血清miR-29a在胆石症患者中的表达水平及意义

目的探讨血清miR-29a在胆石症患者中的表达水平及意义。方法前瞻性选取2016年8月至2019年8月在金华市中心医院消化内科接受治疗的143例胆石症患者作为研究对象,设为胆石症组,另选取同期140例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测受试者血清miR-29a的相对表达量,并分析其与疾病严重程度的关系。结果胆石症组血清miR-29a相对表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与复杂性胆石症组相比较,单纯性胆石症组患者中肝硬化、腹腔积液比例及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平较低,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平较高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。血清miR-29a预测复杂性胆石症的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、最佳截断点分别为0.842、71.79%、84.62%、1.15。多因素Logistic回归分析显示,肝硬化、腹腔积液、TC、miR-29a与复杂性胆石症的发生密切相关。结论胆石症患者血清miR-29a表达水平升高,并参与了胆石症的进展。检测miR-29a表达水平有助于评估胆石症的严重程度。

过表达miR-140-5p对高脂饲养诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠的作用及机制

目的探究过表达miR-140-5p对高脂饲养诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的作用及机制。方法40只大鼠随机分为对照组、模型组、空载体组和过表达组,每组各10只。对照组给予普通饲料饲养,模型组给予高脂饲料饲养构建NAFLD大鼠模型,空载体组在模型组基础上于饲养第13周、第18周尾静脉注射含空载质粒的慢病毒,过表达组在模型组基础上于饲养第13周、第18周尾静脉注射含过表达miR-140-5p质粒的慢病毒。采用酶联免疫吸附法检测各组血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。采用蛋白质免疫印迹法检测各组肝脏组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)的表达水平。采用实时荧光定量PCR法检测miR-140-5p的相对表达量。结果与对照组比较,模型组miR-140-5p的相对表达量降低,而AST、ALT、TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、TLR4和NF-κB水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与模型组和空载体组比较,过表达组miR-140-5p的相对表达量升高,AST、ALT、TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、TLR4和NF-κB水平降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论过表达miR-140-5p可改善NAFLD大鼠的肝功能,纠正脂代谢紊乱,其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路有关。

LTF基因在胃癌细胞株BGC823中的表达及其与启动子甲基化的相关性

目的:检测Lactotransferrin(LTF)基因在胃癌细胞株BGC823内的甲基化和表达情况,探讨LTF的DNA启动子区甲基化异常与其在胃癌内表达的相关性。方法:用亚硫酸氢盐测序PCR方法(BSP)检测BGC823启动子区甲基化状态,使用real-time PCR和Western blot法分别检测LTF基因在BGC823内的mRNA和蛋白表达水平。同时使用去甲基化剂5-aza-CdR处理胃癌细胞株,观察给药前后的DNA甲基化状态和mRNA表达情况。结果:BGC823启动子甲基化率达53.6%,使用5-aza-CdR后,药物处理的两组(药物浓度2μmol/L组和药物浓度10μmol/L组)和对照组甲基化率差异和LTF的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),并且随着BGC823启动子甲基化程度的下降,其mRNA和蛋白表达增加。而药物处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LTF基因在胃癌细胞株BGC823内表现为较高甲基化状态,而且LTF的表达和其启动子区甲基化情况相关,使用去甲基化剂能逆转DNA的甲基化情况从而使其mRNA重新表达。