仔猪睾丸间质细胞培养方法的比较

为了对比仔猪睾丸间质细胞不同培养方法的培养效果。运用过筛培养法、不过筛培养法,组织块培养法3种方法对仔猪睾丸间质细胞进行体外分离和培养,并对其进行细胞各项指标的比较。结果显示,不过筛培养法培养的细胞活力、纯度、细胞功能都较好,培养时间也短;过筛培养法培养的细胞活力较低;组织块培养法培养的细胞纯度较低。但在其他细胞指标上,后两种方法又各自有优点。结果3种培养方法都能简单有效的培养出状态良好的仔猪睾丸间质细胞,但其在纯度,活力,培养时间等方面有所差别。

X射线照射对体外培养仔猪睾丸间质细胞增殖和睾酮分泌的影响

通过X射线照射体外培养仔猪睾丸间质细胞(Leydig Cells,LC),检测睾酮分泌及LC增殖情况,了解X射线对雄性睾酮分泌的影响。以3周龄仔猪为研究对象,采用体外培养体系,在hCG诱导下,X射线辐射,测定24h后LC睾酮分泌量及LC增殖的影响。结果显示,试验常用X射线曝光剂量(43.12～84.86μGy)曝光一次以及在63.16μGy剂量下照射5min、15min、30min对体外培养仔猪睾丸间质增殖有抑制作用,但在曝光剂量43.12～84.86μGy下LC睾酮分泌量与对照组相比差异不显著,在63.16μGy剂量下照射15min、30min睾酮分泌量与对照组相比差异显著(P<0.05)。表明常用X射线剂量曝光一次对睾丸间质细胞增殖有抑制作用,但睾酮分泌量影响不大,但随着照射时间的延长,间质细胞增殖和睾酮分泌显著下降,故在临床使用X射线时应该缩短照射时间,并做好防护。

巴马香猪类固醇激素急性调节蛋白(StAR)基因真核表达载体的构建及鉴定

本试验通过RT-PCR扩增巴马香猪StAR基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为StAR基因在猪睾丸间质细胞中的超量表达研究奠定基础。根据NCBI中猪StAR基因序列设计并合成引物,以巴马香猪睾丸组织总RNA为模板进行RT-PCR,将所得目的基因与pEGFP-C1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-C1-StAR。结果显示,连接到pSURE-T克隆载体上的目的片段测序结果为858碱基组成,编码含有285个氨基酸残基的蛋白质,与NCBI报道的StAR基因比对,核酸同源性在99.3%以上,并成功构建了重组载体pEGFP-C1-StAR。

胃转流手术对模型猪肠道菌群及部分血清学指标的影响

为研究模型猪在实行胃转流手术后肠道菌群以及血清学指标的变化情况。选取6头成年雌性巴马香猪,接受胃转流手术后,检测血清学指标变化,并利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)评价该术式对肠道菌群的影响。结果:正常组菌群平均丰富度(Richness,S)为6.44±0.33,术后一月、二月、三月组为5.30±1.50、7.22±0.60、7.47±0.76;正常组Shannon指数(H')为3.29±0.05,术后组分别为3.12±0.34、3.42±0.11、3.40±0.21;正常组术后一月组跟术后二月组、三月组总相似度为63%,组间差异不明显;血清学统计分析中,正常组和术后七月组在肌酐和总胆红素两项有显著差异。结果表明:胃转流手术会对模型猪肠道微生态造成一定影响,但并不显著;另外该手术可能会损伤肝脏,并降低肾小球通过率。