烤烟多糖的硫酸化修饰及抗氧化活性

为了优选烤烟多糖硫酸化修饰的最佳条件,提高烤烟多糖抗氧化活性,采用超声辅助法提取烟叶多糖,并通过氯磺酸-吡啶法对其进行了硫酸化修饰;通过单因素实验和正交实验,确定了硫酸化反应的最佳工艺条件。采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法和邻二氮菲法进行了抗氧化活性研究。结果表明:1硫酸化反应的最佳工艺条件为氯磺酸与吡啶的体积比l∶6,反应时间3 h,反应温度80℃。在此条件下多糖硫酸酯的硫酸基质量分数为20.03%,取代度为2.587。2烤烟多糖经硫酸化修饰后,其抗氧化活性显著提高。

整合素αvβ8、p38及ERK1/2在胆道闭锁患儿肝脏中的表达及意义

目的研究转化生长因子(TGF)-β1通路相关调节蛋白整合素αvβ8、p38及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)蛋白在胆道闭锁(BA)患儿肝脏中的表达情况及在肝纤维化进程中的作用。方法选取天津市儿童医院普外科收治的BA患儿15例为Kasai组,胆管扩张症患儿10例为胆扩组;天津市第一中心医院小儿器官移植科行Kasai手术后因肝功能衰竭行肝移植的BA患儿10例为肝移植组。取患儿肝右叶前缘标本,行HE染色观察肝纤维化程度,行免疫组化染色检测αvβ8、p38及ERK1/2在肝组织中的表达情况。结果 HE染色示,胆扩组偶见纤维细胞增生;Kasai组汇管区增宽,纤维组织增生、桥接纤维化现象普遍,可见假小叶形成;移植组汇管区明显增宽,纤维组织增生较重,广泛桥接纤维组织形成,假小叶明显。免疫组化染色示,胆扩组αvβ8和ERK1/2表达为弱阳性,p38为阴性表达;Kasai组αvβ8、p38及ERK1/2蛋白均在肝细胞胞质、汇管区胆管上皮细胞胞质及血管内皮细胞胞质中强阳性表达;肝移植组αvβ8、p38及ERK1/2蛋白皆为强阳性表达。Kasai组和肝移植组αvβ8、p38及ERK1/2表达水平明显高于胆扩组(均P<0.05),Kasai组与肝移植组比较差异无统计学意义。结论αvβ8、p38及ERK1/2表达在BA肝纤维化过程中明显增高,αvβ8、p38及ERK1/2可能参与并促进BA肝纤维进程。

财政分权如何影响绿色创新?

绿色创新是实现可持续发展的关键,但绿色创新具有双重外部性,需要政府运用“有形之手”矫正市场失灵。在中国式财政分权背景下,讨论地方政府对绿色创新的影响与机制具有较强的理论和现实意义。通过对地级市及以上城市面板数据进行实证研究,文章发现:(1)财政分权显著抑制了绿色创新,在借助系统GMM、工具变量法克服内生性并进行相关稳健性检验后,结论依然成立。地方政府投资偏好效应、重污染产业与外资技术选择的路径依赖效应是财政分权抑制绿色创新的重要渠道。这种抑制作用在东部沿海地区、老工业基地以及中心城市表现更为明显。(2)在中央政府日益重视绿色发展的背景下,环境规制显著缓解了财政分权对绿色创新的抑制作用。相比于市场型环境规制,命令型环境规制的调节效应更为明显,该结论进一步丰富了“弱波特假说”理论。(3)从地方政府互动的角度发现:一方面,地方政府的经济赶超压力强化了财政分权对绿色创新的抑制作用,党的十八大以后,经济效率赶超与绿色效率赶超有效缓解了这种抑制作用。另一方面,空间杜宾模型估计结果表明,财政分权对绿色创新存在显著且稳健的空间负溢出效应,即财政分权不利于周边地区的绿色创新。基于上述实证研究,文章提出未来应当更好地发挥中央政府的统筹作用,注重克服扶持绿色创新的地方政府失灵;优化地方政府行为,打破抑制绿色创新的路径依赖;形成地方官员科学的政绩考核机制,汇聚推动绿色创新的央地合力。

P-Smad 3在胆道闭锁肝纤维化中的作用机制研究

目的研究转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、促纤维化通路中TGF-β1、P-Smad3等通路蛋白在胆道闭锁(Biliary atresia,BA)肝纤维化进程中的作用机制。方法选取2010年1月到2015年7月我们收治的胆管扩张症肝活检病例10例,为胆扩组;BA肝活检病例19例,为Kasai组;BA晚期肝移植患者自体肝活检病例11例,为移植组11例。进行苏木素/伊红(HE)、马松(Masson)染色观察肝标本纤维化评价其纤维化程度,免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)染色检测TGF-β1、Smad2-4、P-Smad2-3及人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)在肝组织中的表达,结合BA肝纤维化病理分级标准探讨TGF-β1等通路蛋白在肝纤维化进程中的作用。结果 HE及Masson:胆扩组偶见纤维细胞增生,Kasai组胶原纤维增生、桥接纤维化现象显著,移植组假小叶显著。免疫组化:①定性分析:胆扩组肝内Smad 2、Smad 4、PAI-1为阳性表达,其余为弱阳性;Kasai组TGF-β1等蛋白均在肝细胞胞质阳性表达,P-Smad 2、P-Smad 3、Smad4在胞核亦呈阳性表达;移植组患儿肝内TGF-β1等蛋白皆为弱阳性表达。②半定量分析:三组中Kasai组TGF-β1、Smad 3、P-Smad 3及PAI-1含量表达明显高于其他两组(P<0.05),随着TGF-β1、Smad3、P-Smad3及PAI-1逐渐升高肝纤维化逐渐加重;PSmad3与PAI-1含量大小及变化幅度密切相关,促肝纤维化作用显著;Smad2、P-Smad2、Smad4组间无差异,在通路中连接相关蛋白。移植组TGF-β1等通路蛋白含量均少于Kasai组,随着肝硬化加重而逐渐减少。结论 BA肝内TGF-β1促纤维化通路中TGF-β1、Smad3显著促进肝纤维化,P-Smad3与肝纤维化进程密切相关。

神经酰胺对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖的影响

取1只妊娠17.5 d的ICR小鼠,将其体内的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)经分离、纯化、培养、鉴定后,分别加入不同浓度的神经酰胺,培养12、24和48 h后进行MTT试验。在Transwell上构建AECⅡ单层,以10μmol/L的神经酰胺与AECⅡ培养12和24 h,并设置相应对照组,应用伏欧计测定跨上皮电阻值。结果显示,随着神经酰胺染毒浓度的升高和染毒时间的延长,AECⅡ细胞增殖抑制率呈上升趋势。10μmol/L的神经酰胺分别刺激融合的AECⅡ单层12和24 h后,与未处理对照组比较,神经酰胺刺激组的跨上皮电阻值显著下降。

HIF-1α和VEGF在胆道闭锁患儿肝组织中的表达及意义

目的研究胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝组织中缺氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达及与血管生成和纤维化的关系,探讨其在BA发病中可能的作用机制。方法选取胆道闭锁患儿(BA组)肝组织15例、胆管扩张症患儿(CBD组)肝组织10例、BA发展为肝硬化接受肝移植患儿(LT组)肝组织10例。HE、Vimentin染色观察各标本的组织学改变并判定纤维化程度,CD34染色标记血管计数微血管密度(MVD),免疫组化法检测HIF-1α和VEGF在各组肝组织中的表达。结果 CBD组、BA组、LT组微血管密度分别为16.8±1.9、23.2±3.8、25.9±2.1。HIF-1α在肝细胞胞浆和部分胞核中表达,BA组HIF1-α的光密度(0.160 7±0.029 7)高于CBD组(0.150 4±0.146 3)和LT组(0.151 3±0.005 9),P<0.05。VEGF在肝细胞、胆管、动脉壁的表达,BA组VEGF的光密度(0.162 9±0.012 9)高于CBD组(0.132 2±0.025 7)和LT组(0.146 2±0.015 2),P<0.05。结论 HIF-1α、VEGF可能通过参与BA中的血管生成过程,促进肝纤维化。

JNK2、TIMP-1及Collagen Ⅲ在胆道闭锁肝纤维化中的作用研究

目的研究c-Jun氨基末端激酶2(c-Jun N-terminal kinase,JNK2)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP-1)及CollagenⅢ在胆道闭锁(BA)肝组织中的表达情况及在肝纤维化进程中的作用。方法选取胆管扩张症肝活检病例10例,为胆扩组;BA肝活检病例15例,为BA组;BA晚期因肝功能衰竭而行肝移植患者自体肝活检10例,为肝移植组。采用HE染色观察并评价肝标本纤维化程度;免疫组化染色检测JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ在肝组织中的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肝组织中JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ基因表达情况。结果①HE染色:胆扩组偶可见少许纤维细胞增生;BA组汇管区增宽,纤维组织增生、桥接纤维化现象普遍,可见假小叶形成;肝移植组汇管区明显增宽,纤维组织增生较重,广泛桥接纤维组织形成,假小叶显著。②免疫组化:胆扩组JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ表达为弱阳性,BA组及肝移植组JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ蛋白均在肝细胞、汇管区胆管上皮细胞及血管内皮细胞胞质中阳性表达。(3)半定量分析:三组JNK2(0.122±0.008、0.182±0.017和0.198±0.033),TIMP-1(0.123±0.009、0.185±0.012和0.201±0.017)和CollagenⅢ(0.126±0.012、0.194±0.008和0.208±0.033)表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.001);三组中,BA组及肝移植组JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ表达明显高于胆扩组(P<0.05);肝移植组JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ蛋白含量与BA组比较,差异无统计学意义(P值均>0.05)。(4)qRT-PCR:三组JNK2、TIMP-1和CollagenⅢmRNA表达水平比较,差异有统计学意义(0.221(0.17)vs 1.395(1.22)vs 1.095(1.21),H=17.686,P=0.003;0.439(0.31)vs 1.404(0.85)vs 1.571(0.66),H=20.648,P=0.000;0.917(0.09)vs 1.802(1.35)vs 1.957(1.30),H=15.555,P=0.007),BA组及肝移植组肝内JNK2、TIMP-1及CollagenⅢmRNA表达含量比胆扩组高(P值均小于0.017)。结论JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ在BA患儿随着肝纤维化加重而表达升高,表明其可能参与并促进BA肝纤维化进程。

胆道闭锁患儿Kasai术后胆管炎病因及诊疗状况

胆管炎是胆道闭锁患儿行肝门-空肠吻合术(Kasai手术)后常见的并发症,其发生原因仍不清楚,可能是由于肝内胆管结构改变、胆汁引流不畅等多种因素的协同作用所致。目前胆管炎的诊断主要依据其临床表现,治疗上则多采用抗生素、激素、保肝药联合应用的经验性方案。Kasai术后胆管炎的防治是提高胆道闭锁患儿自体肝生存时间的关键。解决胆管炎问题需要从病因入手,从根本上预防其发生,才能使Kasai手术获得最佳效果,提高患儿预后。

财政分权、FDI与技术创新

创新是经济高质量发展的关键,财政分权作为一种财政资源配置方式对地区创新有着重要影响。理论分析表明,财政分权会通过外资影响技术创新。在此基础上,文章整合中国工业企业数据和地级市数据,对财政分权、外商直接投资与技术创新之间的关系进行实证分析。研究结果表明:(1)财政分权对技术创新存在显著的抑制作用,党的十八大以来这种抑制作用有所缓解。(2)外资规模是财政分权影响技术创新的重要渠道。财政分权带来了外资的涌入,但是外资逆向调节了其对技术创新的不利影响。进一步的实证研究表明,外资进入速度较快、外资集聚程度较高的地区,财政分权对技术创新的抑制作用更强。(3)通过分区域分行业的异质性检验发现,在东部沿海地区与技术密集型产业,外资对技术创新的抑制作用更为明显。

miRNA与胆道闭锁肝纤维化

胆道闭锁(BA)是婴儿期引起梗阻性黄疸的主要病因之一,以肝内外胆管进行性炎症和纤维性梗阻为主要特征,导致胆汁淤积和肝纤维化及肝硬化。肝纤维化中最重要的是肝星状细胞(HSC)的活化,这一过程受到多种机制的调节,其中mi RNA家族成员可通过调控靶基因的表达,进而作用于多种信号通路促进HSC的活化,在细胞外基质(ECM)的合成和降解中发挥调节作用。大量文献表明PI3K/Akt信号通路与肝纤维化的发生、发展密切相关,参与了活化HSC增殖、凋亡的调控,mi RNA通过各种靶基因激活PI3K/Akt信号通路,进而激活HSC,促进肝纤维化的发展。本文就胆道闭锁肝纤维化相关的mi RNA综述如下。

胆道闭锁流行病学研究进展

胆道闭锁是以肝内、外胆管进行性炎症和纤维化梗阻为特征的一种严重的婴儿期胆汁淤积性肝病,其病因假说很多,但发病具体机制仍未清楚。流行病学研究对于探讨疾病病因及预防措施具有重要意义。本文通过对胆道闭锁的发病率及分型特点、地理性和季节性发病差异、母孕期危险因素等方面内容进行综述,从流行病学角度出发探讨其可能的发病机制。

苦参素对离体大鼠胰岛素分泌的影响

目的观察苦参素通过调节电压门控性钾通道促进离体大鼠胰岛素分泌的效果。方法运用胶原酶P消化法和DispaseⅡ消化法分别得到大鼠的胰岛和胰岛β细胞。大鼠胰岛用于胰岛素分泌实验,采用放射免疫法,实验分为2.8 mmol/L葡萄糖组、2.8 mmol/L葡萄糖+苦参素(1μmol/L)组、2.8 mmol/L葡萄糖+苦参素(10μmol/L)组、2.8 mmol/L葡萄糖+苦参素(100μmol/L)组、11.1 mmol/L葡萄糖组、11.1 mmol/L葡萄糖+苦参素(1μmol/L)组、11.1 mmol/L葡萄糖+苦参素(10μmol/L)组、11.1 mmol/L葡萄糖+苦参素(100μmol/L)组、16.7 mmol/L葡萄糖组、16.7 mmol/L葡萄糖+苦参素(1μmol/L)组、16.7 mmol/L葡萄糖+苦参素(10μmol/L)组、16.7 mmol/L葡萄糖+苦参素(100μmol/L)组。胰岛β细胞用于膜片钳实验,测定电压门控性钾通道电流和动作电位,实验分为对照组和苦参素(10μmol/L)组。结果胰岛素分泌实验表明,低糖(2.8 mmol/L)时,苦参素(1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)未影响胰岛素的分泌(P>0.05)。高糖(11.1 mmol/L、16.7 mmol/L)时,苦参素(10μmol/L、100μmol/L)促进了胰岛素分泌(P<0.01)。膜片钳实验结果显示,苦参素(10μmol/L)抑制了电压门控性钾通道,延长了动作电位时程。结论离体大鼠的胰岛中,苦参素通过抑制电压门控性钾通道,延长了动作电位时程,促进了胰岛素分泌。

C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性及紧密连接蛋白的影响

目的研究外源性C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)单层通透性的影响,探讨其作用机制。方法将体外分离培养的AECⅡ通过差速贴壁法纯化,在Transwell上构建单层,待细胞融合后给予不同浓度的C-8神经酰胺(0、25、50、100μmol/L)继续培养24 h,应用伏欧计测定跨上皮电阻值(TEER)及辣根过氧化物酶(HRP)标记法检测吸光度(OD)值;分别提取细胞总蛋白及总RNA,采用Western blot和实时定量聚合酶链式反应方法检测不同浓度的C-8神经酰胺对AECⅡ紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白水平和mRNA水平表达的影响。结果不同浓度的C-8神经酰胺刺激融合的AECⅡ单层24 h后,各组间TEER值、OD值差异均有统计学意义(F=38.780、19.780,P<0.001)。C-8神经酰胺作用后,ZO-1、Occludin蛋白(F=71.150,P<0.01;F=7.703,P=0.002)及mRNA(F=4.887,P=0.014;F=3.637,P=0.048)表达量明显降低。结论 C-8神经酰胺可能通过下调紧密连接蛋白的表达增加肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性。

ADD3基因rs17095355位点多态性与胆道闭锁相关性研究的Meta分析

目的采用Meta分析方法对rs17095355位点多态性与胆道闭锁相关性进行分析。方法纳入文献的发表时间截至2019年7月,检索英文数据库(PubMed、EMbase、Web of Science)及中文数据库(中国知网、万方数据知识服务平台、维普期刊资源整合服务平台和中国生物医学文献服务系统)中rs17095355位点基因多态性与胆道闭锁相关性的文献。采用Stata 14.0软件进行Meta分析。结果最终纳入7篇文献,共纳入8组独立样本的研究,共纳入6397人。Meta分析显示,rs17095355位点多态性与胆道闭锁患病风险相关,在等位基因、隐性基因、显性基因遗传模型下合并OR值及其95%CI分别为1.66(1.44~1.90)、1.66(1.38~2.01)和2.16(1.38~3.37),差异有统计学意义(P<0.05)。亚洲人群中等位基因遗传模型下该位点与胆道闭锁患病风险的合并OR值及其95%CI为1.72(1.48~1.99),差异有统计学意义(P<0.05)。按样本量大小进行亚组分析后,异质性减少。结论rs17095355位点多态性与胆道闭锁患病风险有关,特别是在亚洲人群中,T等位基因可能是发生胆道闭锁的危险因素,但该结论仍需不同种族中更多高质量、大样本的研究进一步证实。

rs2501577位点多态性与胆道闭锁相关性研究的Meta分析

胆道闭锁(BA)是以肝内外胆道闭塞为特征,导致不可控制、迅速发展的肝纤维化的一种严重肝胆系统疾病,至今病因未明,遗传因素可能在其中发挥重要作用[1]。随着对BA发病机制的探索和对遗传学认识的深入,关于基因、单核苷酸多态性(SNP)与BA之间关系的研究越来越多[2-6]。

山东省经济增长与出口增长的动态关系研究

随着经济全球化的深入发展,经济增长和出口增长之间的动态关系已经成为一个国家或者地区对外贸易发展过程中的永恒性主题。而山东省作为我国一个重要的对外贸易发展城市,研究省内经济增长和出口增长之间的动态关系对于促进省内经济增长、对外贸易发展具有非常重要的意义。文中通过对山东省经济增长和出口贸易总额有关数据进行协整检验与格兰杰因果关系检验,检验结果显示在短期内,经济增长对出口总额的影响很小,但是其间出口总额的增长会拉动经济增长;从长期来看,山东省出口总额和山东省经济增长之间存在双向的格兰杰因果关系。最后,根据得出的因果关系设立计量模型,具体分析二者之间的相关关系,以期为山东省出口贸易的发展提供相应的政策建议。

JLN综合征中国家系研究新发现的KCNE1基因错义突变

目的:对伴发室性心律失常电风暴的Jervell-Lange-Nielsen综合征(JLNS)(先天性QT间期延长综合征伴先天性耳聋亚型)一家系进行基因突变检测,以期发现中国人特有的基因突变。方法:采用聚合酶链反应(PCR)及DNA直接测序法对JLNS一家系进行KCNE1检测。结果:先证者及7位家系成员的KCNE1基因的第112位外显子发现一错义突变:A→G,致丝氨酸密码子(AGT)变成甘氨酸密码子(GGT)。结论:JLNS可由KCNE1基因的突变引起,KCNE1基因第112位A→G错义突变是首次发现的中国JLNS的突变基因及位点。

国外学者论老龄化

随着全球人口老龄化趋势日益明显,国外学者从自动化、经济增长、人力资本和政府财政政策等不同角度探讨了老龄化的相关议题,为进一步开展理论研究和政策实践提供了思路。一、老龄化与自动化劳动力供给减少是否刺激了自动化技术的发展?人口老龄化和自动化作为未来宏观经济发展中的两个重要特征,又会对经济发展产生怎样的影响?

谷氨酰转肽酶测定联合超声诊断先天性胆道闭锁

目的探讨谷氨酰转肽酶联合超声对胆道闭锁（biliaryatresia，BA）的诊断价值。方法回顾性分析梗阻性黄疸患儿69例，其中BA组55例，非BA组（Non-BA）14例。诊断均经术中造影证实。收集两组患者术前实验室检查和超声检查各指标，比较其灵敏度（sensitivity，Se），特异度（specificity，Sp），阳性预测值（positivepredictivevalue，＋PV），阴性预测值（negative predictivevalue，-PV）及准确度（accuracy）。结果BA组GGT高于Non-BA组（t=-4．164，P〈0．05）。以GGT〉306U／L诊断BA时Se、Sp、＋Pv、-PV及准确度分别为69．1％、92．9％、97．4％、43．3％及73．9％。BA组和Non-BA组超声检查中胆囊异常情况比较差异有统计学意义（χ2=9．995，P〈0．05），其诊断BA的准确度为78．3％，其诊断BA的se、sp、＋PV、-PV、准确度分别为83．6％、57．1％、88．5％、47．1％、78．3％。GGT和胆囊异常两者联合诊断BA的Se、Sp、＋PV、-PV为92．7％、92．9％、98．1％、76．5％。准确度为92．8％。结论对于梗阻性黄疸的患儿，当GGT〉306U／L，腹部超声提示胆囊异常者，应尽早行术中造影以明确是否存在胆道闭锁。

胆道闭锁肝纤维化分级

目的分析胆道闭锁（biliary atresia，BA）肝纤维化临床病理特点，提出其肝纤维化评分方法并提示预后。方法选取2010年1月到2014年7月尸检（患儿死于非肝胆疾病）4例，BA肝活检22例（称为Kasai组），BA肝移植组自体肝活检12例（称为移植组）进行苏木素／伊红（HE）、马松（Masson）、CK19（上皮细胞特异性分子标志细胞角蛋白）染色观察患儿肝纤维化情况并收集其临床肝功能生化指标。双盲条件依据患儿肝病变特点将38例肝组织分为0-6共7级，测定门管区、P—P区（门管区-门管区）及增生胆管等病变面积做统计分析。结合患儿血生化检验值探究BA肝纤维化分级与临床肝功能关系。结果①BA肝内门管区、P—P区、胆管反应、假小叶及炎细胞变化显著，纤维化进程可分为0-6级，0级各部分无纤维组织增生，1级门管区增宽至3倍大小，界板可见，间质炎细胞轻度浸润，P-P区轻度增生，2级纤维化继续加重，3级门管区增宽〉4倍，界板模糊坏死，P-P区重度增宽，4级假小叶出现，肝纤维化进展至硬化期，门管区增宽无法界定、消失，至6级时纤维间隔弥漫，大量瘢痕形成。0—4级门管区及p-p区纤维组织增宽面积差异有统计学意义（P〈0．05），胆管反应逐渐加重；4-6级以假小叶和间质病变为主，假小叶数量逐渐增多，炎细胞、纤维细胞等活性下降，胆管反应逐渐消失；②Kasai组患儿肝标本大部分在1-3级，1例出现假小叶归为4级，移植组患儿为4-6级。0—4级BA患儿血生化ALT、AST、胆红素及其组分先升高后下降肝功能逐渐下降。结论本分级标准较好体现BA患儿肝纤维化实际情况，3级以上预示已有肝硬化倾向，提示预后不良。