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快速康复外科理念在老年急腹症中的应用 被引量:35
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作者 厉周 邓敏峰 +4 位作者 方素珍 蔡寨 韩帅 朱卉娟 邓俊雄 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期398-401,共4页
目的:评价快速康复外科(FTS)理念在老年急腹症患者中应用的效果。方法:采用回顾性研究方法,以我科实施FTS后收治的老年急腹症患者47例为FTS组,实施FTS前两年收治行传统方法的老年急腹症患者50例为对照组。对比两组患者术后进食时间、下... 目的:评价快速康复外科(FTS)理念在老年急腹症患者中应用的效果。方法:采用回顾性研究方法,以我科实施FTS后收治的老年急腹症患者47例为FTS组,实施FTS前两年收治行传统方法的老年急腹症患者50例为对照组。对比两组患者术后进食时间、下床活动时间、腹胀发生率、住院费用、术后住院时间以及并发症(尿路感染、肺部感染、切口感染、下肢静脉血栓形成)等方面的差异。结果:FTS组患者与对照组患者在住院总费用、术后住院时间、术后进食时间、下床活动时间、并发症发生率方面存在显著差异(P<0.05),但两组患者术后腹胀发生率无显著差异(P>0.05)。结论:将FTS理念贯穿于老年急腹症患者的治疗,可促进术后康复,减少并发症及住院费用,缩短住院时间,值得推广。 展开更多
关键词 急腹症 快速康复外科 老年 护理
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利用Agilent定制基因芯片筛选相同病理类型、不同预后的早期乳腺癌的分子标记物 被引量:3
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作者 厉周 彭亮 +7 位作者 韩帅 黄宗海 史福军 蔡寨 李秀勤 张普生 朱卉娟 金维荣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1483-1488,共6页
目的分析相同病理类型、临床分期(I~Ⅱ期)但预后不同的乳腺癌组织的基因表达差异,筛选出有意义的基因组合,寻找与乳腺癌预后相关的基因,探索可以早期预测乳腺癌预后的基因分型诊断标准。方法用Agilent定制人8×15000芯片对筛... 目的分析相同病理类型、临床分期(I~Ⅱ期)但预后不同的乳腺癌组织的基因表达差异,筛选出有意义的基因组合,寻找与乳腺癌预后相关的基因,探索可以早期预测乳腺癌预后的基因分型诊断标准。方法用Agilent定制人8×15000芯片对筛选出的实验组8例早期乳腺癌患者的组织标本,结合其预后数据,进行差异基因表达分析;采用Real.timePCR技术,在同期收集的验证组42例乳腺癌样本中对差异表达的基因进行验证。结果基因芯片检测分析发现,实验组预后差样本比预后好样本有差异表达基因132个,其中44条基因显著上调,88条基因显著下调(差异均在2倍以上)。结论相同病理类型、临床分期、不同预后的早期乳腺癌组织中基因表达存在显著差异,CD44、MK167、NTRK2、Nek2、C160rf60、TOP2A、ANCCA、RRM2等8个基因可以作为早期乳腺癌预后预测基因标记物。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 芯片分析技术 分子分型
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聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸抑制结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 被引量:3
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作者 厉周 黄宗海 +5 位作者 崔大祥 姚航 俞金龙 李强 潘碧峰 高峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1935-1938,共4页
目的探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-A... 目的探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-ASODN混合得到载反义基因转染复合物。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果PAMAM-survivin-ASODN复合物的粒径小于脂质体-survivinASODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-ASODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组无显著差异。PAMAM对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。结论PAMAM能将survivin-ASODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长。 展开更多
关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物 结直肠癌 反义寡核苷酸 SURVIVIN
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数码相机在外科医疗、教学及科研中的应用 被引量:9
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作者 厉周 方素珍 +3 位作者 何井华 祝火胜 黄宗海 吴爱国 《中国医学教育技术》 2003年第1期60-62,共3页
文章分析了数码相机和外科教学的特点,指出数码相机在外科教学中具有灵活、经济、简便的优点,同时介绍了应用方法和技巧.
关键词 数码相机 外科医疗 科研 应用 医学教育
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快速康复外科在以结肠为替代器官手术中的应用 被引量:3
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作者 厉周 蔡寨 +6 位作者 付月 方素珍 韩帅 黄宗海 刘春晓 何援莉 朱卉娟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期24-26,共3页
目的:探讨快速康复外科(FTS)在以结肠为替代器官手术患者围手术期应用的临床效果。方法:随机选取珠江医院2008年1月至2010年12月以结肠为替代器官手术(其中结肠代膀胱59例,结肠代阴道23例)患者82例,分为传统治疗组42例(其中结肠代膀胱30... 目的:探讨快速康复外科(FTS)在以结肠为替代器官手术患者围手术期应用的临床效果。方法:随机选取珠江医院2008年1月至2010年12月以结肠为替代器官手术(其中结肠代膀胱59例,结肠代阴道23例)患者82例,分为传统治疗组42例(其中结肠代膀胱30例,结肠代阴道12例)和FTS组40例(其中结肠代膀胱29例,结肠代阴道11例),比较两组患者术后首次排气时间、手术并发症(咽喉疼痛、急性胃扩张、肺部感染、吻合口瘘等)发生率、住院时间及住院费用。结果:两组患者均痊愈出院,FTS组术后患者住院时间、住院费用及首次肛门排气时间较传统治疗组缩短,住院费用较传统治疗组降低,咽痛明显减少(P<0.05),但两组患者急性胃扩张、肺部感染、吻合口瘘发生率差异无统计学意义。结论:FTS可有效促进结肠替代手术患者术后康复,减轻患者痛苦,缩短住院时间,降低住院费用且不会增加手术并发症的发生率,有较大的临床应用价值。 展开更多
关键词 结肠 快速康复外科 结肠替代手术 结肠代膀胱 结肠代阴道
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聚酰胺纳米分子介导survivin反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞凋亡(英文) 被引量:2
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作者 厉周 黄宗海 +3 位作者 姚航 俞金龙 李强 崔大祥 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第42期8253-8257,共5页
背景:传统的病毒载体及非病毒载体在基因治疗中均存在明显的缺点,采用纳米材料作为反义寡核苷酸载体有望获得更好更安全的基因转导,提高基因治疗的有效性和安全性。实验拟采用聚酰胺纳米分子介导反义寡核苷酸阻断survivin表达,诱导大肠... 背景:传统的病毒载体及非病毒载体在基因治疗中均存在明显的缺点,采用纳米材料作为反义寡核苷酸载体有望获得更好更安全的基因转导,提高基因治疗的有效性和安全性。实验拟采用聚酰胺纳米分子介导反义寡核苷酸阻断survivin表达,诱导大肠癌凋亡。目的:探讨聚酰胺树形分子高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligonucleotide,survivin-asODN)转染结直肠癌SW620细胞的可行性以及对结直肠癌SW620细胞survivin表达、细胞凋亡的影响。设计、时间及地点:肿瘤基因治疗体外实验,于2007-09/2008-05在上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米工程研究室及南方医科大学珠江医院中心实验室完成。材料:人结直肠癌细胞株SW620购自中国科学院上海细胞研究所,聚酰胺树形分子由上海交通大学微纳米研究院生物纳米工程研究室崔大祥教授提供,转染试剂脂质体LipofectamineTM2000购自美国Invitrogen公司。survivin-asODN由上海生工公司合成。方法:采用300μg/L survivin-asODN和4.06μg/L聚酰胺制备聚酰胺反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的的包封率、载药率和体外DNA释放速度。将上述两种基因转染复合物转染结直肠癌细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测两组细胞的凋亡率。主要观察指标:阳离子脂质体-survivin-asODN复合物及聚酰胺-survivin-asODN复合物的粒经,zeta电位,基因载药率,包封率,释放率,转染后survivin表达率及对凋亡的诱导率。结果:聚酰胺-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径(P<0.01),但zeta电位高于后者(P<0.05);基因载药率、包封率两组差异无显著性意义;聚酰胺对DNA持续释放14d,但脂质体只持续5d。聚酰胺-survivin-asODN转染结直肠癌细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05)。转染后结直肠癌细胞survivin蛋白的表达低于脂质体复合物(P<0.05),细胞的凋亡率高于脂质体复合物(P<0.05)。结论:聚酰胺能将survivin-asODN高效递送到结直肠癌SW620细胞,降低survivin蛋白表达并诱导结直肠癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 聚酰胺树形分子高聚合物 反义寡核苷酸 结直肠癌 Survivin 凋亡
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七年制、五年制临床医学专业外科学教学中英语授课的实践与分析 被引量:7
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作者 厉周 方素珍 +4 位作者 何井华 黄宗海 胡冬武 杨继振 申屠胜芳 《中国高等医学教育》 2002年第2期42-43,共2页
选取外科总论和各专科中的部分内容 ,在临床医学专业中采用英语授课。在教学中 ,认真选拔优秀教师 ,注重教学方法的改革和教学互动。实践结果表明 ,教学实验班医学英语听力、口语、阅读和写作能力均明显高于非教学实验班。
关键词 七年制 五年制 外科学教学 英语授课 临床医学专业 医学英语 教学语言 教学改革 教学方法 教学互动
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创伤性休克救治的循证医学研究 被引量:3
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作者 厉周 黄宗海 《创伤外科杂志》 2004年第1期70-71,共2页
循证医学的核心是追踪当前最好的外在证据以回答临床期待解决的问题。创伤性休克的治疗已经历了上百年的研究和实践 ,并应用于临床救治 ,但其中仍存在一些误区和争论。
关键词 循证医学 创伤性休克
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肿瘤TK基因治疗研究进展 被引量:4
9
作者 厉周 《国外医学(肿瘤学分册)》 北大核心 1996年第5期271-275,共5页
TK基因转导肿瘤细胞辅以药物进行抗肿瘤治疗是肿瘤治疗研究中较为活跃的领域,目前已应用于脑、肺、肝、胃、大肠、乳腺肿瘤及黑色素瘤、淋巴肉瘤等研究,并从细胞、动物水平逐渐过渡到临床。本文从目的基因、转导途径、药物前体、旁观者... TK基因转导肿瘤细胞辅以药物进行抗肿瘤治疗是肿瘤治疗研究中较为活跃的领域,目前已应用于脑、肺、肝、胃、大肠、乳腺肿瘤及黑色素瘤、淋巴肉瘤等研究,并从细胞、动物水平逐渐过渡到临床。本文从目的基因、转导途径、药物前体、旁观者效应及应用现状几个方面进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 胸腺嘧啶 核苷激酶 基因治疗
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在外科教学中使用英语授课的实践 被引量:1
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作者 厉周 方素珍 《医学教育探索》 2003年第4期65-66,共2页
在医学专业不同层次学生的外科学教学中进行外语教学,是提高医务人员英语水平和应用能力的有效方法。本文从教学设计、教学准备和教学实施等方面入手,总结了外科学英语授课的经验和体会。
关键词 医学教育 外科学 教学方法
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聚酰胺树形分子-脂质体介导survivin反义寡核苷酸诱导肝癌细胞的凋亡
11
作者 厉周 方素珍 +5 位作者 韩帅 崔大祥 李强 蔡寨 朱卉娟 黄宗海 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期408-413,共6页
目的:评价聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)-脂质体复合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligonucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性,及其对人肝癌SMMC-7721细胞survivin表达、细胞凋亡的影... 目的:评价聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)-脂质体复合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligonucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性,及其对人肝癌SMMC-7721细胞survivin表达、细胞凋亡的影响。方法:制备PAMAM与脂质体的复合物(PAMAM-脂质体),将survivin-asODN与PAMAM-脂质体或PAMAM混合,分别制备PAMAM-脂质体-survivin-asODN和PAMAM-survivin-asODN。透射电镜观察复合物的形态、粒径;zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位;离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率。将PAMAM-脂质体-survivin-asODN和PAM-AM-survivin-asODN转染SMMC-7721细胞,测定其转染率;Western blotting检测转染后SMMC-7721细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测SMMC-7721细胞的凋亡。结果:成功制备PAMAM-脂质体、PAMAM-脂质体-survivin-asODN和PAMAM-survivin-asODN。PAMAM-脂质体-survivin-asODN粒径与PAMAM-survivin-asODN粒径无显著差异[(189.33±15.42)vs(181.83±13.67)nm,P>0.05],包封率和载药率也无显著差异(P>0.05),但zeta电位高于后者[(42.83±7.14)vs(32.33±5.57)mV,P<0.05],PAMAM-脂质体-survivin-asODN转染SMMC-7721细胞的效率高于PAMAM-survivin-asODN[(73.33±9.29)%vs(60.67±7.81)%,P<0.05],转染后SMMC-7721细胞中survivin蛋白的表达较低(24.67±11.74 vs43.17±11.63,P<0.05),但细胞凋亡率高于PAMAM-survivin-asODN组SMMC-7721细胞[(73.31±12.59)%vs(52.67±12.19)%,P<0.05]。结论:PAMAM-脂质体能将survivin-asODN高效递送到人肝癌SMMC-7721细胞,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物-脂质体 反义寡核苷酸 肝癌 SURVIVIN
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聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长的作用
12
作者 厉周 方素珍 +5 位作者 韩帅 崔大祥 蔡寨 李强 朱卉娟 黄宗海 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第12期2175-2179,共5页
背景:采用反义寡核苷酸等治疗方法可以抑制凋亡抑制因子Survivin的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。目前使用Survivin治疗恶性肿瘤仍存在基因载体转染效率低下、不能长期稳定表达、易被酶降解等难题。目的:观察聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(po... 背景:采用反义寡核苷酸等治疗方法可以抑制凋亡抑制因子Survivin的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。目前使用Survivin治疗恶性肿瘤仍存在基因载体转染效率低下、不能长期稳定表达、易被酶降解等难题。目的:观察聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)脂质体介导Survivin-反义寡核苷酸对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM脂质体和PAMAM分别与Survivin-反义寡核苷酸混合得到载反义基因转染复合物。测定复合物的zeta电位及包封率。将两种载基因复合物注射道裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小,检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果与结论:PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物的zeta电位高于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物(P<0.05),基因包封率两组比较差异无显著性意义(P>0.05)。PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物治疗组裸鼠移植瘤质量及survivin蛋白表达低于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物组(P<0.05)。提示PAMAM脂质体能将Survivin-反义寡核苷酸高效递送到人肝癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,诱导移植瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物 脂质体 肝癌 反义寡核苷酸 SURVIVIN
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胃癌的基因治疗研究现状
13
作者 厉周 黄宗海 杨继震 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 1997年第3期189-191,共3页
胃癌的基因治疗研究现状厉周黄宗海杨继震胃癌占我国恶性肿瘤发病率和死亡率的首位,每年确诊为胃癌的病人为17万例,而在全世界则为68万例,是严重威胁人类健康和生命的疾病之一。早期手术仍为胃癌首选的治疗方法,近年化疗药物的... 胃癌的基因治疗研究现状厉周黄宗海杨继震胃癌占我国恶性肿瘤发病率和死亡率的首位,每年确诊为胃癌的病人为17万例,而在全世界则为68万例,是严重威胁人类健康和生命的疾病之一。早期手术仍为胃癌首选的治疗方法,近年化疗药物的发展及正规化疗方案的实施已使胃癌的... 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因治疗
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逆转录病毒载体介导的TK基因转导治疗大肠癌的实验研究
14
作者 厉周 黄宗海 +1 位作者 杨继震 文金序 《岭南现代临床外科》 1997年第3期183-183,共1页
现代分子生物学的发展和肿瘤病因研究的深入,使基因治疗成为研究热点。近三十年来,虽然人们对大肠癌的治疗进行了多方面的探索和努力,但传统的手术、放疗和化疗等治疗方法均未使大肠癌的五年生存率有明显改善,本实验探讨了基因治疗在大... 现代分子生物学的发展和肿瘤病因研究的深入,使基因治疗成为研究热点。近三十年来,虽然人们对大肠癌的治疗进行了多方面的探索和努力,但传统的手术、放疗和化疗等治疗方法均未使大肠癌的五年生存率有明显改善,本实验探讨了基因治疗在大肠癌治疗中的价值。观察逆转录病毒载体对大肠癌细胞的基因转导及表达能力;TK基因转导对大肠癌细胞生物学特征的影;以及ACV对转导细胞杀伤能力; 展开更多
关键词 大肠癌 TK基因 逆转录病毒 载体介导 基因治疗 实验研 基因转导 病毒载体 细胞生物学特征 胸腺嘧啶核苷激酶基因
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左乳囊状水瘤1例
15
作者 厉周 方素珍 《医师进修杂志》 北大核心 2003年第10期39-39,共1页
关键词 左乳囊状水瘤 彩色B超 诊断 临床表现 治疗 外科手术
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腹腔内遗留大纱条致术后大网膜囊肿1例
16
作者 厉周 方素珍 《医师进修杂志(外科版)》 北大核心 2004年第6期11-11,共1页
关键词 腹腔内大纱条遗留 术后并发症 大网膜囊肿 腹部手术 胆囊切除术
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乳腺癌的基因治疗研究现状
17
作者 厉周 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 1998年第5期316-318,共3页
乳腺癌是常见恶性肿瘤,约占全身恶性肿瘤的7%~10%,全世界每年新发乳腺癌约150万例,死亡57万例,其发病率目前有增高趋势,将超过宫颈癌,居女性恶性肿瘤的首位。由于女性乳房淋巴管网、回流静脉之间吻合丰富,回流途径多... 乳腺癌是常见恶性肿瘤,约占全身恶性肿瘤的7%~10%,全世界每年新发乳腺癌约150万例,死亡57万例,其发病率目前有增高趋势,将超过宫颈癌,居女性恶性肿瘤的首位。由于女性乳房淋巴管网、回流静脉之间吻合丰富,回流途径多,乳腺癌早期可经淋巴途径或直接进入... 展开更多
关键词 乳腺癌 基因疗法 抑癌基因 免疫基因治疗
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肝癌的基因治疗研究现状
18
作者 厉周 《肝胆外科杂志》 1997年第1期56-59,共4页
关键词 肝癌 基因治疗
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创伤性休克大鼠血浆内皮素与组织氧分压变化的实验研究 被引量:13
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作者 孙英刚 黄宗海 +3 位作者 厉周 雷洪伊 林洪武 孙高斌 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期679-681,共3页
观察创伤性休克过程中血浆内皮素与组织氧分压的动态变化 ,探讨内皮素在创伤性休克过程中的意义。采用后肢创伤法建立创伤性休克大鼠模型 ,观察创伤前后血浆内皮素、动脉血气分析及骨骼肌、肝脏、小肠的组织氧分压的动态变化 ,监测血流... 观察创伤性休克过程中血浆内皮素与组织氧分压的动态变化 ,探讨内皮素在创伤性休克过程中的意义。采用后肢创伤法建立创伤性休克大鼠模型 ,观察创伤前后血浆内皮素、动脉血气分析及骨骼肌、肝脏、小肠的组织氧分压的动态变化 ,监测血流动力学变化并记录存活时间。结果显示 ,创伤休克后血浆内皮素浓度迅速升高 ,显著高于伤前水平 ,复苏 7h浓度达到伤前水平的 2 5倍左右 ;休克后动脉血气各项指标及组织氧分压较创伤前有显著性差异 ,休克后出现失代偿性酸中毒 ,肝脏及小肠的氧分压变化较骨骼肌更为显著。提示创伤性休克后血浆内皮素显著升高 ,在早期对于维持血压有重要意义 ,但在休克后期可能是造成死亡的重要原因 ;内脏器官氧分压的不可逆性降低 ,可能是休克后期不易复苏的关键因素。 展开更多
关键词 休克 创伤性 内皮缩血管肽类 氧分压
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腺病毒介导的双自杀基因系统对乳腺癌细胞的杀伤作用 被引量:11
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作者 孔恒 黄宗海 +3 位作者 李强 杨六成 俞金龙 厉周 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期907-910,共4页
目的探讨腺病毒介导胞嘧啶脱氨酶(CD)和胸苷激酶(TK)融合双自杀基因系统对乳腺癌治疗作用。方法用重组VEGFP-CD/TK-GFP基因的腺病毒体外感染表达VEGF的乳腺癌MCF-7细胞和对照组不表达VEGF的乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察其感染效率,以RT-... 目的探讨腺病毒介导胞嘧啶脱氨酶(CD)和胸苷激酶(TK)融合双自杀基因系统对乳腺癌治疗作用。方法用重组VEGFP-CD/TK-GFP基因的腺病毒体外感染表达VEGF的乳腺癌MCF-7细胞和对照组不表达VEGF的乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察其感染效率,以RT-PCR检测受感染细胞CD/TK的表达,然后给予前药环氧鸟苷(GCV)和/或5-氟胞嘧啶(5-FC),用MTT法观察该体系对细胞生长增殖的影响;用流式细胞术观察细胞周期变化。建立MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型,采用瘤内注射腺病毒载体联合腹腔内注射前药GCV和/或5-FC治疗后,观察肿瘤生长情况。结果腺病毒对两种细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的增高而递增。RT-PCR检测发现转染Ad-VEGFP-CD/TK的MCF-7细胞有目的基因的表达,而乳腺上皮细胞无表达。MTT法检测显示表达VEGF的MCF-7细胞对前药具有较高的敏感性,而不表达VEGF的乳腺上皮细胞对前药不敏感,CD/TK融合基因对MCF-7的疗效优于任一单自杀基因(P<0.01)。在感染复数为100时,用流式细胞仪分析细胞周期显示治疗组细胞G0-G1期比率增多,S期细胞减少。在MCF-7裸鼠移植瘤模型中,该双自杀基因系统能够显著抑制肿瘤的生长,其疗效优于任一单自杀基因(P<0.01)。结论腺病毒介导VEGF启动子驱动的CD/TK融合双自杀基因联合GCV和5-FC能有效治疗乳腺癌,其效果优于单自杀基因系统。 展开更多
关键词 自杀基因治疗 腺病毒 VEGF启动子 乳腺癌
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