高效液相色谱法测定饮料中维生素B12的方法验证

目的对高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定饮料中维生素B_(12)含量方法的检测限、定量限、精密度和准确度进行验证。方法样品中的维生素B_(12)经维生素B_(12)免疫亲和柱吸附,再用甲醇洗脱,氮吹仪吹干溶剂后用0.05%磷酸溶液定容。以液相色谱法测定,外标法定量。选用色谱柱Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6mm×250mm,5μm),流动相以甲醇-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温30℃,进样体积100μL,于波长361nm处测定样品。结果维生素B_(12)在11.07ng/m~553.52ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r为0.999990,加标平均回收率为72.9%(n=6),检出限为0.06ng/g,定量限为0.20ng/g。结论该方法操作简单、检测时间短、结果稳定,是检测饮料中维生素B_(12)简单有效的方法,解决了传统微生物法的操作复杂、检测时间长和重复性差的缺点。经验证该方法的检测限、定量限、精密度和准确度满足质量控制要求,对检测饮料中维生素B_(12)具有较好的参考作用。

乳源锌螯合肽酶解制备及其螯合特性分析

为研究乳源锌螯合肽酶解制备最佳工艺条件及其螯合特性,从而为促锌吸收活性物质的研究提供基础,以牛乳酪蛋白为原料,以锌螯合率为指标,确定胰蛋白酶酶解制备锌螯合肽的最佳工艺条件,并对最优条件下酶解物的分子质量分布及氨基酸组成进行测定,同时通过傅里叶变换红外扫描和紫外扫描手段对酶解物和肽锌复合物进行结构表征对比分析。结果显示,最佳酶解条件为时间3 h,温度50 ℃,pH 8.5,底物质量浓度为70 g/L,加酶量0.6%(质量分数)。最佳条件下,酶解物的锌螯合率为87.78%,分子肽分子质量小,人体必需氨基酸含量丰富。螯合前后光谱存在明显差异,Zn^2+与羧基等进行了配位结合。乳源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,实验结果为补锌剂的生产应用奠定了基础。