广西贺州市喀斯特植烟区域土壤肥力评价

为揭示贺州市植烟区的土壤肥力状况,科学指导喀斯特地貌烟草施肥,对贺州市富川县、钟山县两个植烟县采集的428个土壤样品进行养分含量分析。结果表明,两县土壤pH及有机质含量整体较高;全氮含量相对适宜,均值为1.48 g/kg;有效磷含量偏高,均值为48.83 mg/kg;速效钾含量偏高,均值为352.17 mg/kg。针对贺州市植烟土壤肥力现状,宜在氮元素含量较低的位点补施氮肥以促进烟株生长;无须额外追施磷肥和钾肥,避免磷、钾元素含量过高导致烟株成熟过早及烟叶品质下降。

抗烟草靶斑病菌的生防细菌鉴定及其机理研究

【目的】筛选对烟草靶斑病菌具有生防潜力的拮抗细菌,为烟草靶斑病的生物防治提供菌种资源。【方法】以立枯丝核菌为目标病原菌,采用稀释涂布平板法从广西健康烤烟根际土壤中分离、纯化细菌;采用平板对峙法筛选拮抗效果较好的菌株,测定抑菌效果;扫描电镜和超景深三维显微镜观察拮抗菌株处理立枯丝核菌菌丝的形态变化及菌落形态,并测定生理生化特征;采用细菌通用引物16S rDNA序列及gyrA基因对拮抗菌株DNA进行PCR扩增,采用NCBI的BLAST对测序结果同源对比分析,并基于亲缘关系较近的序列及模式菌株构建系统发育进化树;采用双平板对扣法初步探索拮抗菌株挥发性物质抑菌作用;利用顶空固相微萃取和气相色谱—质谱对拮抗菌株挥发性物质进行鉴定;通过对K326烤烟品种盆栽试验鉴定拮抗菌株对烟草靶斑病的防治效果。【结果】筛选到1株具有生防作用的拮抗菌株GXLL3319,结合该菌株菌落形态和生理生化特征及系统发育进化分析结果将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株对立枯丝核菌、烟草炭疽菌和尖孢镰刀菌3种烟草病原真菌抑制率均在50%以上;该菌株及其挥发性物质对立枯丝核菌抑制率分别为69.70%和59.22%。扫描电镜结果显示,经GXLL3319处理后的立枯丝核菌菌丝生长受到明显抑制,菌丝出现断裂、膨大和消解等现象。挥发性物质鉴定出31种抑菌活性物质,包括酮类、醇类、醛类、杂环类、硫化物、有机酸类、酯类、烷烃类和酚类。盆栽试验结果表明,GXLL3319菌液能有效抑制烟草靶斑病的发生,相对防效达66.07%,与15%井冈霉素A可溶粉剂的相对防效差异不显著(P>0.05)。【结论】枯草芽孢杆菌GXLL3319能有效抑制立枯丝核菌菌丝生长,其产生的挥发性物质包含多种抑菌活性物质,GXLL3319对烟草靶斑病有较好的防治效果,具有开发成为烟草靶斑病生防菌的潜力。

西瓜枯萎病生防菌枯草芽孢杆菌B11菌株高产拮抗物质的诱变选育

从西瓜根围分离得到的一株有效抑制西瓜枯萎病菌的枯草芽孢杆菌B 11菌株(B acillus subtilisstra in B 11)。为获得高产拮抗物质的诱变菌株,采用紫外线诱变方法对B 11菌株进行诱变,结果获得抑菌活性比野生菌B 11菌株强的6株诱变菌株,其中G 17菌株的抑菌活性及粗拮抗物质含量均高于B 11菌株,且遗传性较稳定;再以G 17菌株为供试菌株,用亚硝基胍(NTG)对其进行化学诱变,结果获得抑菌活性较强的4株诱变菌株,其中BV 22菌株对西瓜枯萎病菌的抑菌活性最高,其抑菌活性比G 17和B 11菌株分别提高了36.88%和80.00%;其粗拮抗物质的含量分别提高了30.15%和62.53%。研究结果说明,用物理诱变B 11菌株后获得的诱变菌株再用化学方法进行诱变,可选育出高产拮抗物质的诱变菌株。

广西烟草立枯病菌和靶斑病菌菌丝融合群初步分析

为了明确广西烟草立枯病菌和靶斑病菌的菌丝融合群,从广西发病烟草植株上分离了2株烟草立枯病菌菌株和3株靶斑病菌菌株。经形态特征和细胞核染色观察发现,这5株菌株均属于多核立枯丝核菌。依据供试菌株与标准菌株的菌丝融合反应,发现广西烟草立枯病菌和靶斑病菌均包含AG-2和AG-4两个菌丝融合群。进一步分析5个菌株的r DNA-ITS序列,初步明确这2种病原菌包括AG-4 HG-I和AG-2-2 IIIB 两个菌丝融合群,与菌丝融合反应分析结果相吻合。首次在国内从烟草靶斑病组织上分离到AG-2 和AG-4 融合群。

快速笼式烟夹的设计与应用

为解决当前烟叶夹持设备存在的不足,进行了快速笼式烟夹的设计与应用研究。结果表明:密集烤房使用快速笼式烟夹,装烟量比传统人工编竿烘烤增加50%以上,烤房内同一装烟层面的风压、风速和温度更均衡,烘烤每公顷烟叶节省劳动用工41.78个,烤后烟叶外观质量明显改善。

自然醇化对烟叶化学组分及致香物质的影响

【目的】为了解自然醇化过程中烟叶化学组分的变化及其对复烤烟品质的影响,为初烤烟叶和复烤烟相结合的协同仓储醇化研究提供理论基础。【方法】凯氏定氮法、酸水解法、甲酯化-气相色谱、石油醚浸提法等。【内容】研究分析了自然醇化1-5个月后烟叶中的基本化学组分、有机酸、香味组分的含量及组成。【结果】自然醇化有利于初烤烟中淀粉、蛋白质、有机酸和香味物质等成分的转化,初烤烟中的淀粉、蛋白质、有机酸、香味物质均随醇化进行有先增加后减少的趋势自然醇化2、3个月后初烤烟的中性致香物质总量及其重要组分(β-大马酮、β-紫罗兰酮、二氢猕猴桃内酯、茄酮、苯甲醇)较高。自然醇化也有利于提高打叶复烤后烟叶的有机酸、总香味物质、中性香气组分的水平,且在醇化3-4个后复烤烟的中性致香物质及其重要组分水平较高:【结论】自然醇化有利于打叶复烤烟的吃味品质的形成。

快速笼式烟夹的研制与应用

为解决当前烟叶夹持设备存在的不足,减轻劳动强度,研制了快速笼式烟夹,并对其进行了应用效果试验。结果表明,与传统挂竿烘烤相比,使用快速笼式烟夹可增加密集烤房装烟容量51%,能耗节约0.09元/kg干烟,节约用工34.5个/hm2,烤后烟叶颜色橘黄,成熟度好,评吸得分85.6分,烟叶外观质量得到改善。

打顶期烟草组织基因表达分析及打顶对腋芽基因表达的影响

打顶是烟叶生产重要的技术环节之一。为了研究烟草(Nicotiana tabacum)打顶期基因表达模式,选取广西大宁地区晒黄烟现蕾期10个打顶或非打顶的组织样本,构建链特异总RNA测序文库,利用Illumina HiSeq 2000完成测序。通过质量控制,获得9千多万条测序数据,分析获得50 706个基因的表达信息。筛选组织特异和打顶差异表达基因,共富集687个组织特异表达基因和444个腋芽打顶差异表达基因,为烟草组织基因表达模式和打顶分子响应机制研究提供数据支撑,也为调控烟草营养和生殖生长提供分子靶标。

从烟草上分离的中国番茄曲叶病毒及其卫星DNA全基因组结构特征

本研究从具有典型曲叶病症状的广西靖西烟草病植株上分离到病毒分离物JX-2,全基因组序列测定结果表明,JX-2DNA-A全长2738个核苷酸,共编码6个开放阅读框架(open reading frames,ORFs),其中病毒链编码AV1(CP)和AV2两个ORFs,互补链编码AC1、AC2、AC3和AC4共4个ORFs。BLAST结果表明,JX-2DNA-A与中国番茄曲叶病毒(Tomato leaf curl China virus,ToLCCNV)各分离物的相似性在93.0%～99.7%之间,其中与ToLCCNV广西番茄分离物ToLCCNV-G32的相似性最高,达99.7%,而与其它双生病毒的同源性均在88.0%以下,表明JX-2是ToLCCNV的一个分离物。基于JX-2和已报道的双生病毒属代表种DNA-A全基因组核苷酸序列构建的系统进化树显示,JX-2与ToLCCNV-G32分离物的亲缘关系最近,并与ToLCCNV其它分离物形成一个分支,而与其它10种双生病毒的亲缘关系均相对较远。利用双生病毒卫星DNAβ的特异性引物β01/β02在JX-2样品中扩增到DNAβ分子(JX-2β),全长为1341个核苷酸,其互补链编码1个ORF(即βC1),并包含一个富含A序列和一个卫星病毒保守序列。序列分析表明,JX-2β与ToLCCNV伴随的DNAβ的相似性在91.0%～96.1%之间,其中与ToLCCNV-G61DNAβ和ToLCCNV-G18DNAβ的相似性最高(96.1%),与其它卫星DNAβ的相似性均低于61.8%。基于JX-2β全基因组核苷酸序列构建的系统进化关系树显示,JX-2β与ToLCCNV G61分离物伴随的DNAβ亲缘关系最近,并形成一个独立的分支,再与ToLCCNV其余两个分离物伴随的DNAβ形成一个较大的分支。这是首次报道从烟草中分离到的中国番茄曲叶病毒及其伴随卫星DNA分子的全基因组结构特征。

广西烟草棒孢霉叶斑病菌鉴定及毒素蛋白亚型检测

烟草棒孢霉叶斑病是影响烟草生产的主要叶部病害之一,为明确广西烟区该病害的病原菌及其毒素亚型,本研究对采自广西烟区的烟草叶斑病病原菌采用形态学、致病性、分子生物学进行鉴定。并利用毒素蛋白基因的特异性引物和对多种寄主植物的致病性进行毒素亚型测定。结果显示,广西烟草棒孢霉叶斑病菌为多主棒孢霉(Corynespora cassiicola),并首次鉴定、分析广西烟草棒孢霉病菌的毒素蛋白亚型,其中广西烟草棒孢霉病菌15个菌株中,14个菌株的毒素蛋白亚型为Cas0,1个菌株的毒素蛋白亚型为Cas7。结果表明,Cas0基因亚型较多,在靖西市同德乡首次发现烟草棒孢霉病菌中的Cas7毒素蛋白基因。本研究明确了广西烟草棒孢霉叶斑病病菌和病菌群体毒素亚型,可为防治烟草棒孢霉叶斑病提供基础依据。

广西烟草炭疽病病原鉴定及生物学特性研究

为明确广西壮族自治区贺州市钟山县发生的真菌性叶斑病害的病原菌种类和生物学特性,分别采用组织分离法和活体伤口接种法对病原菌进行分离和致病性测定,利用PCR扩增病原菌核糖体内转录间隔区(ITS)、肌动蛋白(ACT)和几丁质合成酶(CHS)进行分子鉴定,结合形态学特征对病原菌种类进行鉴定,采用菌丝生长速率法测定病原菌生物学特性。聚类分析结果表明,病原菌与平头炭疽(Collettrichum truncatum)聚为一支,且支持率为100%,结合形态学特征,将病原菌鉴定为平头炭疽(C.truncatum),这是平头炭疽寄生烟草引起烟草炭疽病的首次报道。病原菌生物学特性测定结果表明,病原菌对环境有较强的适应性,最适培养基为营养琼脂(NA),最适温度30℃,最适光照条件为全黑暗,最适碳源为淀粉,最适氮源为蛋白胨,pH为7时病原菌生长最快,病原菌致死温度为53℃、10 min。研究结果为病害的及时准确防治和深入研究提供了理论依据。

基于Stacking模型的土壤综合肥力评价——以富川瑶族自治县植烟区为例

【目的】实现耕地土壤综合肥力评价的标准化、快捷化和自动化,指导作物种植布局和土地资源利用。【方法】以富川瑶族自治县植烟区为研究对象,选定广西植烟区1038个样点作为训练数据。在考虑土壤条件、气候环境和地形地貌等因素的基础上,选取15种影响因子计算土壤综合肥力指数,采用Stacking算法构建回归预测模型,实现对研究区土壤综合肥力的评价。【结果】基于6种关键因子的Stacking02模型在测试集上性能优秀,平均绝对误差、均方误差和R2决定系数分别为0.0066、0.0084和0.9529。应用Stacking02模型评估研究区综合肥力,结果显示研究区北部综合肥力优于南部,其优质产区占比更高。低综合肥力指数地区土壤pH偏高而全氮速效钾含量偏低。【结论】相较初级学习器,Stacking模型性能提升。采用6种关键因子建立的Stacking02模型具有优异的泛化性能,简化了计算流程并节省算力,该方法可扩展至其它地区及作物的土壤综合肥力评价,从而制定针对性的作物利用方案。

广西烤烟棒孢霉叶斑病病原分子鉴定及其生物学特性补充

本文对广西烤烟棒孢霉叶斑病的病原进行鉴定,并对其生物学特性进行初步研究。根据该病原菌的形态特征、致病性及rDNA-ITS序列测定,将引起广西烤烟棒孢霉叶斑病的病原菌鉴定为山扁豆生棒孢(Corynespora cas-siicola)。生物学特性测定结果表明:27.5℃、培养初始pH为6、以麦芽糖作为C源、硝酸钾作为N源及完全光照等条件最适合其菌丝生长;30℃、以乳糖作为C源、硝酸钾作为N源及完全黑暗等条件最有利于该菌分生孢子形成;27.5℃、湿度为100%+水膜、12h光暗交替等条件最有利于分生孢子萌发;分生孢子的致死温度为52℃。这是该病在广西的首次报道。

烟草灰霉病病原鉴定及其生物学特性

对广西烟草灰霉病的病原、生物学特性进行了初步的研究。根据该病原菌的形态特征、致病性及rDNA-ITS序列测定,将该病原菌鉴定为灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers)。该病原菌菌丝在5℃-30℃的温度范围内均可生长,产生分生孢子的温度范围为10℃-25℃,菌核形成温度范围为15℃-22.5℃,最适温度均为20℃;分生孢子萌发的温度范围为7.5℃-30℃,最适温度为20℃-25℃。在pH 2-9的范围内该菌均能生长,最适pH为6。分生孢子需在高湿条件下才能萌发,相对湿度低于100%时不能萌发。完全光照对该菌菌丝生长有促进作用,而完全黑暗更利于产孢、孢子萌发及菌核的形成。单糖及双糖、有机氮及硝态氮是病原菌较好的C、N源。分生孢子和菌核的致死温度分别是42℃和46℃。

广西烟草内生细菌的动态分布及其对烟草疫霉的拮抗作用

从广西百色市的9个烟草品种中分离出470株内生细菌菌株,经常规细菌鉴定方法和16S rDNA序列分析,获得的菌株分别属于肠杆菌属(Enterobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、寡养单胞菌属(Stenotro-phomnas)和假单胞菌属(Pseudomonas),其中土壤杆菌属和肠杆菌属为烟草内生细菌中的优势种群。烟草内生细菌的类群和数量随烟草种植地点、品种、器官和生育期的不同而不同。烟草内生细菌在根部数量最多,其次是茎和叶。内生细菌的总量从缓苗期到旺长期增加,之后显著下降。从470株烟草内生细菌菌株中筛选出对烟草疫霉有拮抗作用的菌株56株,其中芽孢杆菌菌株Y10的抑制效果最好,抑制率达91.48%,室内盆栽防治效果为68.72%。

百色市靖西县烟田蟋蟀种类调查及分类鉴定

百色市是广西优质烟叶主要生产区之一,实验以靖西县烟田为对象,对靖西县的烟田昆虫群落进行系统的调查。采用棋盘式取样,在实验烟田埋设诱捕杯,对实验烟田的蟋蟀进行调查、采集和分类鉴定,最后统计数据。结果表明,百色市靖西县烟田的蟋蟀共有20种,分属于2个科,6个属,是该烟区的一类重要地下害虫之一;文章还编制了该烟区蟋蟀的分类检索表,为进一步研究烟田害虫的发生规律和综合防治提供参考依据。

烟草立枯病菌侵染特性研究

对烟草立枯病菌的侵染方式及部位、侵染时期、侵染条件和交互致病性等方面进行测定,结果表明,伤口有利于烟草立枯病菌的侵染;病菌可侵染烟株的叶肉、叶脉、茎部（上中下）及根部等多个部位导致发病;烟株易被侵染的生育期为苗期,随着烟株的生长发育,无伤接种的发病率明显降低;25~30℃为病原菌侵染的适宜温度,15℃时病原菌不能侵染烟株;当土壤含水量在47.83%~76.41%范围内时,随着土壤含水量的降低,病情指数随之增高;利用改良的选择性培养基测定显示,土壤含菌量越高病情越重;交互致病性测定结果表明,烟草立枯病菌可侵染水稻和玉米,同时玉米纹枯病菌和水稻纹枯病菌也可引起烟草发病。

不同施肥模式对异地种植大宁晒烟产量和品质的影响

【目的】调查分析不同施肥模式下异地栽培大宁晒烟的产量及品质的特点，为大宁晒烟异地规模化栽培和规范管理提供参考。【方法】采用田间试验的方法，设置7种不同施肥模式，研究异地种植大宁晒烟烟叶产量、产量构成因子、氮碱比、糖碱比及钾、烟碱、水溶性总糖、还原糖、蛋白质含量等的变化特征。【结果】按照原产地习惯施肥量异地低坡地种植大宁晒烟的产量和钾、烟碱、还原糖含量及氮碱比、糖碱比的品质成分与原产地种植相当；在原产地习惯施肥量的基础上，增加20％的肥料施用量，烟叶产量增加13．1％，差异达显著水平（P〈O．05，下同），而品质成分无明显变化；相反，减少20％qO％肥料用量，烟叶产量显著减少，烟叶烟碱、糖份、蛋白质含量均有所降低。增施30％钾肥虽然对烟叶产量的影响不显著（P〉0．05），但显著增加烟叶钾、还原糖含量和糖碱比；增施50％氮虽显著增加烟叶产量但同时显著增加烟叶的烟碱、蛋白含量，导致烟叶还原糖含量及氮碱比、糖碱比降低。【结论】异地种植大宁晒烟时，应在原产地习惯施肥量的基础上适度增施20％肥料用量或增施30％钾肥有利于提高异地种植大宁晒烟烟叶产量与品质。

增施氮钾对大宁烟生长、产量和品质的影响

为提高优质大宁烟单产以满足市场需求,采用田间试验方法,研究追施氮肥和钾肥(N 15 kg/hm2、K2O 90 kg/hm2;N 45 kg/hm2、K2O 270 kg/hm2)对大宁烟生长、产量及品质的影响。试验结果显示,在传统施肥的基础上,追施含N15 kg/hm2、K2O 90 kg/hm2无机肥后,烟株高度、烟叶钾含量和烟叶产量显著提高,烟叶评吸质量提升而烟叶糖碱比、糖氮比、施木克值等指标的变化不大。然而,增施N 45 kg/hm2、K2O 270 kg/hm2的处理,烟叶产量、钾含量、烟碱含量虽分别增加24.73%、17.91%-27.08%和19.57%-30.55%,但烟叶糖碱比、糖氮比、施木克值和评吸质量下降。结果表明,在传统有机肥施用的基础上追施适量氮钾肥不仅有利于大宁烟生长和烟叶产量的提高,而且可提高烟叶品质。

水分亏缺及钾肥对大宁烟生长、产量及品质形成的影响

通过框栽试验探讨水分亏缺及钾肥对大宁烟生长、产量及品质形成的影响,旨在为提高大宁烟产量和品质提供理论依据。结果表明,轻度缺水和低钾处理对大宁烟株高、叶片数、净光合速率、气孔导度、叶绿素a+b、丙二醛、百叶鲜重和总糖等无抑制作用,且烟碱含量为1.07%~1.32%,较符合优质烟叶烟碱的标准。中度缺水处理的株高、叶片数、叶绿素和下部叶鲜重和烟碱等显著降低。水分亏缺时,增施钾肥有利于株高、叶片数和产量的形成,但中、下部叶烟碱含量显著降低,中部叶总糖和还原糖含量显著增加。因此,轻度缺水和低钾处理的水分、钾用量较适宜大宁烟产量和品质的形成。