对医学检验专业实习生的带教体会

医学检验学是属于实验室医学,是一门介于基础医学和临床医学之间的不完全独立的技术专业,具有实践性强、涉及面广的专业特点。近年来,随着检验科学技术的发展和患者法律意识的提高,对检验医学的要求越来越高,对学生的学习也提出越来越高的要求;而临床实习是引导学生理论联系临床实践的重要环节,其目的是使学生在实际工作中增强操作技能,培养合理运用理论知识分析问题,解决问题和独立工作的能力,提高其综合素质。

降钙素原在感染性发热诊断中的意义

目的分析感染性发热患者中细菌感染和病毒感染血清降钙素原(PCT)水平的差别,探讨血清PCT在感染性发热诊断中的意义。方法采用半定量固相免疫测定法测定48例细菌感染性发热患者、40例病毒感染性发热患者以及30例健康对照组血清中的PCT,将检测结果分成4个水平,PCT<0.5 ng/mL,0.5 ng/mL≤PCT<2.0 ng/mL,2.0 ng/mL≤PCT<10.0 ng/mL和PCT≥10.0 ng/mL,分析PCT水平与细菌病毒感染之间的关系。以PCT≥0.5 ng/mL为阳性诊断标准。结果细菌感染组患者血清PCT水平高于病毒感染组和对照组,差异有统计学意义(P≤0.05),病毒感染组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论检测PCT能有效地鉴别细菌性和非细菌性感染性发热,有利于早期正确治疗。

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因分析与同源性分析

目的:对本院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)耐药及介导耐药基因进行检测分析,对分离自呼吸重症监护病房(RICU)的菌株基因同源性进行流行病学分析。方法:收集2009年1月至2010年12月期间分离的85株多重耐药鲍曼不动杆菌,用K-B法进行药敏实验,用PCR方法检测OXA-23、OXA-58,qacE△1、IMP,VIM基因,并利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离自呼吸监护病区的14株菌株进行基因同源性分析。结果:85株耐药菌中OXA-23、qacE△1基因的阳性率依次为55.3%、81.2%,未检测到OXA-58,VIM和IMP基因。用PFGE技术将分离自呼吸监护病区的14株MDRAB分为5型,以A和B型为主。结论:本院分离的MDRAB对临床常用的抗生素耐药性比较严重,其中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)情况更甚;14株RICU菌株中有A型6株(均为CRAB),分离于2010年7-9月,提示CRAB在2010年第三季度于RICU有小范围的暴发流行。

宣肺平喘、化痰祛瘀法治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病随机对照临床研究

目的观察宣肺平喘、化痰祛瘀法对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者临床症状及生活质量的影响。方法将60例COPD稳定期患者随机分为治疗组和对照组,各30例,两组均给予舒弗美缓释片和沐舒坦片,治疗组加服宣肺平喘、化痰祛瘀中药。两组疗程均为30天。在治疗前及治疗后14天和1个月采用临床症状评分表及生活质量量表对患者临床症状及生活质量进行评估。结果治疗组总有效率为93.33%,对照组为83.33%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后14天与治疗前比较,生活质量量表中焦虑心理症状评分差异统计学有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后30天与治疗前比较,日常生活能力、抑郁心理状态及焦虑心理症状评分差异有统计学意义(P<0.01)。治疗30天后,治疗组日常生活能力、社会活动能力、焦虑心理状态与对照组同期差异有统计学意义(P<0.01)。结论以宣肺平喘、化痰祛瘀立法的中药复方可以改善COPD稳定期患者的临床症状,提高患者生活质量。

多重耐药鲍曼不动杆菌OXA-23基因与qacE△1基因检测的研究

目的对本院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MRAB)OXA-23和qacE△1耐药基因进行检测分析。方法收集2009年1月至2010年12月分离的85株多重耐药鲍曼不动杆菌,用聚合酶链反应(PCR)方法检测OXA-23和qacE△1耐药基因并测序,序列与基因库比对。结果 85株耐药菌中OXA-23、qacE△1基因的阳性率依次为55.3%、81.2%。其中58株耐亚胺培南MRAB OXA-23、qacE△1基因的阳性率为75.86%、84.48%;而其余27株亚胺培南敏感MRAB两个基因的阳性率分别为11.11%、74.07%。结论 OXA-23基因存在与鲍曼不动杆菌耐亚胺培南密切相关,qacE△1基因检测结果提示这些菌株81.2%携带Ⅰ类整合子,是本组细菌多重耐药表型的主要原因之一。

支气管哮喘缓解期中医证型与Th_1/Th_2失衡的相关性研究

目的观察支气管哮喘缓解期中医证型与Th1/Th2失衡的相关性。方法依据中医证型选取支气管哮喘缓解期患者60例,其中肺脾气虚证20例,肺肾气虚证20例,痰浊内蕴证20例,并选择健康体检者20例作为对照组。各组患者晨起抽取空腹静脉血检测γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)。结果肺肾气虚组IFN-γ值最低,肺脾气虚组IFN-γ值最高,组间差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。肺肾气虚组IL-4值最低,痰浊内蕴组IFN-γ值最高,组间差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。痰浊内蕴组IFN-γ/IL-4值最低,肺脾气虚组IFN-γ/IL-4值最高,组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论支气管哮喘缓解期患者存在Th1/Th2失衡,其血清IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值可作为中医证型诊断的客观指标。

中长期使用特异性COX-2抑制剂对大鼠左心室重塑的影响

目的通过观察大鼠慢性压力负荷性心肌肥厚过程中左心室重塑2个时间点使用特异性COX-2抑制剂Celecoxib前后左心室质量指数(LVMI)、心脏重/体重比值和炎症标记物的变化,以了解中长期使用特异性COX-2抑制剂对左心室重塑的作用。方法将40只雄性SD大鼠随机分成5组:假手术组、手术20周组、Cele-coxib20周组、手术24周组、Celecoxib24周组。手术组及Celecoxib组均按照腹主动脉缩窄法制作压力负荷性心肌肥厚大鼠模型,在造模16周后,用Celecoxib10mg/kg,均匀混入饲料中喂服Celecoxib组大鼠,分别连续喂养4周和8周。在造模20周及24周时,观察大鼠左心室质量指数和炎症标记物TNF-α、TGF-β、PGE2、CRP、UA变化。结果手术组20和24周LVMI、TNF-α、PGE2、CRP、UA较假手术组均有升高(P<0.01,P<0.05);Celecoxib24周组LVMI及心脏重/体重比值、TNF-α、TGF-β、PGE2、CRP、UA均较手术组有下降(P<0.01,P<0.05)。结论炎症参与了心肌重塑的过程,特异性COX-2抑制剂Celecoxib可能通过抗细胞因子起到延缓左心室重塑发展。

TBL联合PBL教学法在医学检验技术论文带教过程中的应用价值

目的探讨以团队为基础的学习(team-basedlearning,TBL)联合以问题为基础的学习(problem-basedlearning,PBL)教学法在医学检验论文带教过程中的应用价值。方法收集2018年6月1日至2019年5月30日在广州医科大学附属第一医院和广州中医药大学第二附属医院检验科实习的广州医科大学、广州中医药大学和广东医科大学医学检验技术专业本科实习生31人,其中男12人,女19人,年龄(24.1±0.6)岁。随机数字表法分为两组,试验组16人,采用TBL联合PBL带教方式;对照组15人,采用传统带教方式。学生毕业论文答辩邀请检验医学专家作为学生答辩评委,以专家评议结果作为试验组和对照组的效果评价。结果试验组论文优秀率达81.3%(13/16),对照组论文优秀率53.3%(8/15),试验组高于对照组。结论TBL联合PBL毕业论文的带教方式,既能提高学生学习积极性,培养临床分析思维能力及团队协作能力,同时也促进教师提高自身素质和教学水平,此种带教方式值得推广。

“康宁”胶囊对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:观察"康宁"胶囊(现已改名为丹芪活肝胶囊)对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的的保护作用。方法:取KM小鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、联苯双酯组、丹芪活肝胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组6组,每组12只。小鼠分别灌胃给药,1次/d,连续5 d,末次给药24 h后,除正常对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射0.05 g/kg的CCl4花生油溶液,24 h后采血,检测血清ALT、AST活性及观察肝组织病理学变化。结果:丹芪活肝胶囊能降低CCl4所致小鼠肝损伤中血清ALT或AST活性(P<0.01～0.05)。丹芪活肝胶囊高、中、低剂量组均能明显改善小鼠肝组织损伤的程度。结论:丹芪活肝胶囊对CCl4诱导的小鼠肝损伤有保护作用,其作用机制可能与保护肝细胞膜、减轻炎性反应有关,具体机制还需进一步实验研究。

疫情背景下分子诊断专业实习教学模式的探索和实践

临床分子诊断技术在新冠肺炎疫情中发挥了重要的作用,疫情防控对医学检验技术专业学生的分子诊断知识和技能提出了新的要求。临床实习是理论知识与实践相结合的核心环节和关键时期,传统的分子诊断专业实习教学模式涌现出很多困难,探索新的教学模式是分子诊断实践中亟待解决的问题。笔者结合分子诊断实习带教经验,总结了分子诊断实习教学模式中的改革和优化措施,旨在把学生培养成为兼具临床思维、实践技能和科研能力的新时期应用型人才。

碳青霉烯类敏感性下降革兰阴性杆菌NDM-1基因筛查

目的检测碳青霉烯类敏感性下降革兰阴性杆菌的新德里金属β-内酰胺酶-1（NDM-1）基因,了解广州地区NDM-1超级细菌的流行情况。方法收集2011~2014年分离的碳青霉烯类敏感性下降革兰阴性杆菌105株,采用聚合酶链反应（PCR）扩增NDM-1基因保守序列初步筛查NDM-1基因,阳性菌株扩增NDM-1基因全序列,然后克隆至pUCm-T质粒后进行测序。结果肠杆菌科细菌对美罗培南、厄他培南、亚胺培南的耐药率分别为29.09%、50.91%、29.09%;鲍曼不动杆菌对美洛培南、亚胺培南全耐药;铜绿假单胞菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率均为88.46%。有4株菌含NDM-1基因,包括肺炎克雷伯菌1株,大肠埃希菌2株,阴沟肠杆菌1株;克隆质粒pUCm-T-NDM-1经双酶切和测序证实构建成功。测序结果经BLAST比对后,发现4个克隆质粒的序列100%相同,与国内外发现的NDM-1序列也是100%一致。结论该地区革兰阴性杆菌存在产NDM-1酶株,其所携带的NDM-1基因全序列与国际上发现的完全一致。

Super-ARMS法在检测非小细胞肺癌EGFR基因突变中的应用分析

目的本研究通过对超级突变扩增阻滞系统(Super-ARMS)法与突变扩增阻滞系统法(ARMS)检测晚期非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的比较分析,探索Super-ARMS法的临床应用价值。方法收集111例晚期非小细胞肺癌患者外周血标本,提取血浆游离DNA后,分别采用Super-ARMS法及ARMS法进行EGFR基因突变检测,同时对53例配对的石蜡组织切片采用ARMS法进行EGFR基因突变检测。结果 111例标本中,Super-ARMS法检测EGFR基因突变率为50.5%(56/111),ARMS法检测EGFR基因突变率为46.9%(52/111);Super-ARMS法检测出T790M单突变3例,双突变5例,ARMS法则未检测出相关突变,两者比较差异有统计学意义(χ~2=8.023,P<0.01);两种方法检测EGFR基因突变一致率达87.4%(97/111),一致性检验显示Kappa系数为0.748(95%CI:0.624～0.871,P<0.001);通过检测53例配对组织样本的EGFR基因突变情况显示,与组织ARMS法比较,Super-ARMS法检测的敏感性、特异性和准确性分别为70.8%(17/24)、89.7%(26/29)和81.1%(43/53)。结论 Super-ARMS法与ARMS法检测EGFR基因突变结果一致性较高,Super-ARMS法检测T790M突变的敏感性明显优于ARMS法。

广州地区大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶基因分型的研究

目的对肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌(ECO)CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行耐药基因分型,从而调查广州地区目前临床分离菌对抗菌药物的耐药性。方法收集广州地区9所医院临床分离所获产ESBLs肺炎克雷伯菌(KPN)和ECO CTX-M型菌株,应用纸片扩散筛选法和纸片扩散确证法对菌株进行确认,然后用PCR方法对ESBLs进行基因分型。结果92株产ESBLs ECO,对氨苄西林、哌拉西林和头孢呋辛均高度耐药,耐药率分别为97.5%、89.5%和89.5%;42株产ESBLs KPN对氨苄西林(100.0%)和哌拉西林(100.0%)也呈高度耐药;PCR及测序结果显示,CTX-M-1群阳性株包括ECO 7株、KPN 9株,阳性率分别为7.6%和21.4%,基因型分布在ECO为CTX-M-3、CTX-M-15和CTX-M-55型,而在KPN为CTX-M-3和CTX-M-15型。结论广州地区9所医院临床分离的134株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,对青霉素类和头孢菌素类抗菌药物的耐药率均达到很高水平,并且在广州地区首次分离获得CTX-M-55型耐药菌株。

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药分子机制及质粒谱分析

目的了解我院临床分离的66株多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的耐药性和整合子(qacE△1-sull)、转座子(tnpU)存在状况,并对菌株质粒谱进行分析。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测鲍曼不动杆菌对18种抗生素的药敏结果,并对该细菌进行总DNA的提取。用聚合酶链反应(PCR)检测qacE△1-sull及tnpU,提取质粒进行同源性分析。结果 66株鲍曼不动杆菌中整合子qacE△1-sull基因阳性率为31.8%,转座子tnpU基因阳性率为30.3%。携带遗传标记的菌株耐药率高,特别是对头孢曲松、氨苄西林、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因的耐药率已接近或达到100%,而对丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,分别为5%和20%;有19株对亚胺培南耐药,其中整合子阳性率63.2%,转座子阳性率36.8%。检出质粒的46株(70%)临床分离菌出现1～3条大质粒带,大小在1～20kb间,其中出现1条带的有33株、2条带8株、3条带5株,有12株菌提取到大小相同的质粒。结论多重耐药鲍曼不动杆菌耐亚胺培南的耐药现象严重;整合子、转座子遗传标记的携带率高,可能是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。

铜绿假单胞菌外膜蛋白缺失合并qacE△12sul1与耐药性的研究

目的对临床分离的54株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAE)进行耐药基因检测,分析的PAE耐药性,为临床合理用药提供依据。方法应用MIC法和K-B法检测PAE对22种药物的耐药性,采用PCR法检测PAE的消毒剂磺胺类qacE△12sul1基因和外膜蛋白oprD2基因,并对阳性菌株进行序列分析。结果 54株PAE中oprD2膜缺失、qacE△12sul1、多重耐药铜绿假单胞菌(Multi-drug Resistant of Pseudomonas aeruginosa,MRPA)菌株的检出率分别为77.8%、14.8%、37.0%;20株MRPA菌株中,qacE△12sul1、oprD2膜缺失阳性率分别为40.0%、50.0%;54株PAE对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药,对头孢呋辛钠、头孢呋辛酯、复方新诺明的耐药率均为98.1%、对多粘菌素B敏感率为100%;MRPA与非MRPA对qacE△12sul1基因阳性菌株的检出率差异有统计学意义;oprD2阴性和阳性菌株对亚胺培南和美洛培南的耐药率差异有统计学意义。结论临床分离的铜绿假单胞菌耐药严重,oprD2基因的缺失可能是亚胺培南和美洛培南耐药的主要原因。