基于芳香烃受体干预MLCK/pMLC信号通路探讨肾衰宁颗粒对尿毒症腹膜透析大鼠肠屏障的保护作用

目的:探讨肾衰宁颗粒对尿毒症(Uremia)腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)大鼠肠屏障的保护机制。方法:40只大鼠随机分为假手术组、模型组及肾衰宁颗粒低、中、高剂量组,进行造模、给药等处理,给药结束后腹主动脉取血检测各组大鼠血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、白蛋白(Alb)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,HE及AB-PAS染色观察肠道组织病理形态变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、脂多糖(LPS)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)观测大鼠结肠标本AhR、MLCK、pMLC蛋白表达情况。结果:与假手术组相比,模型组大鼠结肠组织损害明显,BUN、Scr、DAO、D-LA、TNF-α、hs-CRP、LPS水平明显上升(P<0.05),肾衰宁颗粒大鼠结肠组织病理损伤较模型组减轻,上述指标均明显降低,Alb水平明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠结肠组织AhR蛋白表达量降低、MLCK、pMLC蛋白表达量升高(P<0.05)。肾衰宁颗粒的干预有效逆转了模型组AhR、MLCK及pMLC蛋白表达量的改变。结论:肾衰宁颗粒可能通过调控AhR干预MLCK/pMLC通路,改善PD大鼠肠屏障功能障碍。

基于Shh/Gli1信号通路探讨肾衰宁颗粒对5/6肾切除肾衰竭模型大鼠肾间质纤维化的影响

目的:研究肾衰宁颗粒抑制Shh/Gli1信号通路改善5/6肾切除肾衰模型大鼠肾间质纤维化的作用机制。方法:将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、肾衰宁颗粒低、中、高剂量组(0.675、1.35、2.7 g/kg),每组8只。除假手术组外其余各组大鼠均通过5/6肾切除术建立慢性肾衰竭模型。术后,给药组大鼠每日灌胃相应药物,假手术组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,连续12周。检测大鼠血清中Scr、BUN、Alb、TG、TC、AST、ALT水平,以及TGF-β、ColⅠ的含量;HE染色和Masson染色观察大鼠肾脏组织形态和纤维化情况;Western Blot法检测大鼠肾脏组织中Shh、Gli1、α-SMA、ColⅠ、FN蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清中Scr、BUN、TG、TC水平,TGF-β、ColⅠ含量,肾脏组织中Shh、Gli1、α-SMA、ColⅠ、FN蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05),血清中Alb含量明显降低(P<0.05),AST、ALT含量差异无统计学意义(P>0.05);肾脏病理形态学观察显示肾小管扩张,胶原沉积明显,肾间质炎性细胞浸润明显。经肾衰宁颗粒干预后,大鼠血清、肾脏组织中上述指标水平均有不同程度的改善,肾脏组织病理损伤、胶原沉积均有所减轻。结论:肾衰宁颗粒可改善5/6肾切除肾衰模型大鼠的肾间质纤维化,其作用机制可能与抑制Shh/Gli1信号通路有关。