贵州不同地区山银花中4种异绿原酸含量测定方法的建立

目的：建立测定贵州不同地区山银花中4种异绿原酸含量的高效液相色谱（HPLC）方法。方法：考察HPLC法[色谱柱为Diamonsil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）、流动相为乙腈（A）-0.4%磷酸（B）,梯度洗脱、流速为1m L/min,柱温30℃,检测波长327 nm]测定山银花中新绿原酸、绿原酸、异绿原酸A（3,5-二咖啡酰奎宁酸）、异绿原酸C（4,5-二咖啡酰奎宁酸）含量的色谱条件、线性关系及回收率,观察贵州不同产地的10批山银花中的4种异绿原酸的含量。结果：本研究设定的色谱条件可测得山银花中4种异绿原酸的色谱峰,山银花中新绿原酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C分别在2.73～87.45 mg/L（r=0.999 9）、14.24～455.95 mg/L（r=0.999 8）、5.75～184.0 mg/L（r=0.999 3）及5.25～168.0 mg/L（r=0.999 7）范围内呈良好线性关系,山银花中的4种异绿原酸回收率均〉99.2%;10批山银花中新绿原酸的含量以遵义最高,绿原酸、异绿原酸A及异绿原酸C含量最高的采集地均为毕节,毕节地区山银花中4种异绿原酸的总含量也高于其他地区。结论：成功建立了测定山银花异绿原酸的含量的HPLC法,贵州山银花中的4种异绿原酸含量不相同。

银翘散的UPLC指纹图谱研究

目的:通过建立银翘散的UPLC指纹图谱,为进一步提高银翘散质量标准提供依据。方法:运用Waters超高液相色谱仪,ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为甲醇-乙腈(1∶1)-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;流速0.3 m L/min;检测波长230 nm;柱温40℃。结果:根据10批银翘散的指纹图谱,确定了24个共有峰,利用对照品指认了5个共有峰。结论:该研究采用UPLC建立银翘散的指纹图谱,方法操作简单、特征性强、精密度高、重现性好,可为银翘散的质量控制和评价标准提供可靠依据。

贵州苗药百草妇炎清栓的制备工艺

目的:完善百草妇炎清栓制备工艺,提升百草妇炎清栓的产品稳定性。方法:以百草妇炎清栓的融变时限和体外耐热温度为考察指标,通过单因素及正交试验考察栓剂基质处方中明胶与甘油比例、溶胶用水量及浸膏含水量等因素对百草妇炎清栓的产品稳定性的影响。结果:3个因素对百草妇炎清栓稳定性影响程度从大到小依次为明胶甘油比例>浸膏含水量>浸泡明胶用水量,最佳处方条件为明胶甘油比例为1∶6,浸膏含水量控制在20%,明胶浸泡用水量与明胶比例为1∶1;依照该配比制备的样品外型光滑,融变时限达到药典标准,体外耐热温度可达44℃。结论:明胶甘油比例为1∶6,浸膏含水量控制在20%,明胶浸泡用水量与明胶比例为1∶1时百草妇炎清栓的稳定性好。

“一测多评”法测定淡豆豉药材中4种黄酮类成分

目的建立淡豆豉药材中4种黄酮类成分同时测定的一测多评含量测定方法。方法色谱条件：采用Diamonsil-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相甲醇（A）-0.5%冰醋酸溶液（B）,梯度洗脱（0-25 min,30%-45%A,25-50 min,45%-60%A）,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长260 nm。以大豆苷元为指标,建立药材中该成分与大豆苷、染料木苷及染料木素的相对校正因子,利用校正因子计算4种黄酮类成分的含量,实现一测多评,同时采用外标法测定4种黄酮类成分的含量,比较计算值与实测值的差异。结果 15批淡豆豉药材中4种黄酮类成分的含量可以用一测多评法进行测定,建立的校正因子重复性良好,采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异。结论以外标法测定大豆苷元,利用相对校正因子实现大豆苷,染料木苷,染料木素测定是准确的,可行的,一测多评法可以用于特定的不同类型成分间的测定。

3种不同提取方法对蜘蛛香挥发油化学成分的气相色谱-飞行时间质谱分析

目的:比较不同提取方法所得蜘蛛香挥发油化学成分的差异。方法:采用水蒸气蒸馏、超临界CO_2萃取及索氏提取蜘蛛香挥发油,并用气相色谱-飞行时间质谱联用技术分析其化学成分,以峰面积归一化法计算各成分的相对含量。结果:3种提取方法所得蜘蛛香挥发油的化学成分存在一定差异,从水蒸气蒸馏提取蜘蛛香挥发油中鉴定出96个组分,超临界CO_2萃取中鉴定出67个组分,索氏提取鉴定出66个组分。结论:3种提取方法所得蜘蛛香挥发油中异戊酸均为含量最高的成分,水蒸气蒸馏提取大多为萜类化合物,超临界CO_2萃取和索氏提取主要为酸类和缬草素类。

不同前处理法测定灵芝提取物中金属含量的对比研究

目的不同的前处理方法对灵芝提取物中Ph、Cd、As等10种金属元素测定的对比研究。方法分别采用微波消解法、全自动湿法消解法和电热板湿法消解法前处理样品，通过ICP—MS测定灵芝提取物中Pb、Cd、As等10种金属元素的含量。结果3种处理方法处理后的各金属测定结果差异除Hg外均无统计学意义（P〉0．05），全自动湿法消解法和电热板湿法消解法Hg的平均回收率分别为65．28％和70．39％，微波消解法Hg的平均回收率为98．31％，3种消解法的其他9种金属元素的回收率在92．19％～103．26％之间，精密度的RSD均小于5％。结论全自动湿法消解法和电热板湿法消解法无法满足灵芝提取物中10种金属污染物同时检测的前处理要求，微波消解法能够满足且测定结果没有显著性差异，考虑到微波消解法更为简便、快速，因此，微波消解法更适合灵芝提取物中金属的定量分析，在实际工作中，建议根据具体金属元素检测需求选择合适的前处理方法。

银翘散超微粉的HPLC指纹图谱及多指标成分的定量分析

建立了银翘散超微粉的HPLC指纹图谱及多指标成分(绿原酸、连翘酯苷A、甘草苷、连翘苷、牛蒡苷)的定量测定方法。采用Diamonsil C_18色谱柱,流动相为乙腈∶0.2%磷酸,线性梯度洗脱,检测波长230 nm。利用中药指纹图谱相似度评价系统(2.0版)对10批银翘散超微粉指纹图谱进行分析,确定了33个共有峰,10批样品的指纹图谱与对照图谱相似度达0.971以上。指标性成分绿原酸、连翘酯苷A、甘草苷、连翘苷和牛蒡苷在相应浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.25%、99.48%、101.32%、99.79%和99.15%,RSD分别为1.15%、0.87%、1.42%、1.98%和0.94%。

超高效液相色谱法同时测定银翘散中4种指标性成分含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定银翘散中绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、牛蒡苷含量的方法。方法:采用UPLC法,ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),检测波长230 nm,柱温为40℃,同时测定4种指标性成分的含量。结果:绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷、牛蒡苷分别在10.75~344.0,7.062 5~226.0,2.375~76.0,9.656 25~309.0μg·mL^(-1)线性关系良好(r≥0.999 1)。结论:该方法操作简便快速,结果准确,专属性强,重复性好,可用于银翘散的质量控制。

不同产地淡豆豉药材多指标成分的高效薄层色谱指纹图谱研究

目的建立淡豆豉多指标有效成分的高效薄层色谱(HPTLC)指纹图谱,并分析不同产地淡豆豉药材的指纹图谱。方法以大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素为对照品,用硅胶GF254高效预制薄层板,以氯仿-甲醇-水(8∶2.5∶1)为展开剂,在254 nm处检视并照相,扫描各轨道光谱得HPTLC指纹图谱。用指纹图谱系统解决方案软件生成共有模式,进行相似度分析。结果 10批不同采集地的淡豆豉商品药材在指标成分的相对含量上有不同程度的差异,大致可分为3类。结论所建HPTLC指纹图谱可为淡豆豉药材的指纹图谱研究奠定方法学基础,为评价淡豆豉药材品质、制定标准发酵规程及质量控制提供重要依据。

UPLC法同时测定不同银黄制剂中10种成分

目的建立同时测定银黄制剂中10种成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)的超高效液相色谱(UPLC)方法。方法采用Acquiyt UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 m L/min,在326 nm波长处进行检测,柱温40℃,进样量1.0μL。结果银黄制剂中10种成分在考察线性范围内线性关系良好(r≥0.999 6),加样回收率均在97.43%~99.94%,RSD均小于2.0%。11批银黄制剂样品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素质量分数分别在0.236~3.419、5.279~26.220、0.495~4.714、0.130~2.702、0.310~3.210、0.363~5.036、35.209~133.289、1.493~6.635、1.546~5.393、0.254~0.823 mg/g。结论该方法简便,准确,快速,分离效果好,重复性好,可用于银黄制剂的质量控制,并为将来该制剂质量标准提升提供参考。

豆豉溶栓激酶DCK的体内溶栓抗栓作用

目的:探讨贵州豆豉溶栓激酶DCK(DCK酶)的体内溶栓抗栓作用及其相关机制。方法:雄性昆明小鼠随机分为模型组,尿激酶(150 U·g^(-1))组,DCK酶低、中、高剂(150,300,450 U·g^(-1))组,ip 7 d,每日1次,第7天给药30 min后,各组小鼠ip 0.8%角叉菜胶,继续每天给药,观察尾部血栓的变化,于24,36 h游标卡尺测量鼠尾长度和血栓长度,计算血栓形成率和血栓形成相对长度。Wistar大鼠随机分为模型组,尿激酶(100 U·g^(-1))组,DCK酶低、中、高剂量(100,200,300 U·g^(-1))组,ip 10d,每日1次。第10天给药30 min后,水合氯醛溶液麻醉大鼠,分离右颈总动脉、左颈外静脉,构建右颈总动脉-左颈外静脉旁路循环,比较该旁路循环异物所致血栓湿重。新西兰大耳白兔随机分为模型组,尿激酶(38 U·g^(-1))组,DCK酶低、中、高剂量(38,76,114 U·g^(-1))组,耳缘静脉注射给药,给药1 h后耳缘静脉采血,进行凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),纤维蛋白原(FIB),优球蛋白溶解时间(ELT),纤维蛋白(原)降解产物(FDP)的检测。结果:与模型组比较,DCK酶组在24,36 h各组小鼠鼠尾血栓形成相对长度均明显减少(P<0.05,P<0.01);DCK酶高、中剂量组的旁路循环血栓湿重明显减少(P<0.05,P<0.01)。DCK酶高、中剂量组的PT,APTT,TT时间明显延长(P<0.05,P<0.01),DCK酶高、中剂量组FIB明显减少(P<0.05,P<0.01),DCK酶高、中剂量组ELT的水平明显降低(P<0.05),DCK酶组FDP含量均增加,中剂量组明显增加(P<0.05)。结论:DCK酶具有良好的体内溶栓抗栓作用。

HPLC同时测定炎热清软胶囊中栀子苷、黄芩苷和汉黄芩苷的含量

目的:建立HPLC同时测定炎热清软胶囊中栀子苷、黄芩苷和汉黄芩苷的含量。方法:样品采用石油醚回流脱脂,70%甲醇超声提取30 min。采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,检测波长240 nm。结果:炎热清软胶囊中3种有效成分的分离度良好,栀子苷、黄芩苷和汉黄芩苷的平均回收率分别为100.63%,100.77%和97.67%,RSD分别为1.9%,1.5%和1.1%,(n=6)。结论:该方法简便准确、灵敏度高、专属性强,重复性好,可用于炎热清软胶囊的质量控制。

超微粉碎对银翘散急性毒性和主要药效学的影响

目的:探讨超微粉碎对银翘散急性毒性、解热、抗炎及体外抗菌活性的影响。方法:以最大给药量法进行两种粉体的急性毒性对比研究。以2,4-二硝基苯酚致热模型和二甲苯致炎模型,比较银翘散超微粉碎前后的解热抗炎药效学差异。以平皿打孔法和试管二倍稀释法对比研究银翘散普通粉及其超微粉的抗菌活性。结果:急性毒性试验结果表明银翘散及其超微粉1日内最大给药量为45.75 g·kg-1,相当于人的临床日用量的152.5倍,未见由药物引起的毒性反应。解热和抗炎药效学结果表明银翘散的超微粉对2,4-二硝基苯酚所致发热大鼠具有显著的解热作用(P<0.05),对二甲苯所致小鼠耳肿胀具有显著的抑制作用(P<0.05),与等剂量银翘散的细粉相比,作用更明显。且超微粉剂量减半后仍能达到原剂量细粉的药效学效应。抗菌活性实验结果表明银翘散超微粉和细粉水提物对肺炎链球菌和乙型溶血性链球菌的MIC分别为24.22 mg·m L-1、48.43 mg·m L-1;细粉对两种细菌的MIC是超微粉的2倍。结论:超微粉碎后银翘散仍是安全有效的,且可考虑保证药效的基础上减少银翘散的服用剂量,并为银翘散超微粉的临床应用提供一定的实验依据。