肠杆菌科细菌mcr-1流行病学研究

目的探讨临床常见肠杆菌科细菌携带质粒介导多黏菌素耐药基因(mcr-1)的情况,为医院感染防控提供依据。方法收集2018年1月至2022年3月浙江省台州医院临床分离得到的菌株共1980株,包括大肠埃希菌1400株,肺炎克雷伯菌580株。采用PCR检测mcr-1基因;利用微量肉汤稀释法和E-test法检测抗生素对mcr-1阳性菌株的最低抑菌浓度;采用接合试验检测mcr-1基因在可转移质粒上的位置;通过提取细菌DNA基因组进行全基因组测序,并对测序结果进行多位点序列分型、质粒Inc分型和耐药基因识别等分析。结果在1400株大肠埃希菌中,共检测出6株携带mcr-1,阳性率为0.43%;580株肺炎克雷伯菌,仅1株检出mcr-1,阳性率为0.17%。其中5株菌株接合试验成功。6株大肠埃希菌的ST型分别是ST648、ST95、ST359、ST602、ST453、ST156,肺炎克雷伯菌是ST25。质粒Inc分型结果显示不同菌株携带相同类型质粒,提示该类质粒可以在菌株间水平传播。耐药基因分析发现7株细菌均携带大量的耐药基因,其中1株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时携带mcr-1和碳青霉烯耐药基因。结论mcr-1在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的分离率相对较低,然而考虑到含有mcr-1的质粒在不同细菌之间水平传播的潜力,以及mcr-1与同一质粒内的多个耐药基因整合的能力,在临床环境中要加强对多重耐药菌的管理。

盖尔森基兴诺卡菌致脑脓肿1例

诺卡菌属于需氧革兰阳性杆菌,多通过呼吸道侵入人体引起原发性肺部感染。该菌也可经血行播散致中枢神经系统感染,或从受伤皮肤组织直接侵入形成溃疡、脓肿和多发性瘘管等局部感染[1]。由于诺卡菌感染常缺乏特异性临床表现,且其生长较为缓慢,在临床标本中难以被及时识别。一旦诺卡菌感染中枢神经系统而未能及时诊治,将严重危及患者生命安全,导致不良预后[2]。现我院收治了1例由盖尔森基兴诺卡菌所致的脑脓肿危重症患者,病例经过如下报道。

毗邻颗粒链球菌致亚急性感染性心内膜炎1例

毗邻颗粒链球菌为兼性厌氧、触酶阴性的革兰阳性球菌,是人类口腔、泌尿生殖道和肠道的正常菌群,宿主免疫力低下时可引起各种机会感染[ 1 ]。我们于2018年5月13日从发热患者1例的血培养和骨髓培养中分离出链球菌属1株,经鉴定为毗邻颗粒链球菌,报道如下.

血培养检出婴儿沙门菌1例

从患儿血液中分离出婴儿沙门菌国内尚未见报道。本文报告从一患儿血培养中分离到1株婴儿沙门菌（Salmonella infantis）。

尿路感染病原菌的分布及耐药性分析

目的了解台州地区尿路感染病原菌的分布及耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法选择2010年1月-2011年12月从尿路感染患者的中段尿分离到1 349株病原菌,采用法国生物梅里埃鉴定系统进行细茵鉴定和药物敏感试验。结果 1 349株病原茵中,革兰阴性杆菌占75.7%,其中大肠埃希茵分离率居首位,占49.4%;革兰阳性球菌占16.5%,以粪肠球菌、屎肠球菌为主;真菌占7.8%。药敏试验结果显示,尿路感染病原菌对多种抗菌药物存在不同程度的耐药性,但革兰阴性杆菌对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南较敏感,革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁耐药率最低;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别是46.5%和42.3%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为58.3%。结论尿路感染病原茵以大肠埃希茵为主,多重耐药严重,提示临床医生应根据药敏结果合理使用抗生素,并采取有效措施控制耐药菌株的过快增加和流行。

实验室信息管理系统在临床微生物检验流程质量控制中的应用

目的探讨实验室信息管理系统(LIS)在微生物检验中的应用价值。方法采用实验室信息系统,配备显微镜、摄像系统等硬件设施,设置血培养血量的评估环节,在审核界面可以随时调取临床相关信息,实现微生物检验标本分析前、分析中、分析后等各个环节的检验信息传递及质量控制。结果改变了微生物检验原手工操作流程,自动记录了每份标本全流程各节点的操作时间、操作内容和操作者,提高了检验质量。结论基于LIS,实现了对微生物检验全程质量控制,提高微生物检验的工作质量和效率,为患者提供更加准确快捷的服务。

颅脑外伤合并侧脑室外引流患者脑脊液中利奈唑胺药效学研究

目的:建立利奈唑胺浓度高效液相色谱检测方法,研究其在颅脑外伤合并侧脑室外引流患者脑脊液中的药代动力学特征,为临床抗感染治疗提供参考依据。方法:采用Waters Spherisorb ODS2色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(40∶60),流速1.5 mL·min^-1,柱温25℃,紫外检测波长254 nm,进样量20μL。患者在口服利奈唑胺(600 mg,q 12 h)2 d后,检测给药后脑脊液样本中利奈唑胺的浓度。结果:利奈唑胺在0.05~40.00 mg·L^-1范围内线性关系良好(r=0.9995),用药2 d后2例患者脑脊液中利奈唑胺浓度达标,1例患者脑脊液中利奈唑胺浓度未达标需要调整用药方案。结论:利奈唑胺在颅脑外伤合并侧脑室外引流患者的脑脊液中有较宽泛的治疗范围,建议检测浓度,为临床抗感染治疗提供参考。

医改新政下医院药学实习教学改革的实践及效果

目的:适应新形势的需求,探讨医院药学实习教学改革对学生综合学习能力的影响。方法:将台州医院2010级药学实习生设为对照组,2011级为实验组,对照组采用传统以药房发药为主的带教模式,实验组采用全程以临床药学为核心的教学新模式。通过问卷调查和测试成绩评价教学改革效果。结果:新模式有效调动了学生的学习兴趣和学习主动性,培养了学生综合能力,提升了实习效果。实验组学生的测验平均成绩明显高于对照组(P<0.05)。结论:以临床药学为核心的实习带教模式有助于锻炼医院药学实习生的各项学习能力,适应当前医院药学发展的趋势,值得进一步深入研究和完善。

舒血宁对家兔体内格列吡嗪药动学的影响

目的:研究舒血宁注射液在健康兔和实验性糖尿病兔体内对格列吡嗪代谢的影响。方法:健康新西兰家兔和实验性糖尿病家兔各3只,每只分别口服格列吡嗪5 mg,经3 wk清洗期后,每只家兔均经耳缘静脉注射舒血宁注射液,每天1次,持续3天,第4天口服相同剂量格列吡嗪。取血时间均为给予格列吡嗪前0.5h及给药后0.5、1.5、3、5、7、9、11、24、35 h,经耳缘静脉采血1 mL,用HPLC法得到各时间点格列吡嗪的血药浓度,测得的结果用药动学软件DAS3.16进行曲线拟合,分析比较给予舒血宁前后格列吡嗪药动学参数的变化。结果:格列吡嗪在家兔体内的药动学符合单室模型,健康组家兔单用格列吡嗪时,其平均t1/2、Cmax、AUC分别为3.685±1.273,11453.1±697.1,66949.5±2393.3;加用舒血宁后其平均t1/2、Cmax、AUC分别为3.399±0.956,6055.2±458.4,41635.2±1767.2。糖尿病组家兔单用格列吡嗪,平均t1/2、Cmax、AUC分别为8.958±1.451,5829.1±371.5,58696.2±1899.1;加用舒血宁后其平均t1/2、Cmax、AUC分别为4.998(1.329,4917.3±287.7,20125.3±1238.7。给予舒血宁前后格列吡嗪的t1/2、Cmax、AUC差异均存有统计学意义(P<0.05)。结论:舒血宁对肝药酶450存在诱导作用,对家兔体内格列吡嗪的药动学行为有明显的影响。

无乳链球菌致3月龄以下婴儿血流感染的临床特征及病原学分析

目的了解3月龄以下婴儿无乳链球菌(GBS)血流感染的临床特点,为临床诊治提供科学依据。方法回顾分析性32例血液培养为GBS患儿的临床特点、治疗及转归,并对GBS进行药敏试验和血清学分型。结果按照不同的病原菌分为GBS组、大肠埃希菌组,GBS组患儿出生时母亲胎膜早破、早发型感染发生率均高于大肠埃希菌组(均P<0.05);两组性别分布、孕周、出生体质量、发病时间、羊水Ⅲ污染、宫内窘迫、母亲高龄、母亲围生期感染、母亲产时发热及巨大儿情况差异均无统计学意义(均P>0.05)。GBS组新生儿肺炎发生率高于对照组(P<0.05),两组其他临床表现及并发症发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。两组白细胞计数、C反应蛋白和降钙素原情况差异均无统计学意义(均P>0.05)。GBS对青霉素、氨苄西林、万古霉素均敏感,对红霉素、克林霉素的耐药率分别为28.1%、25.0%。32株GBS血清型以Ⅲ、Ⅰa为主,分别为40.6%、31.3%。29例治愈或好转,1例未愈,2例出院后失访。结论婴幼儿GBS血流感染病情较凶险,对可疑GBS血流感染的婴幼儿应早期使用有效抗生素治疗。应重视孕期GBS筛查,早期防治。

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌OXA基因检测及同源性分析

目的了解台州地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、碳青霉烯酶基因型以及同源性。方法 63株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌经VITEK 2 Compact进行细菌鉴定及药敏分析,用K-B法复核药敏结果,采用多重PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型;采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分析其同源性。结果 63株菌株为多重耐药菌株,除多粘菌素、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦外,对其他常用抗生素的耐药率均在70%以上。63株菌株检测出OXA-51基因60株(95.2%),OXA-23基因58株(92.1%),两个基因同时存在的有58株(92.1%)。PFGE结果显示碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要分为5个克隆型,其中A、B两个为主型。结论产OXA酶是台州地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的主要耐药机制之一,其中OXA-23是主要的基因型。

碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降肠杆菌科细菌耐药基因型研究

目的研究碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降肠杆菌科细菌的耐药情况及产碳青霉烯酶基因型。方法对临床分离到非重复的36株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌,应用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型确证,PCR扩增技术分析产碳青霉烯酶基因型。结果药敏试验显示36株碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌具有对第3,4代头孢菌素、碳青霉烯类、氟喹诺酮类和酶抑制剂复合制剂等多重耐药。36株菌株中有16株改良Hodge试验阳性;PCR结果 10株细菌携带blaKPC,未检出blaIMP、blaVIM、blaGIM、blaSIM、blaNDM-1基因条带。结论产KPC酶是台州医院碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降肠杆菌科细菌的主要耐药机制,其中KPC是主要基因型。

丹参酮联合头孢他啶、哌拉西林钠他唑巴坦对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抗菌作用的研究

目的了解丹参酮联合头孢他啶、哌拉西林钠他唑巴坦的使用对铜绿假单胞菌体外药敏试验的效果,研究丹参酮对多重耐药铜绿假单胞菌临床用药的作用。方法采用倍比稀释法、棋盘法分别测定丹参酮、头孢他啶、哌拉西林钠他唑巴坦的最低抑菌浓度(MIC)及两两联用时的最低抑菌浓度,计算部分抑菌浓度(FIC)指数,用FIC值判断2种药物联用对多重耐药铜绿假单胞菌体外抗菌作用的效果。结果使用丹参酮联合头孢他啶时,FIC<0.5占8.3%,0.5<FIC<1占75.0%,1<FIC<2占16.7%,FIC>2为0%;使用丹参酮联合哌拉西林钠他唑巴坦时,FIC<0.5占4.2%,0.5<FIC<1占58.3%,1<FIC<2占37.5%,FIC>2为0%。结论丹参酮单药对铜绿假单胞菌有明显的体外抑菌作用,丹参酮可增强头孢他啶和哌拉西林钠他唑巴坦对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性。

多药耐药铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统相关毒力基因的检测

目的研究多药耐药铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统相关毒力基因exoS、exoU的携带与耐药性的关系,为合理用药提供依据。方法收集2013年4-12月临床分离的48株多药耐药铜绿假单胞菌,运用VITEK-2Compact分析仪对菌株进行鉴定及药敏试验;运用PCR法对毒力基因exoS、exoU进行检测,对携带exoS(+)/exoU(-)和exoS(-)/exoU(+)两组菌株的耐药率进行χ2检验。结果 48株铜绿假单胞菌呈现多药耐药,其中对头孢他啶、哌拉西林等耐药率较高,分别为79.2%、85.4%;PCR结果显示,携带毒力基因exoS有32株、exoU10株;在TTSS毒力基因型的分布中,以exoS(+)/exoU(-)为主,占66.7%,exoS(-)/exoU(+)占20.8%,exoS(-)/exoU(+)菌株对头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药性均较exoS(+)/exoU(-)菌株高,耐药率差异有统计学意义(P<0.05)。结论多药耐药铜绿假单胞菌毒力基因以exoS为主,但携带毒素基因exoU的菌株所占比例较低,耐药率高。

浙江台州地区使用伊立替康人群UGT1A1基因多态性相关性研究

目的研究浙江台州地区使用伊立替康(CPT-11)人群UGT1A1基因多态性和不良反应的相关性。方法以使用含CPT-11化疗的132例台州地区汉族肿瘤患者为研究对象,取其外周血提取基因组DNA,进行UGT1A1基因多态性检测。结果 132例以CPT-11为基础化疗方案的台州地区肿瘤患者中UGT1A1^*28 TA(6/6)野生型93例(70.45%),TA(6/7)杂合突变型共36例(27.27%),TA(7/7)纯合突变型仅3例(2.27%);UGT1A1^*6G/G野生型共97例(73.48%),G/A杂合突变型共35例(26.52%),未找到A/A纯合突变型。UGT1A1^*28非野生型(6/7+7/7)患者发生腹泻的概率显著高于野生型患者(P=0.040)。而粒细胞减少、血小板减少、血红蛋白减少与UGT1A1^*28基因多态性无显著性差异。迟发性腹泻、粒细胞减少、血小板减少、血红蛋白减少水平与UGT1A1^*6基因多态性无显著性差异。结论浙江台州地区UGT1A1基因突变频率较高,TA(6/6)野生型人群相比TA(6/7)和TA(7/7),CPT-11使用后的腹泻风险增加。建议浙江台州地区肿瘤患者使用CPT-11化疗前进行UGT1A1基因多态性检测,以预测患者对CPT-11的耐受性,保证化疗的顺利进行。

艾迪注射液致中毒性脑病1例

1病例资料 患者,女,81岁,汉族,体质量50 kg,无食品、药品过敏史。2015年7月11日因＂进食哽咽5个月＂入院,心率为每分钟86次,诊断为＂食管恶性肿瘤、2型糖尿病、高血压病＂,糖尿病、高血压史,长期服用二甲双胍片（0.25 g tid po）,瑞格列奈片（1 mg qm po）,复方利血平片（1片qd po）。

产气肠杆菌碳青霉烯酶耐药基因检测和基因分型

目的研究耐碳青霉烯类抗生素产气肠杆菌的耐药情况及产碳青霉烯酶基因型。方法对临床分离的25株碳青霉烯类产气肠杆菌,采用Hodge试验筛选产碳青霉烯酶菌株,PCR扩增分析其基因型,用肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行基因分型。结果药敏试验显示25株产气肠杆菌具有对第三、四代头孢菌素、碳青霉烯类、氟喹诺酮类等多重耐药。其中有16株Hodge试验阳性,PCR结果 8株产气肠杆菌携带blaKPC,未扩出blaIMP、blaVIM、blaGIM、blaSIM基因条带。25株菌株分为18个谱型,其中6株属同一谱型的产气肠杆菌均来源于ICU。结论本次筛检的25株碳青霉烯类耐药的产气肠杆菌主要型别是KPC,是引起其对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,且在ICU局部流行。

肺炎链球菌对大环内酯类的耐药机制研究

目的探讨台州医院肺炎链球菌临床分离株的耐药性及对红霉素的耐药机制,为临床用药提供依据。方法收集临床分离的肺炎链球菌31株,运用K-B纸片法及VITEK细菌鉴定仪检测其对抗菌药物的药敏谱;通过纸片法筛选对大环内酯类抗菌药物(红霉素)的耐药表型,PCR扩增红霉素耐药基因:ermB、mefA,并送测序鉴定。结果 K-B法纸片药敏结果显示,肺炎链球菌临床分离株主要对红霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和四环素耐药,耐药率分别为:100.0%、64.5%、32.2%;未发现有对青霉素、万古霉素及替考拉宁耐药的菌株;31株肺炎链球菌临床分离株耐药表型均为组成型耐药;31株红霉素耐药菌株的基因均为ermB(+)/mefA(+),测序结果正确。结论台州医院肺炎链球菌临床分离株对红霉素耐药率高,erm基因介导的靶修饰作用和mef基因介导的外排泵机制的共同作用,是主要的耐药机制。

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因型研究

目的 研究碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因的携带情况.方法 连续收集2011年1月至2012年4月浙江省台州医院临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌75株.应用Vitek 2 Compact微生物鉴定仪进行细菌鉴定和药敏分析,并通过Hodge试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型.结果 75株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌均为多重耐药菌株,只对阿米卡星保持较高的敏感性,耐药率仅为13.3％ (10/75).其中,69株(92.0％)检测出OXA-23基因,67株(89.3％)检出OXA-51基因,未检出IMP、VIM和SIM酶基因.结论 产OXA酶是本组碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要耐药机制,其中OXA-23和OXA-51是主要基因型.

碳青酶烯类耐药肺炎克雷伯菌耐药基因检测及同源性分析

目的探讨浙江省台州医院分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)的耐药基因分型,并进行同源性分析。方法收集浙江省台州医院2017年1月—2017年11月临床分离非重复的41株CRKP,用VITEK-compact2全自动微生物分析仪进行鉴定及药敏试验,质谱仪VITEK MS和纸片扩散法(K-B法)分别对鉴定、药敏进行复核;采用表型筛选试验对试验菌进行产A、B类碳青霉烯酶筛选;PCR检测耐药基因型;目的产物经基因测序和BLAST网上比对确定其基因型;脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分析41株菌株同源性。结果表型筛选试验提示41株CRKP均产碳青霉烯酶;检出bla KPC、bla IMP、bla NDM基因阳性率分别为95.12%(39/41),4.88%(2/41),2.44%(1/41),未检测到bla SIM、bla SPM、bla VIM、bla GIM基因;测序结果bla KPC、bla NDM、bla IMP基因型别为bla KPC-2、bla NDM-1、bla IMP-4;PFGE结果可分为A^N共14个谱型,以A型41.46%(17/41)、B型21.95%(9/41)、C型9.76%(4/41)为主,A型主要分布于神经外科,B型、C型主要分布于重症医学科。结论浙江省台州医院CRKP耐药基因型以bla KPC-2为主,且存在克隆株传播。医院感染控制部门及临床各科室应引起重视,采取有效措施,控制耐药株的传播。