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基于荧光定量PCR法的鸡传染性支气管炎疫苗免疫效果评价研究
1
作者
黄庆华
崔宁
+8 位作者
马鑫鑫
陈照坤
杨少华
唐娟娟
王珮珮
历成海
梁立生
古曙光
许传田
《山东农业科学》
2019年第2期121-123,共3页
采用鸡胚传代致弱法得到一株可用于鸡传染性支气管炎疫苗的候选毒株,同时设定一个商品疫苗作为对照,采用荧光定量PCR法评价疫苗的免疫效果。结果表明,攻毒后7 d,两组试验鸡多数脏器均能检测到弱毒,部分脏器检测不到强毒,说明致弱毒株候...
采用鸡胚传代致弱法得到一株可用于鸡传染性支气管炎疫苗的候选毒株,同时设定一个商品疫苗作为对照,采用荧光定量PCR法评价疫苗的免疫效果。结果表明,攻毒后7 d,两组试验鸡多数脏器均能检测到弱毒,部分脏器检测不到强毒,说明致弱毒株候选疫苗和商品疫苗对试验鸡有很好的保护作用。
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关键词
鸡传染性支气管炎
候选疫苗毒株
荧光定量PCR
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职称材料
H9N2亚型禽流感病毒冷适应株的培育及SPF鸡胚感染后的免疫应答分析
被引量:
1
2
作者
马鑫鑫
崔宁
+5 位作者
历成海
黄庆华
梁立生
杨少华
赵孝民
许传田
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期726-733,共8页
H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)冷适应疫苗可以弥补灭活疫苗临床保护效果的不足。为明确宿主对冷适应疫苗的免疫应答效应,本研究将H9N2AIV(A/chicken/Shandong/903/2013,CK/903/2013)接种10日龄SPF鸡胚连续降温传代,获得在25℃能够稳定复...
H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)冷适应疫苗可以弥补灭活疫苗临床保护效果的不足。为明确宿主对冷适应疫苗的免疫应答效应,本研究将H9N2AIV(A/chicken/Shandong/903/2013,CK/903/2013)接种10日龄SPF鸡胚连续降温传代,获得在25℃能够稳定复制的冷适应株Ca30。实验结果显示:Ca30株具备冷适应性和温度敏感性,在传代过程中病毒HA蛋白出现多个位点的氨基酸突变,在25℃传代20次后已经获得稳定的氨基酸突变。动物感染试验结果显示,以106.0EID50的剂量鼻腔感染1周龄SPF鸡,Ca30株仅在喉气管中低水平复制,病毒接种后第3周SPF鸡血清针对Ca30株、异源病毒株1167的血凝抑制效价均达到最高,分别为8.2log2和5.8log2,接种后第4周针对母本病毒CK/903/2013的血凝抑制效价达到最高值7.6log2。qPCR检测结果显示,Ca30在25℃时能够在鸡胚肺脏、肝脏和心脏中复制,对肺脏的亲和力最强。利用qPCR检测冷适应株Ca30接种鸡胚后各脏器细胞因子的转录水平,结果显示,Ca30株感染鸡胚后,引起鸡胚肺脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5转录水平上调,上调4.18~16.47倍;感染后8h引起鸡胚心脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5的转录水平上调,之后降低甚至下调;72h时引起鸡胚肝脏中IL-1β、IL-6、IL-8和OAS转录水平上调,上调4.28~6.53倍;在鸡胚脑组织中,各类细胞因子的转录水平变化无明显的规律。本研究培育了一株H9N2AIV冷适应毒株Ca30,为深入研究冷适应弱毒疫苗的免疫保护机制提供了素材。
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关键词
H9N2亚型禽流感病毒
冷适应疫苗
细胞因子
荧光定量RT-PCR
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职称材料
题名
基于荧光定量PCR法的鸡传染性支气管炎疫苗免疫效果评价研究
1
作者
黄庆华
崔宁
马鑫鑫
陈照坤
杨少华
唐娟娟
王珮珮
历成海
梁立生
古曙光
许传田
机构
山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室
山东农业大学动物科技学院
山东师范大学
日照市东港区南湖镇畜牧兽医站
日照市东港区西湖镇畜牧兽医站
出处
《山东农业科学》
2019年第2期121-123,共3页
基金
国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-41-Z10)
山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2016A10)
文摘
采用鸡胚传代致弱法得到一株可用于鸡传染性支气管炎疫苗的候选毒株,同时设定一个商品疫苗作为对照,采用荧光定量PCR法评价疫苗的免疫效果。结果表明,攻毒后7 d,两组试验鸡多数脏器均能检测到弱毒,部分脏器检测不到强毒,说明致弱毒株候选疫苗和商品疫苗对试验鸡有很好的保护作用。
关键词
鸡传染性支气管炎
候选疫苗毒株
荧光定量PCR
Keywords
Avian infectious bronchitis
Candidate vaccine strain
Immunofluorescence PCR
分类号
S852.657 [农业科学—基础兽医学]
S852.52 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
H9N2亚型禽流感病毒冷适应株的培育及SPF鸡胚感染后的免疫应答分析
被引量:
1
2
作者
马鑫鑫
崔宁
历成海
黄庆华
梁立生
杨少华
赵孝民
许传田
机构
山东农业大学动物科技学院
山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室
山东日照东港区南湖镇畜牧兽医站
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期726-733,共8页
基金
十三五国家重点研发计划(2016YFD0500201)
山东省博士基金(ZR2017BC094)
+1 种基金
现代农业产业技术体系(CARS-41-Z10)
山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2016A10)
文摘
H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)冷适应疫苗可以弥补灭活疫苗临床保护效果的不足。为明确宿主对冷适应疫苗的免疫应答效应,本研究将H9N2AIV(A/chicken/Shandong/903/2013,CK/903/2013)接种10日龄SPF鸡胚连续降温传代,获得在25℃能够稳定复制的冷适应株Ca30。实验结果显示:Ca30株具备冷适应性和温度敏感性,在传代过程中病毒HA蛋白出现多个位点的氨基酸突变,在25℃传代20次后已经获得稳定的氨基酸突变。动物感染试验结果显示,以106.0EID50的剂量鼻腔感染1周龄SPF鸡,Ca30株仅在喉气管中低水平复制,病毒接种后第3周SPF鸡血清针对Ca30株、异源病毒株1167的血凝抑制效价均达到最高,分别为8.2log2和5.8log2,接种后第4周针对母本病毒CK/903/2013的血凝抑制效价达到最高值7.6log2。qPCR检测结果显示,Ca30在25℃时能够在鸡胚肺脏、肝脏和心脏中复制,对肺脏的亲和力最强。利用qPCR检测冷适应株Ca30接种鸡胚后各脏器细胞因子的转录水平,结果显示,Ca30株感染鸡胚后,引起鸡胚肺脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5转录水平上调,上调4.18~16.47倍;感染后8h引起鸡胚心脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5的转录水平上调,之后降低甚至下调;72h时引起鸡胚肝脏中IL-1β、IL-6、IL-8和OAS转录水平上调,上调4.28~6.53倍;在鸡胚脑组织中,各类细胞因子的转录水平变化无明显的规律。本研究培育了一株H9N2AIV冷适应毒株Ca30,为深入研究冷适应弱毒疫苗的免疫保护机制提供了素材。
关键词
H9N2亚型禽流感病毒
冷适应疫苗
细胞因子
荧光定量RT-PCR
Keywords
H9N2 subtype avian influenza virus
cold-adapted vaccine
cytokine
RT-qPCR
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于荧光定量PCR法的鸡传染性支气管炎疫苗免疫效果评价研究
黄庆华
崔宁
马鑫鑫
陈照坤
杨少华
唐娟娟
王珮珮
历成海
梁立生
古曙光
许传田
《山东农业科学》
2019
0
下载PDF
职称材料
2
H9N2亚型禽流感病毒冷适应株的培育及SPF鸡胚感染后的免疫应答分析
马鑫鑫
崔宁
历成海
黄庆华
梁立生
杨少华
赵孝民
许传田
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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职称材料
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