特异性人工抗原提呈细胞体外激活CD19嵌合抗原受体T细胞的构建

目的构建CD19特异性人工抗原提呈细胞(aAPC)用于体外激活扩增CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰T细胞(CD19-CAR-T),并考察其杀伤效应。方法通过慢病毒介导的方法制备以NIH3T3为细胞骨架、表达共刺激分子CD86和/或CD137L的CD19特异性a APC(NIH3T3-CD19/86、NIH3T3-CD19/86/137L)。采用照射的CD19特异性a APC与CD19-CAR-T细胞按一定比例混合培养激活扩增CD19-CAR-T细胞,台盼蓝染色法检测并绘制CD19-CAR-T细胞生长曲线;流式细胞术检测CD19-CAR-T细胞CAR表达变化及分化表型;生物发光细胞毒性法检测扩增的CD19-CAR-T细胞体外靶特异杀伤效应。结果流式检测结果显示NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞表面分别高表达CD19、CD86和/或CD137L分子;NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞都能够高效扩增CD19-CAR-T细胞,NIH3T3-CD19/86/137L细胞具有更好的扩增效应,其与CD19-CAR-T细胞混合培养14 d后,扩增的T细胞数量明显高于NIH3T3-CD19/86细胞组(P<0.05);同时,与刺激前相比NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞刺激扩增的T细胞中CD19-CAR-T细胞比例显著增加(P<0.05);扩增的CD19-CAR-T细胞具有靶特异杀伤效应,能够特异性杀伤CD19阳性靶细胞;流式检测显示NIH3T3-CD19/86/137L扩增的CD19-CAR-T细胞含有约20%作用中心记忆性T细胞。结论成功制备CD19特异性a APC,其可在体外特异性扩增功能性CD19-CAR-T细胞,为初步建立制备高质量临床级CD19-CART细胞的方法提供了技术支撑。

南京排出十大“疾病杀手”座次循环系统、肿瘤、呼吸系统疾病列死因前三位

2008年3月12日，南京市疾病控制中心公布了去年我市居民死亡原因分析，十大“疾病杀手”中，循环系统、肿瘤、呼吸系统疾病列死因前三位。

K562细胞为基础的人工抗原提呈细胞用于过继性免疫治疗的研究进展

过继性T细胞治疗是目前肿瘤免疫疗法中最具发展潜力的治疗方法之一。过继性T细胞治疗须首先在体外制备抗肿瘤T细胞,并选择性地扩增理想的T细胞亚群,其目的是在癌症病人体内重建针对肿瘤的特异性免疫反应,从而建立终身持久的免疫记忆。本文就K562细胞为基础的aAPCs及其应用于过继性T细胞治疗的研究现状和前景进行综述。