薯蓣皂苷元对非酒精性脂肪肝病模型大鼠mTOR/FASN/HIF-1α/VEGFA表达的影响

研究薯蓣皂苷元对非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型大鼠肝组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达的影响,探讨薯蓣皂苷元对NAFLD大鼠脂质生成和炎症的作用机制。40只雄性SD大鼠,随机选取8只为正常组给予普通饲料喂养,其余32只给予高脂饲料喂养以构建NAFLD模型。造模成功后随机分为高脂饮食组、薯蓣皂苷元低剂量组(150 mg·kg-1·d-1)、薯蓣皂苷元高剂量组(300 mg·kg-1·d-1)、辛伐他汀组(4 mg·kg-1·d-1),每组8只,连续灌胃给药8周。生化法检测血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)及谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的水平;酶法检测肝脏中TG、TC的含量;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的水平;油红O染色检测肝脏脂质蓄积情况;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测肝组织病理形态变化;实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法分别检测大鼠肝组织中mTOR、FASN、HIF-1α、VEGFA mRNA和蛋白的表达水平。结果显示,与正常组比较,高脂饮食组大鼠体质量以及TG、TC、LDL-C、ALT、AST、IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.01),肝脏脂质蓄积显著增多(P<0.01),肝脏出现明显的脂肪变性,肝脏mTOR、FASN、HIF-1α、VEGFA mRNA水平显著升高(P<0.01),肝脏p-mTOR、FASN、HIF-1α、VEGFA蛋白水平显著升高(P<0.01)。与高脂饮食组比较,各治疗组大鼠体质量以及TG、TC、LDL-C、ALT、AST、IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01),肝脏脂质蓄积显著减少(P<0.01),肝脏脂肪变性明显改善,肝脏mTOR、FASN、HIF-1α,VEGFA mRNA水平显著降低(P<0.05,P<0.01),p-mTOR、FASN、HIF-1α、VEGFA蛋白水平显著降低(P<0.01)。薯蓣皂苷元高剂量组的治疗效果优于薯蓣皂苷元低剂量组和辛伐他汀组。薯蓣皂苷元可能通过降低mTOR、FASN、HIF-1α、VEGFA的表达,减少肝脏脂质合成和炎症反应,增强自噬水平,发挥防治NAFLD的作用。

薯蓣皂苷元通过mTOR/SREBP-1c/HSP60/MCAD/SCAD信号通路缓解高脂饮食诱导的大鼠NAFLD

研究薯蓣皂苷元对非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型大鼠肝组织中雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、甾醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1c)、热休克蛋白60(heat shock protein,HSP60)、中链酰基辅酶A脱氢酶(medium-chain acyl-CoA dehydrogenase,MCAD)、短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-CoA dehydrogenase,SCAD)表达的影响,探讨薯蓣皂苷元缓解NAFLD的作用机制。40只雄性SD大鼠,按照随机数表法分为5组:对照组、高脂饮食组、薯蓣皂苷元低剂量组(150 mg·kg^(-1)·d^(-1))、薯蓣皂苷元高剂量组(300 mg·kg^(-1)·d^(-1))、辛伐他汀组(4 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组8只,其中对照组大鼠给予普通饲料喂养,其余4组大鼠给予高脂饮食喂养,喂食8周后,高脂饮食喂养组大鼠的体质量显著增加,此后,每天以相应剂量薯蓣皂苷元或辛伐他汀连续灌胃给药8周。生化法检测血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)及谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平;酶法检测肝脏中TG、TC水平;油红O染色检测肝脏脂质蓄积情况;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测肝组织病理形态变化;实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法分别检测大鼠肝组织中mTOR、SREBP-1c、HSP60、MCAD、SCAD的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,高脂饮食组大鼠体质量、食物摄入量、肝指数以及血清TG、TC、ALT、AST水平和肝脏TG、TC水平显著升高,肝脏脂质蓄积显著增多,肝脏结构紊乱,脂肪变性明显,肝脏mTOR、SREBP-1c的mRNA和蛋白表达水平显著升高,而HSP60、MCAD、SCAD的mRNA和蛋白表达水平显著降低;与高脂饮食组比较,各治疗组大鼠体质量、食物摄入量、肝指数以及血清TG、TC、ALT、AST水平和肝脏TG、TC水平显著降低,肝脏脂质蓄积显著减少,肝脏脂肪变性明显改善,肝脏mTOR、SREBP-1c的mRNA和蛋白水平显著降低,HSP60、MCAD、SCAD mRNA和蛋白水平显著升高。薯蓣皂苷元高剂量组的治疗效果优于薯蓣皂苷元低剂量组和辛伐他汀组。薯蓣皂苷元可能通过抑制mTOR、SREBP-1c的表达,促进HSP60、MCAD、SCAD的表达,以减少肝脏脂质合成、改善线粒体功能、促进脂肪酸β氧化,发挥防治NAFLD的作用。