超抗原SEB和D-氨基半乳糖对小鼠肝细胞的作用观察

用超抗原葡萄球菌Ｂ型肠毒素（ＳＥＢ）、Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ）及两者合用腹腔注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于２、６、１２、２４ｈ取肝脏和血标本，从形态学和生化指标来研究肝细胞的死亡模式；同时还检测了小鼠２４ｈ死亡率。结果发现单用ＳＥＢ可诱导肝细胞凋亡，其机制可能与ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ等细胞因子的产生和作用有关。单用Ｄ－ＧａｌＮ可同时引起肝细胞凋亡和变性，ＳＥＢ和Ｄ－ＧａｌＮ合用２、６ｈ见肝细胞凋亡，１２ｈ后以肝细胞坏死为主，小鼠２４ｈ死亡率达５０％。因而，推测凋亡与坏死间存在一定的联系。

超抗原及其临床意义

超抗原(superantigen,SAg)是细菌和病毒的产物,它的一个显著生物学特征是能非特异地刺激T细胞增殖,并促进其释放TNF、IFN-γ、IL-2等细胞因子。它激活T细胞的机制与普通抗原和T细胞有丝分裂原有显著不同。微生物超抗原的生物学特征与这些微生物所致疾病的发病机制密切相关。

细胞因子信号抑制蛋白与细胞因子信号转导

细胞因子诱导的信号转导是被严密控制的 ,目前发现至少有三种不同的负调控途径 ,细胞因子信号抑制蛋白 (SOCS )是其中重要的一种调控方式。

ATRA诱导上调基因RIG-C的cDNA克隆和序列分析及蛋白表达

目的 克隆和表达维甲酸诱导上调的新基因RIG-C。方法 运用Blast、pfam等生物信息学手段对RIG-C的全长cDNA序列进行结构与功能预测;将RIG-C全长阅读框架插入原核表达载体pET22b中,在JM109(DE3)菌株中进行诱导表达;将全长RIG-C插入真核表达的绿荧光蛋白载体pEGFP-C1中,转染NIH3T3细胞以观察RIG-C的亚细胞定位。结果 RIG-C基因cDNA全长1266 bp,编码421个氨基酸,N端具有多个WD40结构域,C端有一个SOCS家族典型结构。原核表达的RIG-C蛋白大小约45 kd,NIH 3T3细胞表达的RIG-C定位于细胞浆。结论 克隆和表达了新基因RIG-C,为进一步研究其生物学功能和蛋白质的空间结构奠定了基础。

吡格列酮干预对糖尿病肾病患者尿单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的探讨吡格列酮对糖尿病肾病(DN)患者尿单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法80例患者随机分为吡格列酮组和对照组(完成71例)。吡格列酮组加服吡格列酮15 mg/d连续6个月。服药前、服药后3个月、6个月分别留取空腹血测定血糖、糖化血红蛋白(HbA1c);留取晨尿液测定MCP-1、微量白蛋白/肌酐(Alb/Cr)。结果吡格列酮组血糖、HbA1c较治疗前有所下降,但无统计学意义(P>0.05),尿MCP-1、Alb/Cr显著降低(均P<0.05)。结论吡格列酮除具备降糖作用外对肾脏还有保护作用。

肝细胞的死亡模式和机制

肝细胞的死亡有两种模式:凋亡和坏死。本文从形态学、生化指标等方面叙述了两者的区别,讨论了肝细胞凋亡和坏死的诱因、机制及相互关系,重点为肿瘤坏死因子(TNF)、病毒、细菌、肝毒性化学物质、肿瘤等因素诱导肝细胞死亡的模式和机制。

雌激素对小鼠参考记忆的影响研究

目的:探讨雌激素去除(OVX)与雌激素替代(ER)对小鼠参考记忆的影响。方法:将3月龄的雌性C57BL/6J小鼠40只随机分为对照组和卵巢切除组,卵巢切除组又分为不给雌激素、给雌激素7d、给雌激素40d的3个亚组,每组10只。小鼠摘除卵巢后饲养至7月龄进行8臂迷宫实验,将给雌激素组小鼠于迷宫测试前7d和40d分别皮下埋植控释雌激素(17β-雌二醇)药丸(0.18mg/丸),测试各组小鼠在8臂迷宫的参考记忆错误率。结果:卵巢切除组不给雌激素亚组其参考记忆错误率明显高于对照组(P<0.05);给雌激素7d和40d亚组其参考记忆错误率明显下降(P<0.05,P<0.01),而且长期给雌激素亚组其参考记忆错误率明显少于短期给雌激素亚组。对照组和给雌激素组其错误率无显著性差异(P>0.05)。结论:雌激素去除明显损害了小鼠的空间参考记忆,而雌激素替代可以改善小鼠的记忆能力,并且长期的替代改善效果更明显。

慢性粒细胞白血病的治疗进展

CML发病是由具有异常增高的酪氨酸激酶活性的BCR-ABL融合蛋白所致。当前对CML的治疗存在种种问题,如缓解的持久性、是否延长存活期、能否根除恶性克隆、耐药等,为提高治疗效果,延长生存期,降低治疗费用,联合用药成为国外当前研究的热点之一。

2型糖尿病患者脂代谢异常与血液流变学改变的关系

为探讨在糖尿病状态下脂代谢异常与血液流变学改变的关系 ,测定 2型糖尿病 6 5例 4项血脂指标和6项血液流变学指标。发现 6 5例患者的血流变中全血粘度 (ηb)、血浆粘度 (ηP)和红细胞刚性指数 (IR)与正常组比较均有显著差异 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ;在脂代谢异常情况下 ,血甘油三酯 (TG)、血总胆固醇 (Tch)、血β-脂蛋白 (β-L R)增高组中 ,患者的 ηb、ηP和 IR均较血脂不增高组明显增高 (P<0 .0 5 )。提示糖尿病脂代谢异常可以促进血流变的改变 。

全自动酶标分析仪的临床应用

随着酶免疫测定在医学方面的广泛应用,酶标分析仪也经历了半自动→全自动→多功能的发展历程.全自动酶标分析仪具有快速、简便、敏感、特异性强等优点,利于大批量样品的测定,并易于进行室内及室间质控.

霉酚酸酯对实验性自身免疫性甲状腺炎SD大鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的:研究霉酚酸酯对自身免疫性甲状腺炎(AITD)大鼠甲状腺细胞凋亡的影响。方法:用放射免疫法(RIA)测定SD大鼠AITD时自身抗体滴度的改变、HE染以观察甲状腺组织病理变化及使用TUNEL法观察甲状腺细胞的凋亡程度。结果:实验性AITD甲状腺细胞凋亡的程度明显高于霉酚酸酯组。各实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:霉酚酸酯可能通过抑制AITD甲状腺细胞的凋亡而发挥治疗作用。

1型糖尿病大鼠模型建立及稳定性研究

目的探讨链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导SD大鼠1型糖尿病模型的方法并观察模型稳定性。方法按禁食与否、不同体重、不同给药剂量及不同给药途径对SD大鼠进行分组实验,观察其成模率,并在以最佳方式制备糖尿病模型后,分别于3,7,14,21 d和28 d对成模动物的血糖、每日采食量、饮水量和排尿量进行测定,并与对照组作比较分析。结果选择体重范围为201-240 g SD大鼠,禁食后以50mg/kg STZ一次性腹腔注射为最佳诱发糖尿病模型方式,其成模率可达到83.3%,成模大鼠于注射后72 h,血糖均稳定维持在18.7-21.1 mmol/L左右,同时成模后即出现多饮、多尿和多食表现,其症状体征与临床病人比较相似。结论成功制备1型SD大鼠糖尿病模型,且具有较好的稳定性。

空腹和餐后2h C肽在评估2型糖尿病胰岛β细胞功能中的作用

目的探讨100 g馒头餐C肽(C-P)释放试验中空腹和2 h C肽(2 h GP)在评估胰岛β细胞功能中的作用。方法收集行100 g馒头餐C-P释放试验且资料完整的2型糖尿病326例,分析空腹C-P、2 h C-P增值、2 h C-P/FCP比值与C-P曲线下面积的关系。结果空腹C-P、餐后2 h C-P、餐后2 h C-P增值、餐后2 h C-P与空腹C-P比值与C-P曲线下面积均呈正相关,相关程度由强到弱依次为餐后2 h C-P(r=0.97,P<0.05)、2 h C-P(r=0.88,P<0.05)、FCP(r=0.77,P<0.05)、2 h C-P/FCP比值(r=0.21,P<0.05)。结论评估2型糖尿病胰岛β细胞功能时,100 g馒头2 h C-P肽或2 h C-P增值较FCP价值更大,2 h C-P/FCP比值的价值较小。2型糖尿病患者餐后2 h C-P及其增值可用于评估胰岛β细胞功能。

雌激素干预影响腹腔脂肪积聚的实验研究

目的 :研究雌激素干预对雌性C5 7BL 6J小鼠腹腔脂肪代谢的影响。方法 :采用卵巢切除法造成雌激素缺乏模型 ,以及在动情周期正常和围绝经期的小鼠中 ,给以雌激素干预 ,观察腹腔脂肪重量的变化。 3mon龄小鼠随机分为正常组 ,卵巢切除组 ,给雌激素 15d组和给雌激素 6 0d组 ,每组 10只。小鼠摘除卵巢后饲养至 7mon龄处死。 5和 10mon龄小鼠分为正常组 ,动情周期正常 +雌激素 6 0d组 ,围绝经期组和围绝经期 +雌激素 6 0d组 ,每组 10只 ,分别饲养至 7和 12mon龄处死 ,检测腹腔脂肪重量。各组小鼠于处死前 15和 6 0d分别皮下埋植控释雌激素 (17β 雌二醇 )药丸 (0 .18mg 丸 )。结果 :卵巢切除组腹腔脂肪重量明显增加 (P <0 .0 5 ) ;给雌激素 15d组腹腔脂肪重量减轻 (P <0 .0 5 ) ;给雌激素 6 0d组腹腔脂肪重量有明显减轻 ,与正常组比较无显著性差别 (P >0 .0 5 )。动情周期正常 +雌激素组和围绝经期 +雌激素组的小鼠 ,其腹腔脂肪重量的变化无差别。结论 :卵巢切除明显影响小鼠的脂肪代谢导致腹腔脂肪积聚 ,而雌激素干预 ,特别是长期应用 ,可以明显减少小鼠的腹腔脂肪积聚。

甲异靛联合imatinib对CML K562细胞的促凋亡作用

目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用。方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和AnnexinV/PI)的改变,ELISA方法检测caspase3活性改变,Westernblot检测凋亡相关蛋白(cytC,cIAP1,procaspase3和PARP)的改变。结果与单用组相比,20μmol/L甲异靛与0.3μmol/Limatinib联合应用后,线粒体跨膜电位下降细胞比例明显升高,cytC释放入胞浆,caspase3酶原形式procaspase3减少,caspase3活性升高,其底物PARP被降解,AnnexinV水平升高。结论甲异靛与imatinib合用可协同促进K562细胞凋亡。

细胞因子对小鼠α2(I)型前胶原基因启动子活性影响的研究

目的：探讨细胞因子对小鼠α２（Ｉ）型前胶原基因上游启动子活性的影响。方法：以小鼠α２（Ｉ）型前胶原基因启动子（－２ｋｂ～＋５４ｂｐ）为靶序列，将它与氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因组成的重组体ｐＡＺ１００９用脂质体法转染至胶原产生细胞ＮＩＨ／３Ｔ３细胞，讨论ＩＦＮα、ＩＦＮγ、ＴＮＦα对小鼠α２（Ｉ）型前胶原基因上游启动子活性的影响。结果：ＴＮＦα抑制小鼠α２（Ｉ）型前胶原基因启动子活性，ＴＮＦα分别与ＩＦＮγ、ＩＦＮα联合应用能加强这种抑制作用。结论：ＴＮＦα分别与ＩＦＮγ、ＩＦＮα联合应用能加强抑制作用，这可能与ＩＦＮγ、ＩＦＮα诱导ＴＮＦα受体表达，从而加强ＴＮＦα抑制作用有关，而ＩＦＮγ抑制胶原蛋白合成作用与该序列无直接相关。

急性冠状动脉综合征患者血清细胞粘附分子的变化

目的 :观察急性冠状动脉综合征患者血清可溶性细胞粘附分子 1 (ICAM 1 )、血管细胞粘附分子 1(VCAM 1 )、E 选择素 (E S)和血管性假血友病因子 (v WF)的变化以及急性心肌梗死 (AMI)患者成功再灌注后上述指标的动态变化。方法 :急性冠状动脉综合征组 37例中 AMI 2 1例 ,随机接受直接冠状动脉腔内成形术或溶栓治疗 ,于再灌注治疗前和治疗后 1 2、2 4、48和 72小时各抽血 1次 ,心绞痛患者 1 6例和正常对照组 40例抽血 1次。指标测定用双抗体夹心 EL ISA法。结果 :急性冠状动脉综合征组 ICAM 1、VCAM 1、E S和v WF测值分别为 (2 77.5± 6 8.2 ) μg/ L,(885 .3± 1 83.2 ) μg/ L,(5 7.6± 8.9) μg/ L 和 (1 39.9± 2 8.7) μg/ L,均显著高于正常对照组 ,分别为 (2 1 0 .7± 5 8.8) μg/ L(P<0 .0 5 ) ,(6 1 1 .4± 74.6 ) μg/ L(P<0 .0 5 ) ,(44 .9± 6 .2 ) μg/ L(P<0 .0 1 )和 (1 0 6 .6± 36 .1 ) μg/ L(P<0 .0 5 ) ;与治疗前相比 ,1 6例 AMI再灌注治疗成功患者的 ICAM 1、E S测值在 2 4和 48小时后显著降低 (P均 <0 .0 5 ) ,VCAM 1在 2 4和 72小时后显著降低 (P均 <0 .0 5 ) ,v WF在 1 2、2 4、48和 72小时后显著降低 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ;而 5例再灌注治疗不成功患者上述测值均无显著降低 ;

床旁清创治疗WagnerⅢ～Ⅳ级糖尿病足12例临床分析

目的总结糖尿病足的临床特点及治疗体会,探讨以内分泌科为主的糖尿病足治疗模式。方法回顾分析南通大学附属医院内分泌科2012年01月至2012年12月,收治的WagnerⅢ～Ⅳ级糖尿病足12例。总结内科综合治疗基础上,根据病情分阶段有重点地进行床旁清创治疗的效果。结果 12例WagnerⅢ～Ⅳ级糖尿病足患者,临床特点为年龄高、病程长、并发症和合并症多,在代谢紊乱的基础上合并营养不良。治愈9例,死亡1例,截趾1例,截肢1例。结论无需紧急外科手术治疗的糖尿病足患者,内科综合治疗联合床旁清创可有效促进创面愈合,降低截肢率。

血清脂蛋白（a）酶联免疫吸附测定方法及正常参考值

应用自制脂蛋白（ａ）单克隆抗体建立了双单抗夹心酶联免疫吸附测定法。本法特异性强，批内变异系数２．６％，批间８．１％，检测下限０．３ｍｇ／ｄｌ，回收率９８．６％，本法与ＴｉｎｔＥｌｉｚｅＬｐ（ａ）ｋｉｔ标准曲线形态相似，两者测值（ｎ＝８０）相关系数为０．８４８。检测３５９名正常人血清脂蛋白（ａ）水平为２２．３２±１９．７ｌｍｇ／ｄｌ，呈偏态分布。