目的探讨分离、培养的ICR(Institute of Cancer Research,ICR)小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBM—MSCs)的细胞生物学特性。方法取6~8周龄ICR小鼠,利用全骨髓反复贴壁和有限稀释培养法分离纯...目的探讨分离、培养的ICR(Institute of Cancer Research,ICR)小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBM—MSCs)的细胞生物学特性。方法取6~8周龄ICR小鼠,利用全骨髓反复贴壁和有限稀释培养法分离纯化mBM—MSCs,观察形态特点,测定生长曲线和活力,利用流式细胞仪分析细胞的周期和鉴定表面抗原,诱导其向成骨、软骨及脂肪细胞分化,采用染色法鉴定。结果新分离的mBM—MSCs多呈小圆形,形态规整。培养传代后,细胞多变为梭形,大小较均匀,形态较一致。随着传代的次数增加,细胞的生长曲线、活力及周期呈现快速发育期、平台期和缓慢期;流式结果细胞CD44、CD73、SCA-1呈阳性反应,部分细胞CD90、CD105、STRO-1呈阳性反应,CD11b和CD45呈阴性反应;诱导分化为成骨细胞后其碱性磷酸酶、茜素红和YonKossa银染色均呈阳性反应,分化成脂肪细胞后油红O染色呈阳性反应,分化成软骨细胞后阿尔新蓝染色呈阳性反应。结论ICR小鼠骨髓中分离培养出的MSCs,生物学特点鲜明,适于做进一步研究。展开更多
文摘目的探讨分离、培养的ICR(Institute of Cancer Research,ICR)小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBM—MSCs)的细胞生物学特性。方法取6~8周龄ICR小鼠,利用全骨髓反复贴壁和有限稀释培养法分离纯化mBM—MSCs,观察形态特点,测定生长曲线和活力,利用流式细胞仪分析细胞的周期和鉴定表面抗原,诱导其向成骨、软骨及脂肪细胞分化,采用染色法鉴定。结果新分离的mBM—MSCs多呈小圆形,形态规整。培养传代后,细胞多变为梭形,大小较均匀,形态较一致。随着传代的次数增加,细胞的生长曲线、活力及周期呈现快速发育期、平台期和缓慢期;流式结果细胞CD44、CD73、SCA-1呈阳性反应,部分细胞CD90、CD105、STRO-1呈阳性反应,CD11b和CD45呈阴性反应;诱导分化为成骨细胞后其碱性磷酸酶、茜素红和YonKossa银染色均呈阳性反应,分化成脂肪细胞后油红O染色呈阳性反应,分化成软骨细胞后阿尔新蓝染色呈阳性反应。结论ICR小鼠骨髓中分离培养出的MSCs,生物学特点鲜明,适于做进一步研究。