金银花、连翘对大肠杆菌感染模型小鼠血清Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的探讨金银花、连翘对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法将雌性昆明种小白鼠随机分为金银花组和连翘组,每组再分为正常组、中药组、模型组和治疗组4个亚组进行处理,观察小鼠的临床状态,双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果金银花(0.01 kg/L)、连翘(0.01 kg/L)水煎液对小鼠大肠杆菌的感染有保护作用。与正常组及中药组比较,模型组与治疗组小鼠血清IFN-γ、IL-4表达及IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值均显著升高(P均<0.01);金银花治疗组较模型组IL-10表达显著升高(P<0.05),IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,IL-4表达和IFN-γ/IL-10比值有下降趋势;连翘治疗组较模型组IFN-γ和IL-4表达以及IFN-γ/IL-10比值有下降趋势,IL-10表达和IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论感染模型小鼠辅助性T淋巴细胞1型/2型(Th1/Th2)细胞因子分泌亢进,Th1/Th2平衡有向Th1型漂移的特点。金银花、连翘水煎液均能有效保护感染模型小鼠,其调节小鼠的免疫功能可能与调节Th1/Th2平衡相关。

金银花提取物对炎性反应细胞模型的作用

目的:研究金银花及其不同提取物对炎性反应细胞模型抗炎作用。方法:将金银花及其不同提取物按一定浓度添加到用大肠杆菌滤过液制作的炎性反应细胞模型中,观察细胞形态的变化。结果:金银花黄酮类致使细胞全部裂解破碎;金银花绿原酸类及其水提液组细胞生长旺盛,形态规整,与对照组基本相同。在高浓度菌液中,金银花绿原酸类炎性反应细胞模型的细胞形态有不同程度的改变,稀疏,聚集,较对照组差,随后有圆形细胞产生,而加有金银花水提液的细胞与对照组基本相同。结论:大肠杆菌滤过液随着浓度的升高对细胞形态的改变愈加显著。金银花黄酮类物质对细胞有损害作用,而金银花绿原酸类物质及其水提液在体外有很强的抗炎性反应作用。在高浓度菌液中,金银花水提液的抗炎效果比金银花绿原酸类好。

连翘有效成分对炎症模型的作用

目的:研究连翘提取物对细胞炎症模型的抗炎作用。方法:将连翘提取物按不同浓度作用于细胞炎症模型,观察细胞的形态变化,利用MTT法测定各孔的光吸收值。结果:连翘苷和连翘黄酮对照组细胞形态镜检观察未见明显变化,OD值略比空白对照组低;黄酮对照组细胞几乎全部破碎;不同浓度的大肠杆菌对照组细胞破裂、聚集成团,作用显著(P<0.05),且随着浓度的升高,对细胞形态的改变愈加显著。结论:连翘提取物对炎性细胞有不同程度保护,与同浓度菌液对照组相比,保护作用显著(P<0.05),在100μL浓度菌液中保护作用尤甚,具有一定的抗炎作用。

荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的分离培养

目的:建立荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的分离培养方法。方法:采用组织块种植法培养奶牛乳腺上皮细胞,利用胰蛋白酶差时消化法分离、纯化上皮细胞。结果:成功培养出奶牛乳腺上皮细胞,显微镜下观察,纯化的乳腺上皮细胞呈典型上皮细胞形态,细胞之间排列紧密,呈鹅卵石铺路样,形态均一,多角形的单层聚集。通过荧光免疫细胞染色方法对细胞骨架蛋白-角蛋白18进行鉴定,呈现阳性反应。乳腺上皮细胞增殖旺盛,经25次以上传代后长势仍然良好。结论:采用组织块种植法结合胰酶差时消化法成功获得纯化的奶牛乳腺上皮细胞。

肉苁蓉及淫羊藿对小鼠早期胚胎体外发育的影响

研究肉苁蓉及淫羊藿对小鼠早期胚胎体外发育的影响。试验选取6～8周龄昆明小鼠早期胚胎,以不添加中药培养液组为空白对照,分以下试验组:I组:早期胚胎在纯培养液M16+5%FBS(M1)与M16+5%FBS+EDTA+牛磺酸(M2)中的体外发育情况;Ⅱ组:早期胚胎添加至中药体积浓度为0.1%的M1与M2培养液中。Ⅲ组:早期胚胎添加至不同体积浓度中药成分的培养液中。Ⅳ组:将早期胚胎加入中药不同组合体积浓度培养液中。试验结果:(1)M2液优于M1液,特别是在克服2细胞发育阻滞上。(2)添加0.1%肉苁蓉桑葚胚率与囊胚率高于0.1%淫羊藿组,差异极显著(P<0.01),中药组桑葚胚率与囊胚率显著高于培养液空白对照,差异极显著(P<0.01)。(3)高浓度中药会对胚胎活力产生副作用,抑制胚胎后阶段发育,与其他组对比差异极显著(P<0.01)。(4)添加高浓度中药组合培养液对早期胚胎成活率、2细胞发育率,与低浓度组合中药和空白组相比有显著差异性(P<0.05),与低浓度组合中药和空白对照相比桑葚胚及囊胚发育率差异极显著(P<0.01)。在小鼠胚胎体外培养液中添加一定浓度EDTA、牛磺酸能克服2细胞阻滞;0.1%肉苁蓉能有效促进胚胎体外发育,同时添加低浓度中药及低浓度组合中药也有促进作用。

五味消毒饮对炎症模型的作用研究

目的:探讨五味消毒饮水煎液对乳腺上皮细胞炎症模型的作用及对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法:将96孔板细胞分为对照组、模型组、治疗组和中药组。将五味消毒饮水煎液按终浓度0.2 g/mL、0.4 g/mL和0.8 g/mL添加到乳腺上皮细胞炎症模型中,观察细胞形态,用MTT法检测各组细胞OD值;将24只小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组8只,将1 g/mL的五味消毒饮水煎液腹腔注射于炎症模型小鼠,观察小鼠临床症状,以ELISA法检测血清白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果:五味消毒饮水煎液0.8 g/mL使乳腺上皮细胞固缩、脱壁;0.2 g/mL对细胞炎症模型有显著的保护作用,细胞形态与对照组相同。五味消毒饮水煎液(1 g/mL)对小鼠大肠杆菌感染有保护作用,72 h内,对照组饮水、摄食均衡,精神状态良好,零死亡;模型组饮水、摄食减少,精神萎靡不振,死亡7只,治疗组死亡1只。与对照组比较,模型组小鼠血清IL-10显著升高(P<0.05);治疗组IL-10浓度较模型组低,与对照组比较无显著差异,五味消毒饮有降低炎症小鼠血清IL-10浓度的趋势。结论:五味消毒饮水煎液0.2 g/mL对细胞炎症模型有显著的保护作用,1 g/mL对小鼠大肠杆菌感染有保护作用,且能降低炎症小鼠血清IL-10浓度,促进小鼠免疫机能发挥作用。

黄芪、淫羊藿多糖提高鸡新城疫疫苗免疫效价研究

研究黄芪多糖(APS)和淫羊藿多糖(EPS)对鸡新城疫疫苗免疫增强作用。将80羽1日龄蛋公鸡随机分4组,以血凝实验、血凝抑制实验、间接ELISA检测血清中的抗体水平,结果 APS-EPS合剂组的免疫效果最显著。

黄芪多糖、淫羊藿多糖对鸡法氏囊活疫苗免疫增效作用研究

为了研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)和淫羊藿多糖(Epimediumpolysaccharide,EPS)的免疫增效作用,将12日龄的未免疫蛋公鸡100只随机分为A、B、C、D、E 5组,每组20只,A组用法氏囊种毒疫苗滴鼻免疫的同时注射生理盐水,而B、C、D组在进行法氏囊种毒疫苗免疫的同时,分别注射APS、EPS和APS-EPS,E组不做任何免疫,只注射生理盐水,于免疫后的第10、20、30、40天分别采血,收集血清,用琼脂扩散实验和ELISA方法测定法氏囊抗体效价。结果显示,APS、EPS与APS-EPS实验组IgG水平均高于对照组,其中APS-EPS组最高。说明APS和EPS均有促进法氏囊疫苗免疫效果作用,而且两者联用效果更佳。