胰岛素样生长因子-1对甲状旁腺激素介导成骨细胞增殖及成骨活性的影响

目的通过构建乳鼠颅盖骨成骨细胞分离培养与鉴定方法,研究胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)及IGF-1联合重组人甲状旁腺激素1-34(recombinant human parathyroid hormone 1-34,rhPTH1-34)对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法培养乳鼠成骨细胞,并观察其形态及功能,以原代培养乳鼠成骨细胞为实验模型,分空白组、PTH组、IGF-1组及不同浓度IGF-1作用的PTH介导的成骨细胞组(0、10、50、100 ng/L)。通过不同剂量的胰岛素样生长因子-1(0、10、50、100 ng/L)联合10-9mol/L重组人甲状旁腺素刺激体外培养的成骨细胞,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,RT-PCR法检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果 PTH和IGF-1均可促进成骨细胞增殖;IGF-1联合PTH可以促进成骨细胞增殖,且具有剂量依赖性。PTH联合IGF-1使成骨细胞增殖能力增强、I型胶原蛋白mRNA表达增强。IGF-1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。IGF-1可以促进成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达,且具有剂量依赖性。结论 PTH与IGF-1均可刺激成骨细胞增殖和分化,IGF-1可促进PTH对成骨细胞的分化、增殖。两者合用其作用增强,有协同促进作用。

甲状旁腺激素联合辛伐他汀对成骨细胞分化及OPG和RANKL mRNA表达的影响

目的联合甲状旁腺激素(rhPTH1-34)和辛伐他汀(SIM)在体外对乳鼠颅盖骨成骨细胞分化及骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达的影响。方法以乳鼠成骨细胞为体外试验模型,rhPTH1-34(10-9mol/L)联合不同浓度SIM(10-8、10-7、10-6mol/L)作用于体外培养的乳鼠成骨细胞,采用对硝基苯磷酸盐(PNPP)法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;RT-PCR法测定OPG和RANKL基因的表达。结果 rhPTH1-34和SIM单独给药均可促进成骨细胞ALP活性及OPG基因、降低RANKL基因表达(P<0.05);两者联合后与SIM单独作用组比较,ALP活性明显增加,并能协同促进OPG、降低RANKL基因表达(P<0.05)。结论 rhPTH1-34和SIM联合应用对成骨细胞分化和代谢有协同作用。