相比,mimics组显著下调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著上调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);与inhibitorNC组比较,inhibitor组显著上调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著下调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论 miR-335-5p能够抑制ACAN、CollagenⅡ并促进MMP13、Collagen X mRNA转录及蛋白合成,对OA的发病起到潜在的推进作用。