TIGIT及其配体CD155在“怒”应激大鼠胸腺细胞中的表达及其意义

目的探讨"怒"模型大鼠胸腺细胞中T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)及其配体CD155和血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)表达情况,以及这些指标与胸腺细胞凋亡的相关性。方法将48只Wistar雄性大鼠随机分成对照组、模型7 d组、模型14 d组、模型21 d组,每组12只。除对照组外,其余各组以“社会隔离法”结合足底电击法复制精神应激“怒”模型大鼠。实验后测定大鼠体质量和胸腺指数,以苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠胸腺组织的形态学改变,采用免疫印迹法检测各组大鼠胸腺细胞中TIGIT、CD155蛋白的表达水平,采用Tunel法检测胸腺细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附试验测定血清CRH、ACTH、IL-2、IL-10水平。结果实验后,4组大鼠体质量较试验前1 d升高(P<0.05),且“怒”模型各组大鼠体质量均低于对照组(P<0.05);实验后“怒”模型各组大鼠胸腺指数均低于对照组(P<0.05)。HE染色光学显微镜下(×400)可见“怒”模型各组大鼠大鼠胸腺皮质组织结构出现不同程度的损坏,幼稚T细胞布排紊乱无序或呈“条索状”堆积,细胞间隙缩小,细胞数量较对照组降低,细胞核染色变浅,呈淡紫色,并出现不同程度核固缩、核分裂、细胞溶解等凋亡细胞增多现象。4组大鼠胸腺细胞TIGIT蛋白表达水平比较,对照组<模型21 d组<模型14 d组<模型7 d组,其中模型7 d组、14 d组与其他各组胸腺细胞TIGIT蛋白表达水平差异均有统计学意义(P<0.05);“怒”模型各组大鼠胸腺细胞CD155蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。“怒”模型各组胸腺组织凋亡细胞吸光度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型7 d组、模型14 d组血清CRH、ACTH水平高于对照组及模型21 d组(P<0.05);“怒”模型各组IL-2水平低于对照组(P<0.05),且模型7 d组、模型14 d组低于模型21 d组(P<0.05);“怒”模型各组IL-10水平高于对照组(P<0.05),且模型14 d组高于模型7 d组及模型21 d组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,TIGIT表达水平与CD155、ACTH、CRH及胸腺细胞凋亡程度呈正相关(P<0.05),与IL-2呈负相关(P<0.05),与IL-10及胸腺指数无相关性(P>0.05);CD155表达水平与TIGIT及胸腺细胞凋亡程度呈正相关(P<0.05),与IL-2呈负相关(P<0.05),与ACTH、CRH、IL-10及胸腺指数无相关性(P>0.05)。结论“怒”应激状态下,胸腺出现萎缩及凋亡细胞增多现象,可能是TIGIT-CD155与下丘脑-垂体-肾上腺轴、IL-10、IL-2共同作用所致,该研究为“怒”应激致使免疫损伤及疾病发生发展提供理论依据。

环状RNA在类风湿性关节炎中医证候中的研究进展

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类新型内源性非编码RNA,因其具有的稳定性、保守性、丰富性等特点,有望成为人类疾病的生物标志物和靶向治疗靶点。研究表明,circRNA广泛参与类风湿性关节炎的发生发展。同时,circRNA表达的时空特异性与证候的动态时空特性相似,可为寻找特异性证候生物学标志谱提供新角度。本文就circRNA在类风湿性关节炎、circRNA与中医证候相关性等多方面对近期国内外的研究进行综述。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中环状RNA差异表达分析

目的探讨环状RNA(circRNA)在RA PBMCs表达谱的差异及临床意义。方法收集4例RA患者(T组)及4名健康体检者(C组)静脉血,运用Arraystar circRNA微阵列芯片检测2组PBMCs中circRNA表达谱,应用相关数据库进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证表达失调circRNA的表达情况,并对目标circRNA构建circRNA-微小RNA(miRNA)-信使RNA(mRNA)调控网络(即ceRNA网络)。建立受试者工作特征曲线(ROC曲线),对潜在诊断价值进行分析。采用SPSS Statistics 23.0和Graphpad Prism 8.0分析数据,采用两独立样本t检验分析2组间差异。结果①微阵列芯片结果显示,与C组比较,T组PBMCs中异常表达的circRNA共有399个,其中149个上调,250个下调。②生物信息学分析:circRNA与miRNA结合位点预测提示RA中差异表达的circRNA可能通过靶向结合miR-140-5p、miR-338-5p和miR-9-5p等分子影响炎症反应;基因本体论分析发现差异表达的circRNA主要在细胞质、蛋白质结合等方面;京都基因与基因组百科全书通路分析发现涉及的通路多与人体免疫调节相关。③多样本RT-qPCR验证结果显示T组中hsa_circRNA_009012的相对表达量显著高于C组(t=-4.417,P<0.01),hsa_circRNA_101328的表达水平显著低于C组(t=-1.042,P<0.01),hsa_cir-cRNA_058230的表达无明显改变(t=4.691,P>0.05)。④ROC曲线分析提示hsa_circRNA_009012具有诊断RA的潜在价值(ROC曲线下面积=0.96)。结论circRNA在RA患者PBMCs中表达失调,可能参与RA发生发展的调控,其中hsa_circRNA_009012有望成为RA诊疗的新型生物学标志物。