环丙沙星对斑马鱼早期发育阶段的神经毒性研究

环丙沙星是恩诺沙星的主要代谢产物,因其抗菌谱广、杀菌力强、起效快等优点而被广泛应用,在土壤、水体等环境中被不同程度检出,然而目前有关环丙沙星对鱼类早期生命发育阶段的神经毒性效应研究较少。采用模式动物斑马鱼(Danio rerio)作为研究对象,在0.1、1 mg·L^(-1)浓度水平上,从胚胎自发运动、运动活性、乙酰胆碱酶活性及多巴胺、血清素通路和神经发育关键基因的表达等方面评估环丙沙星对斑马鱼早期发育阶段的神经毒性。结果表明,0.1 mg·L^(-1)浓度组抑制斑马鱼胚胎自发运动(P<0.001),1 mg·L^(-1)浓度组诱导乙酰胆碱酯酶活性(P<0.05);1 mg·L^(-1)浓度组斑马鱼运动行为活跃(P<0.05)和光照刺激惊恐反应性增加(P<0.01);同时,胆碱能系统、多巴胺、血清素通路和神经发育系统的ache、shha、th2、htr1aa、htr5a表达上调(P<0.05),gfap、dat、nestin基因表达下调(P<0.05)。这些结果表明环丙沙星可能通过影响多巴胺、血清素和神经发育关键基因的表达产生神经毒性,进而影响运动行为。

姜黄素对黄曲霉毒素B1诱导的斑马鱼肝损伤的修复作用

通过构建黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)诱导的斑马鱼肝损伤模型,研究姜黄素对斑马鱼肝脏的修复作用。采用荧光显微镜观察斑马鱼仔鱼肝脏荧光及形态变化;苏木精-伊红染色观察斑马鱼仔鱼肝脏组织病理变化情况;油红O染液对斑马鱼仔鱼进行整体染色,观察卵黄囊处脂肪的吸收情况;行为分析仪进行运动行为分析;超高效液相色谱串联质谱仪测定其体内氨基酸含量的变化。结果显示,经姜黄素修复后,斑马鱼仔鱼肝脏处的荧光面积及荧光强度恢复至正常水平,且姜黄素显著改善了斑马鱼肝脏组织的病理形态,促进了卵黄囊对脂肪的吸收,减少了卵黄囊处脂质积累,恢复了仔鱼的运动行为。该研究表明,姜黄素通过调节与脂肪合成、抗氧化和能量代谢相关的通路,起到了修复肝损伤的作用。

基于斑马鱼模型的8-姜烯酚抗血管作用研究

为研究生姜活性成分8-姜烯酚的抗血管生成作用及其机制,本文通过水溶给药,将斑马鱼胚胎随机分为空白对照组、溶剂对照组、8-姜烯酚不同浓度实验组(50、200、500、1000 mg/mL)、阳性药对照组(PTK-787,1μg/mL),每组30尾,观察并分析8-姜烯酚对斑马鱼胚胎的肠下静脉血管(SIV)生成、生长发育、活性氧(ROS)含量、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,Vegf)家族基因vegfaa、vegfc和flt4表达的影响。结果发现,8-姜烯酚可以降低斑马鱼胚胎ROS的含量,并提高斑马鱼胚胎ATP水平,同时使vegfaa、vegfc、flt4的表达水平下降,血管生成的信号被抑制,肿瘤的生长和转移可以被阻断。研究表明,8-姜烯酚可以通过ROS-Vegf信号通路发挥抑制血管生成的作用,可能具有潜在的癌症治疗作用。

氟苯尼考及代谢物氟苯尼考胺对斑马鱼胚胎氧化应激的影响

本文研究了氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺对斑马鱼胚胎发育的影响及毒性作用差异。采用不同浓度的药物处理斑马鱼胚胎,于暴露后24~120 h观察胚胎的孵化率、仔鱼的心率和体长等形态学变化;测定暴露后120 h斑马鱼的活性氧(ROS)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量;进行吖啶橙(AO)染色和线粒体膜电位(JC-1)染色成像,以确定其凋亡情况。结果显示,氟苯尼考和氟苯尼考胺均会影响斑马鱼胚胎孵化率、仔鱼心率,前者主要影响鱼鳔发育,后者会导致体长变短;二者均会破坏胚胎体内的抗氧化系统,主要表现为ROS和MDA含量增加,CAT活性降低,GSH活性增加;此外,二者均会诱导斑马鱼体内产生细胞凋亡,且主要集中于心脏和脑部。研究表明,氟苯尼考和氟苯尼考胺均会影响斑马鱼胚胎的发育,其作用机制与氧化应激和细胞凋亡相关,但二者所引起氧化应激的程度有所不同,氟苯尼考的毒性效应程度大于其代谢物氟苯尼考胺。