血清水通道蛋白4抗体测定对视神经脊髓炎的诊断及预后判断价值

目的:探讨血清水通道蛋白4(AQP4)抗体检测对视神经脊髓炎(NMO)诊断及预后判断的临床价值。方法:收集2010年1月至2013年12月在温州医科大学附属第一医院神经内科住院或门诊就诊的48例NMO、33例脊髓炎(TM)[包括26例长节段脊髓炎(LETM)和7例复发性脊髓炎(r LETM)]、30例视神经炎(ON)[包括25例双眼视神经炎(BON)和5例复发性视神经炎(RION)]、52例多发性硬化(MS)及16例其它神经系统疾病(OND)的患者血清及相关临床资料。采用细胞免疫荧光法检测血清AQP4抗体。分析各组患者血清AQP4抗体的阳性率及抗体滴度,比较AQP4抗体阳性NMO患者与AQP4抗体阴性患者的临床特征。通过绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评价AQP4对NMO诊断的敏感性和特异性。应用Kaplan-Meier曲线分析血清AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累计概率。结果:NMO组AQP4抗体阳性率最高(87.50%),其后依次为r LETM组(85.71%)、RION组(80.00%)、LETM组(30.70%)、BON组(8.00%)和MS组(3.85%),OND组抗体检测为阴性。NMO组中血清AQP4抗体阳性患者在性别构成比、确诊为NMO时间及伴有严重神经炎的比例等方面,与抗体阴性患者相比差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线提示血清AQP4抗体对诊断NMO的敏感性为87.5%,特异性为85.4%。KaplanMeier曲线提示AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累积概率明显高于抗体阴性的患者(P<0.05)。结论:血清AQP4抗体检测对诊断NMO具有较高的敏感性及特异性,且有助于NMO预后和转归的判断。

脑梗死患者血管紧张素转换酶基因多态性与脑血流动力学的关系

目的探讨脑梗死患者血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与颅内动脉血流动力学的关系。方法应用聚合酶链反应（PCR）测定146例脑梗死患者ACE基因插入／缺失（D／I）多态性，以经颅多普勒超声（TCD）检测大脑主要动脉血流速度，并与对照组比较。结果观察组ACEDD基因型频率为41％，明显高于对照组的27％（P〈0.01）。观察组ACEDD基因型大脑中动脉（MCA）的平均血流速度（Vm）及脉动指数（PI）明显高于对照组，而观察组DI、II基因型MCA的Vm与对照组比较差异均无统计学意义（均P〉005）。伴MCA狭窄且脑梗死发病年龄〉60岁者的ACEDD基因型频率为0.5，明显高于发病年龄≤60岁者（P〈005）。前者MCA中重度狭窄的ACEDD基因型频率为485％，明显高于同基因型发病年龄≤60岁者的11．1％（P〈0．05）。结论年龄在60岁以上ACEDD基因携带者可能是通过引起脑动脉狭窄性改变而致脑梗死。

血清抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体对多发性硬化的诊断意义

目的探讨血清抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体对多发性硬化(MS)的诊断意义。方法 利用放射免疫方法分别测定23例MS、57例临床孤立综合征(CIS)、41例其他炎症性神经系统疾病(OIND)、37例非炎症性神经系统疾病(ONND)患者的血清抗MOG抗体水平。并对MRI发现中枢神经脱髓鞘患者的病灶负荷进行测定,将其与患者血清中抗MOG抗体水平作相关性分析。通过绘制受试者受试者工作特征(ROC)曲线,比较血清抗MOG抗体水平、脑脊液IgG指数、24h鞘内IgG合成率等参数对MS诊断的敏感性和特异性。结果 MS组患者血清中抗MOG抗体的水平及抗MOG抗体阳性率明显高于CIS组、OIND组和ONND组,差异有统计学意义(P<0.01)。MS组活动期血清抗MOG抗体的水平及阳性率高于缓解期(P<0.05)。中枢脱髓鞘病变(MS和CIS)患者MRI显示的病灶负荷与其血清抗MOG抗体水平呈正相关(P<0.01)。抗MOG抗体的ROC曲线下面积,高于脑脊液IgG指数、24h鞘内IgG合成率。结论血清抗MOG抗体可以成为可靠的诊断MS的生物学指标之一。

视神经脊髓炎及其谱系疾病与多发性硬化的临床特征比较

目的探讨视神经脊髓炎(NMO)及其疾病谱(NMOSD)与多发性硬化(MS)的临床特征。方法比较分析NMO(74例)、NMOSD(84例)、MS(84例)患者的人口学、临床表现、MRI影像学、脑脊液(CSF)及视觉诱发电位(VEP)等资料。结果 (1)NMO患者性别比约1∶6,NMOSD患者性别比约1∶1,MS患者性别比约1∶3。(2)春季是NMO发病高峰期,NMOSD没有显著季节分布特性,MS在春季和冬季为发病高峰期。(3)NMO组和长节段横断性脊髓炎(LETM)组CSF白细胞异常率,与MS组差异无统计学意义(均>0.05)。MS组CSFIgGIndex阳性率明显高于其他两组(均<0.05)。(4)NMO组的VEP异常率高于其他两组(均<0.05)。(5)首次以RION起病的患者进展到NMO的累积概率高于首次发病以LETM和双侧视神经炎(BON)的患者(<0.05)。结论NMO及NMOSD与MS在性别、发病季节上有不同特征。CSF IgG Index是诊断MS的有效检查,VEP可作为NMO较敏感的诊断工具,RION在NMOSD各组中具有较高进展为NMO的风险。

多发性硬化患者血清维生素D水平变化及与临床相关性研究

目的观察多发性硬化(MS)患者体内维生素D水平,探讨维生素D水平与MS临床表型的关系。方法收集MS患者72例,包括复发缓解型MS(RRMS)62例、继发进展型MS(SPMS)7例及原发进展型MS(PPMS)3例;视神经脊髓炎(NMO)患者24例;以32名健康体检者为健康对照组(NC组)。采用电化学发光法对血清25-羟维生素D_3[25-hydroxyvitamin D_3,25(OH)D_3]进行检测,所有MS患者在留取血标本的同时进行扩展残疾状态量表(EDSS)评分,对其中15例急性复发期RRMS患者在缓解期再次行血清25(OH)D_3检测和EDSS评分。结果 MS组、NC组及NMO组间血清25(OH)D_3水平比较差异有统计学意义(F=10.55,P<0.01),MS组及NMO组均低于NC组(分别P<0.01,P<0.05),但MS组与NMO组相比差异无统计学意义(P>0.05);SPMS患者血清25(OH)D_3水平低于NC组(P<0.01),但与RRMS患者比较无统计学差异(P>0.05);RRMS患者血清25(OH)D_3水平缓解期高于急性复发期(t=2.92,P<0.05),但仍低于NC组(P<0.01)。结论 MS及NMO患者体内维生素D不足,且维生素D不足贯穿于MS的不同病程阶段,RRMS患者急性复发期维生素D不足更为明显。

脂肪源性干细胞对多发性硬化患者Th17的免疫调控作用

目的:探讨人脂肪源性干细胞(h ASCs)对多发性硬化(MS)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)的免疫调控作用机制。方法:分离、纯化脂肪组织中的h ASCs。采用密度梯度离心法分离MS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选CD4+T细胞,体外刺激细胞向Th17极化,并加入不同比例的h ASCs(h ASCs∶CD4+T为1∶4和1∶10)共培养4 d,设立添加anti-LIF抗体组;流式细胞术检测共培养后Th17细胞占CD4+T细胞的比例,real-time PCR检测白细胞介素6受体(IL-6R)、白细胞介素23受体(IL-23R)、白血病抑制因子受体(LIFR)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)及白血病抑制因子(LIF)的mRNA水平变化;ELISA法检测共培养体系上清液中LIF的水平。结果:分离的h ASCs经流式细胞术鉴定可基本判定为h ASCs;PBMCs经磁珠法分选后获得90%以上纯度的CD4+T细胞。共培养后,1∶4组和1∶10组中Th17细胞所占比例下降,且存在高浓度抑制效应;共培养后RORγt、IL-6R和IL-23R的mRNA表达水平下降,LIFR和LIF的mRNA表达水平均升高;加入anti-LIF抗体后,Th17细胞比例回升至对照组水平;RORγt和IL-6R的mRNA表达水平回升;ELISA检测各组LIF的水平,共培养组LIF分泌均较对照组明显增多,加入anti-LIF抗体后明显减少。结论:h ASCs可抑制MS患者Th17细胞的分化,其作用可能与其分泌LIF、通过IL-6/LIF轴竞争性抑制有关。

光学相干断层扫描仪在多发性硬化患者中的初步应用

目的利用光学相干断层扫描仪(OCT)评估多发性硬化(MS)患者与正常人眼视网膜神经纤维层(RNFL)厚度和黄斑中心凹厚度及体积的差异,评估OCT监测MS患者病程中轴突缺失的意义。方法选取MS患者30例(60眼),根据有无视神经炎(ON)发作史分为MS-ON组(41眼)和MS-NON组(19眼),同时选择年龄和性别相匹配的健康体检者30例(60眼)为对照组。对3组受试者均进行详细的眼科检查,并使用OCT测定RNFL厚度和黄斑参数。采用单因素方差分析对3组的RNFL厚度、黄斑中心凹厚度和体积的差异进行分析。结果两组MS患者的RNFL厚度和黄斑参数与对照组均有统计学差异,MS-ON组和MS-NON组之间的RNFL厚度和黄斑参数也有差异(均P<0 05)。结论 OCT可作为MS诊断的辅助检查手段。

抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体放射免疫测定方法的建立

目的 建立以125I -抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）一硫氧还融合蛋白（MOG融合蛋白）介导的放射免疫分析技术（RIA）作为测定实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠血清抗MOG抗体的新方法.方法 Na125I标记MOG融合蛋白,以MOG融合蛋白免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,将125I -MOG融合蛋白与小鼠血清标本结合,孵育后与兔抗鼠IgG结合,收集沉淀,用γ放射性检测仪测定抗MOG抗体水平.结果 成功制备纯度较高的125I-MOG融合蛋白,当实验条件为Na125I 投料量1mCi,MOG融合蛋白量60μg时,获得较好的标记率48.3631%,最高的比放射性320 043.7 Bq/μg.应用新型放射免疫法测定小鼠血清抗MOG抗体,MOG组血清抗MOG抗体水平与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 成功建立了一种较为敏感的测定血清抗MOG抗体的放射免疫方法.

应用MOG—TrxA建立小鼠EAE动物模型的新方法

目的探索利用基因工程生产的少突胶质细胞糖蛋白-硫氧还融合蛋白（MOG—TrxA）免疫C57BL／6（H-2b）小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）动物模型的方法。方法利用实验室已经重组成功的携带pET32（a）-MOG—TrxA质粒的大肠杆菌BL21和携带pET32（a）-TrxA质粒的空载大肠杆菌BL21分别诱导大量表达MOG—TrxA和TrxA，并利用蛋白金属螯合亲和层析纯化，超滤法浓缩除盐，Bradford法蛋白定量，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。利用制备的MOG—TrxA抗原免疫C57BL／6（H-2b）小鼠诱导EAE动物模型，以TrxA免疫动物作为对照组，以脊髓匀浆（SCH）免疫动物作为阳性对照组，以临床评分、体重变化、HE染色和Kluver—Barrera髓鞘染色评分等指标，评价模型的质量。结果MOG—TrxA组动物在临床评分、HE染色病理评分和Kluver—Barrera髓鞘染色病理评分等指标与TrxA组相比明显增高，体重明显下降，数据差异均有统计学意义（均P〈0．01），与SCH组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论利用基因工程制备的MOG—TrxA免疫C57BL／6（H-2b）小鼠能成功建立慢性非缓僻型EAE动物模型。

缺血性脑卒中合并糖尿病肾病患者预后影响因素分析

目的探讨缺血性脑卒中(CIS)合并糖尿病肾病患者预后的影响因素。方法对527例初发CIS合并糖尿病肾病患者进行研究,以CIS复发或因病死亡为研究终点,分为预后不良组(达到终点事件者)58例和预后良好组(未达到终点事件者)469例,比较两组患者临床特征的差异,采用logistic回归分析法探讨预后的影响因素。结果两组患者年龄、入院改良Rankin评分(m RS)、美国国立卫生研究院卒中评分(NIHSS)、日常生活能力量表(ADL)、糖化血红蛋白、血肌酐、尿蛋白/肌酐比比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。logistic回归分析显示,入院m RS、NIHSS、ADL、尿蛋白/肌酐比、血肌酐和糖化血红蛋白为CIS合并糖尿病肾病患者预后的影响因素(均P<0.05)。结论入院mRS、NIHSS、ADL、尿蛋白/肌酐比、血肌酐和糖化血红蛋白为CIS合并糖尿病肾病患者预后的影响因素。

急性期TF、TFPI与糖尿病并发脑梗死患者短期预后的关系

目的 探讨组织因子（TF）、组织因子途径抑制物（TFPI）在糖尿病并发脑梗死急性期的变化及其与短期预后的关系。方法 选择2012年8月~2014年1月浙江省4家医院682例糖尿病并发脑梗死患者为研究对象,研究终点事件定义为患者出院评分NIHSS≥5或住院期间死亡。采用非条件Logistic回归分析探讨TF、TFPI与糖尿病并发脑梗死患者短期预后的关系。结果 两组男性比例、年龄≥65岁比例、脑梗死分型、入院NIHSS评分和住院时间比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;预后不良组TF、TFPI和TF/TFPI〉1比例均显著高于预后良好组,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;调整性别、年龄、脑梗死分型、入院NIHSS评分和住院时间后,TF/TFPI〉1组发生终点事件的危险性是TF/TFPI≤1组的1.785倍（P〈0.05）。结论 糖尿病并发脑梗死患者急性期TF/TFPI是其预后不良的独立危险因素。

大剂量阿托伐他汀对急性脑梗死经静脉重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓效果的影响

目的探讨大剂量阿托伐他汀对急性脑梗死经静脉重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓效果的影响。方法 130例4.5h内接受静脉溶栓治疗的急性脑梗死患者中,40例rt-PA静脉溶栓联合阿托伐他汀治疗(观察组),90例仅rt-PA静脉溶栓治疗(对照组)。比较两组患者静脉溶栓的安全性及90d预后,分析影响急性脑梗死溶栓预后的因素。结果两组患者性别、年龄、吸烟、饮酒、溶栓前美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、脑卒中史以及患有糖尿病、高血压、动脉粥样硬化、心房颤动的比例等方面比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组第90天溶栓预后良好率(70.0%)明显高于对照组(45.6%),差异有统计学意义(P<0.05)。二元logistic回归分析显示溶栓前NIHSS评分(OR=0.68,95%CI:0.581~0.796)是急性脑梗死患者静脉溶栓预后的危险因素,溶栓时联合使用大剂量阿托伐他汀(OR=2.848,95%CI:1.072~7.564)是急性脑梗死患者静脉溶栓预后的保护因素。结论在急性脑梗死患者静脉溶栓时应用大剂量阿托伐他汀可以改善患者预后。

辛伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎和多发性硬化单个核细胞增殖的影响

目的 研究他汀类药物对致敏实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）模型及多发性硬化（MS）患者单个核细胞增殖的影响,以及与人重组干扰素β1a（INFβ-1a）的协同作用.方法 （1）建立EAE模型,取其脾脏制成单个核细胞悬液,分别予ConA、LPS及MOG刺激,同时予不同浓度辛伐他汀、INFβ-1a进行干预,3H-TdR掺入法检测辛伐他汀对单个核细胞增殖的影响及两者协同作用.（2）根据McDonald（2005年）诊断标准,收集确诊为MS的患者15例,要求在近期均未行特殊免疫治疗,分离外周血单个核细胞,同上进行药物干预及检测.结果 （1）辛伐他汀以剂量依赖的方式抑制了致敏EAE小鼠脾单个核细胞的增殖;常规剂量的辛伐他汀对致敏EAE小鼠脾单个核细胞增殖有明显抑制作用,低剂量的两药联用对经ConA、MOG致敏的EAE小鼠脾单个核细胞抑制增殖作用增强,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）.（2）辛伐他汀以剂量依赖的方式抑制了致敏MS患者外周血单个核细胞的增殖;常规剂量的辛伐他汀对致敏MS患者外周血单个核细胞增殖均有明显抑制作用,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）;低剂量的辛伐他汀与不同剂量INFβ-1a联用具协同作用.结论 他汀类药物是有效的免疫调节剂,不仅调节异常的细胞免疫及体液免疫,还可协同INFβ-1a抑制致敏的单个核细胞增殖.

多发性硬化Poser标准与McDonald标准的比较

目的 比较分析Poser标准与McDonald标准在多发性硬化（MS）患者诊断应用中的差异. 方法将Poser标准与McDonald标准回顾性应用于154例临床表现提示为MS的患者,分别进行诊断分类.结果 111例患者根据Poser诊断标准分类,临床确诊52例,实验室确诊17例,临床可能42例.另外有43例不能满足Poser标准中的任意一项,包括3例原发进展型MS（PPMS）和40例单个部位发作的临床孤立综合征（CIS）.154例根据McDonald诊断标准分类,确诊MS 57例,可能MS 97例,其中临床确诊PPMS 3例,可能PPMS 4例.两种诊断标准阳性率差异有统计学意义（X2=52.858,P〈0.01）,但两者仍然有较高的一致性（Kappa=0.674）.被两种诊断标准同时确诊为MS有52例,被两种诊断标准同时诊断为可能MS有54例,符合率为95.5%.结论 McDonald标准对于PPMS和单个部位发作的CIS诊断较Poser标准有明显优势,Poser标准诊断阳性率较McDonald标准高,但两种标准仍有很高的符合率.

疫情期间急性缺血性脑卒中患者救治流程的改造及实践

为应对新型冠状病毒肺炎疫情期间急性缺血性脑卒中患者的救治,我院卒中急救团队通过调整团队内部结构、预设临时卒中单元、改造急救流程、强化流程中的防控管理等举措,顺利实施急性缺血性脑卒中患者的救治。本文报告了本次流程改造的实践过程,以期为疫情期间相关诊疗流程改造工作及今后卒中急救团队应对此类突发公共卫生事件提供参考与借鉴。

成人型神经元核内包涵体病一例并文献复习

分析1例成人型神经元核内包涵体病（NIID）患者的临床、影像学及皮肤病理学特征，探讨成人型NIID的临床、病理特点及诊断方法。患者为61岁女性，临床表现为进行性认知功能减退、发作性意识障碍、卒中样发作、发作性消化道症状；头颅磁共振弥散加权像显示皮髓交界绸带样分布高信号，持续存在。皮肤活体组织检查（活检）病理发现脂肪细胞、纤维细胞及汗腺细胞核内嗜酸性核内包涵体。该病例提示成人型NIID是具有高度临床异质性的慢性神经变性病，头颅MRI弥散像皮质下绸带征及皮肤活检示核内嗜酸性包涵体有助于诊断。

血清白球蛋白比值在评估重症肌无力患者病情严重程度及预后中的价值

目的探讨重症肌无力患者血清白球蛋白比值（AGR）水平对其病情严重程度及预后的评估价值。方法选取温州医科大学附属第一医院2009年2月1日至2015年3月31日收治的135例重症肌无力（MG）患者为研究对象，将患者住院第1天检测所得的血清AGR水平从低到高平均分为3个等级，T1（AGR〈1．34）、T2（1．34≤AGR≤1．53）、T3（AGR〉1．53）。将出院定为结局事件，应用Kaplan-Meier曲线分析3组重症肌无力患者出院的累积概率，Log-rank检验评价组间差异。采用单因素及多因素Cox比例风险回归模型分析影响出院有关因素。对住院期间发生肌无力危象的相关因素进行多因素Logistic回归分析。结果3组中位住院天数分别是T1：25（13．0-38．3）d，T2：18（13．0～26．0）d，T3：15（11．0～20．5）d，Log-rank分析3组间差异有统计学意义（P〈0．001）。单因素Cox分析显示：白蛋白水平、血清肌酐、临床MGFA分型和AGR与患者病情严重程度及预后有关；多因素Cox分析显示：AGR、临床MGFA分型为重症肌无力患者的独立病情严重程度及预后的评估因素（P〈0．001），其相应的HR值分别是4．655（95％CI：2．355-9．202），0．596（95％CI：0．492-0．723）。住院期间发生肌无力危象与AGR、临床MGFA分型相关。结论血清白球蛋白比值可能是评估重症肌无力患者病情严重程度及预后的简单有效指标。