润滑油降解菌的筛选及其alkB基因的PCR分析

从重庆地区受润滑油污染的酸性土壤中筛选润滑油降解菌,采用形态学和16 srDNA分析鉴定其分类地位,研究它们以润滑油作为唯一碳源的生长能力,并对其烷烃羟化酶基因(alkB)进行了PCR分析。从污染的土壤样品中分离出11株细菌。用酶法检测和干重法检测发现9株细菌均能分解利用润滑油,16 srDNA分析表明这些菌分属Pseudom onas,Cupriavidus,Bacillus,Acine-tobacter,Stenotrophom onas。对这些菌株的PCR分析发现其alkB基因扩增片段大小介于160和400 bp之间。

芽孢杆菌在石蜡油降解过程中的形态变化

以石蜡油为唯一碳源进行芽孢杆菌的培养。观察石蜡油降解过程中芽孢杆菌的形态变化和生长情况。研究发现,芽孢杆菌在起始阶段存在生长迟滞现象,表明芽孢杆菌中与石蜡油降解相关的基因表达属于诱导型。在以石蜡油为唯一碳源的培养过程中,芽孢杆菌于0.5 d开始形成芽孢,3 d后营养体完全转化为芽孢,5 d后部分芽孢开始重新萌发,产生新的营养体。

一株拮抗绿脓杆菌的抗菌蛋白产生菌的分离与鉴定

获得了产生拮抗绿脓杆菌抗菌蛋白的菌株。从土壤样品中筛选拮抗绿脓杆菌的菌株,采用形态学和16S rDNA分析鉴定其分类地位,采用琼脂平板扩散法测定分离菌发酵产物拮抗绿脓杆菌的活性,采用硫酸铵沉淀、分子筛分离发酵上清中的目标蛋白,测定了目标蛋白的蛋白酶敏感性、高温耐受性。结果表明:从土壤中分离出的该株不动杆菌,从其发酵产物中纯化出的目标蛋白有拮抗绿脓杆菌的活性;该目标蛋白对蛋白酶K或高温敏感,处理后可降低或丧失抗绿脓杆菌的活性,该抗菌蛋白相对分子量约35 KD。