转Notch1基因T淋巴细胞白血病双荧光示踪斑马鱼模型的建立及鉴定

目的在血管内皮增强型绿色荧光蛋白标记的斑马鱼系(fli1-EGFP)中,转入Rag2启动子驱动的人源性截短型Notch1基因(ICN1),从中筛选并鉴定发生急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的斑马鱼,建立稳定传代的红绿双色示踪的T-ALL斑马鱼疾病模型。方法构建Rag2-ICN1-EGFP质粒,显微注射到斑马鱼胚胎的单细胞期,利用荧光体视显微镜筛选F0代,并建立稳定传代的转基因鱼系。通过荧光体视显微镜、RT-PCR、Western blotting验证ICN1 mRNA和蛋白的表达,并利用流式细胞术、外周血涂片方法鉴定T-ALL斑马鱼模型的表型。结果在867条显微注射重组质粒的斑马鱼中,鉴定发现有20条(2.3%)转基因阳性斑马鱼,为F0代转基因斑马鱼,其中雄鱼9条,雌鱼11条。在已性成熟的F0代成鱼之间采取一对一形式交配,产下F1代,通过荧光体视显微镜、RT-PCR、Western blotting在大体观、mRNA以及蛋白水平验证了ICN1的表达;流式细胞术和外周血涂片结果显示,转基因F1代斑马鱼与fli1-EGFP斑马鱼相比,红细胞比例显著降低,淋巴细胞比例明显增高。结论成功构建转Notch1基因红绿双色示踪的T-ALL斑马鱼模型,为深入探讨Notch在促进T-ALL发生中的调控机制以及利用这种疾病模型进行高通量的活体药物筛选提供了研究平台。

艾溴利平对高糖诱导的内皮细胞内皮素1、血管性假血友病因子表达的影响

目的观察艾溴利平对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞内皮素1、血管性假血友病因子(vWF)表达的影响,并探讨其分子机制。方法应用终浓度为33.3 mmol/L葡萄糖诱导人脐静脉内皮细胞12细胞株高糖模型,实验分为正常对照组、高糖模型组、艾溴利平组,噻唑蓝法评价内皮细胞活力;采用放射免疫方法测定内皮素1含量;酶联免疫吸附法检测培养上清中vWF含量;逆转录-聚合酶链反应检测内皮素1、vWF mRNA的表达;细胞免疫荧光法检测细胞内内皮素1、vWF蛋白水平的改变。结果高糖显著降低内皮细胞活力,增加内皮素1、vWF表达。艾溴利平能显著抑制高糖诱导的内皮功能障碍。低浓度艾溴利平(2、4、8μmol/L)短时间(6、12、24 h)提高细胞活力,降低内皮素1、vWF表达(P<0.01)。结论艾溴利平能抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞功能损伤,可能与vWF、内皮素1表达降低有关。

援老年医学中心医疗队在上海新型冠状病毒肺炎疫情防控中的管理实践与思考

2022年3月~5月期间,上海交通大学医学院附属瑞金医院援老年医学中心医疗队(以下简称“援老年医疗队”)以整建制形式参与抗击新型冠状病毒肺炎(以下简称“新冠肺炎”)的一线救治工作。援老年医疗队充分发挥主观能动性,克服诸多困难,坚持“医-护-院感”三方联动协作机制,合理安排医护人力资源,健全应急管理制度与优化医院感染防控(感控)流程,从而有效保障各项医疗工作保质保量且高效运行。在总计71 d的工作时间里,医疗队共计收治患者880例,其中病情复杂及高龄重症患者48余例,累计出院800例,无危重症及死亡病例。

造血干细胞移植后非感染性肺部并发症的诊治进展

造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)是目前能根治多种恶性血液疾病的唯一方法,同时也是自身免疫病、遗传和代谢性疾病的重要治疗手段^([1-2])。根据供受者的关系,HSCT可分为自体和异体移植两大类。迄今为止,全世界每年有近7万例患者接受HSCT,且逐年增加^([3])。

CAR-T疗法,是如何打败血液肿瘤君的?

血液肿瘤是一种原发于造血系统的疾病,我们临床上最常见的主要包括白血病、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤这三大类。近年来随着血液肿瘤发病率在我国逐年上升,对广大患者朋友的生命健康造成极大的危害,并且其临床表现多种多样,传统的化疗和放疗等治疗手段已经无法满足临床治疗的需求,这也给血液科医疗工作者提出了更高的要求。

止血“先锋”血小板和它的小伙伴们

自我介绍大家好,我叫“板板”,学名“血小板”,母亲是巨核细胞,祖籍骨髓。我的外形像一个圆盘,两面微凸,直径只有2~3微米,有时会变成椭圆形、梭形等。别看我个头小,平均寿命也只有10天左右,但是作为血液中的一种重要成分,我可是妥妥的止血“先锋”。

VEGF和Notch信号在血管形态发生中的作用及其相互调节

血管形态发生是一个动态调节的形态变化过程，包括内皮细胞的变化、小管的相互连接并最后形成血管网络。这个复杂的过程不可避免地会涉及到多个在时间和空间上紧密协调的信号通路。新的毛细血管的形成，包括血管内皮细胞激活、迁移、对齐的方式、增殖、管形成、分支、吻合和细胞间的连接及周边的基底膜的成熟。其中每一个阶段都与血管内皮生长因子（VEGF）和Notch信号通路中已知的或未知的基因密切相关。VEGF是血管开始萌芽的必须因子，还可调节毛细管顶端细胞迁移和血管基干细胞的增殖。Notch参与了血管形成，尤其是动静脉血管内皮细胞分化和顶端细胞与基干细胞表型的选择。现将主要对VEGF和Notch信号通路在血管形态发生中的作用及相互调节作一综述。