永久缺血缺氧对PC12细胞自噬的影响

目的建立缺血缺氧损伤细胞模型,探讨永久性缺血缺氧致神经细胞损伤机制及其对PC12细胞自噬的影响。方法采用经典的神经细胞模型PC12细胞作为研究对象,利用无糖的DMEM培养基和缺氧罐(95%N_2和5%CO_2)培养PC12细胞,模拟体内神经细胞缺血缺氧环境。细胞分为对照组(在正常条件下,使用完全培养基培养细胞)和糖氧剥夺(OGD)处理组(在缺氧条件下,使用OGD培养基培养细胞):0.5h(OGD+0.5h)、2h(OGD+2h)、6 h(OGD+6h)、12h(OGD+12h)和24h(OGD+24h)。利用MTT检测细胞存活率,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率,免疫荧光以及Western blotting法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧化酶-2(COX2)、微管相关蛋白轻链3(LC3)和Beclin-1的表达,透射电子显微术检测自噬体的超微结构,探讨不同永久性缺血缺氧时间对细胞损伤以及自噬的影响。结果与对照组相比,细胞存活率下降,呈OGD时间依赖性,且自OGD 6h显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率和坏死率持续增高,与OGD时间呈正相关,且自OGD 12h后显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);HIF-1α和COX2蛋白表达随OGD时间延长逐渐升高,OGD 12h后增高显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。OGD组被荧光标记的绿色的LC3蛋白相对于对照组,数量增多,绿色荧光增强。Beclin-1蛋白表达结果显示,Beclin-1的表达与OGD时间呈正相关,并由OGD6h开始明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论缺血缺氧能够诱导PC12细胞氧化应激及自噬激活。

2734例社区健康居民血脂水平检测及相关分析

目的:了解本地区20岁以上健康人群血脂水平与饮食结构、年龄及性别的关系。方法:用随机抽样方法,抽取开封市20岁以上社区健康居民2734人,进行问卷调查并检测血脂水平。结果:血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)随年龄而增高,但男女之间增加幅度并不平行;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)随年龄变化不明显。血脂水平的变化与饮食结构的改变有关。结论:倡导合理的饮食结构,坚持体育锻炼,以降低高脂血症,预防心脑血管疾病的发生。

喙端迁移流的发生及其细胞凋亡

目的研究生后不同日龄小鼠喙端迁移流(RMS)的发育,神经干细胞增殖和凋亡的规律。方法利用Caspase-8免疫荧光标记法和5’-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法,对小鼠RMS内的神经干细胞增殖和凋亡进行研究(n=92)。结果生后早期小鼠脑内,尤其是室管下区(SVZ)和RMS,存在大量的增殖细胞。随着小鼠年龄的增加,脑内干细胞逐渐减少,到成年,大脑皮质几乎见不到增殖的神经干细胞,但在SVZ和RMS仍可以看到许多增殖的神经干细胞。在RMS,神经干细胞增殖的同时伴随着细胞凋亡,干细胞的增殖与凋亡存在着正相关关系。结论 RMS的神经干细胞增殖与凋亡有重要的生理意义,通过细胞凋亡,RMS可以调节神经干细胞向嗅球迁移的数量,也可以调节干细胞向颗粒细胞分化。

乳腺癌患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活系统的变化及其意义

目的 :观察乳腺癌患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活物 (u -PA)及其特异性受体 (u -PAR)和纤溶酶原激活物抑制物 - 1 (PAI- 1 )含量的变化及其与肿瘤转移和预后的关系。方法 :用ELISA法测定 2 2例乳腺癌患者和 2 1例正常人血浆中u -PA、u -PAR和PAI- 1含量。结果 :乳腺癌患者的血浆u -PA、u -PAR和PAI - 1含量均显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 ) ;中、晚期组u -PA显著高于早期组 (P <0 .0 5 ) ,已转移组u -PA、u -PAR和PAI- 1较未转移组显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 )。结论 :乳腺癌患者血浆中u -PA、u -PAR和PAI - 1含量不同程度升高 。

缺血性脑卒中的文献计量学分析

目的:对缺血性脑卒中领域研究文献进行可视化分析,为把握重点研究方向、选择前沿技术课题、进行科学合理的科技布局提供决策信息支持。方法:利用文献计量学方法和信息可视化方法,对Web of Science中的SCIE数据库收录的缺血性脑卒中研究文献的时间、国别、机构、期刊、学科、主题、作者等进行分析和评价。结果:科学引文索引数据库2013年至2023年共收录2269篇缺血性脑卒中研究文献,数量自2018年开始进入快速增长期;在期刊出版量和文献发表量上美国与中国是主要的产文国;STROKE期刊为其主要载体,首都医科大学是出版量最大的机构,同时该校的吉训明教授贡献了最多的研究文献。研究热点和重点基本上经历了一氧化氮合成酶、集落刺激因子、脐带血干细胞的与缺血性脑卒中的关系的基础研究阶段,向外显子、机械祛栓、血栓管理、健康保健的效能等机制和应用方向发展。结论:缺血性脑卒中领域目前研究现状较为活跃,未来的热点将集中于血栓切除术、患者早期治疗、神经炎症等方面。

亚硝酸钠对人肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨亚硝酸盐对人肝癌细胞增殖和凋亡作用。方法用不同浓度的亚硝酸钠处理人肝癌SMMC-7721细胞不同时间,用MTT分析细胞增殖,荧光显微镜下观察细胞分裂指数和凋亡率,RT-PCR分析c-myc mRNA变化,Westernblot分析缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达。结果亚硝酸钠诱导SMMC-7721细胞增殖和凋亡呈双相剂量效应,亚硝酸钠在低浓度时(20～200 mg.L-1),刺激细胞增殖,抑制细胞凋亡,在高浓度时(>800 mg.L-1),抑制增殖,促进凋亡。20～200 mg.L-1亚硝酸钠处理细胞可以明显增加c-myc mRNA和HIF-1α蛋白表达。结论亚硝酸钠在一定浓度范围内刺激SMMC-7721细胞增殖,但是超过一定剂量则诱导细胞凋亡。

低剂量亚硝酸钠预适应对过氧化氢损伤PC12细胞的保护作用

目的:研究亚硝酸钠(NaNO2)预适应对过氧化氢(H2O2)损伤鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用。方法:分别以系列浓度的NaNO2作用PC12细胞24h,细胞的增殖活性采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和活细胞计数法,用Hoechst 33258染色计数凝集和碎核细胞占细胞总数的百分比为细胞凋亡率。以3mmol/L浓度的NaNO2预适应细胞24h后,加或不加一氧化氮清除剂亚铁血红蛋白(hemo),再用1.1mmol/L H2O2暴露6h,细胞存活率检测用MTT、凋亡检测用流式细胞术和Hoechst 33258/PI染色。比色法测定丙二醛(MDA)含量和酶活性。结果:NaNO2对PC12细胞增殖作用呈典型的β型曲线,最大低促效应出现在第24h,最大低促效应剂量为1.4mmol/L,最大促增殖效应为对照组的156%,未观察到不良效应水平(NOAEL)为6mmol/L,细胞增殖半数抑制率(IC50)值为45mmol/L。用3mmol/L NaNO2预适应24h,然后用1.1mmol/LH2O2暴露6h,细胞增殖活性比单纯H2O2组明显升高(P<0.05)。用1.1mmol/L H2O2暴露6h,非预适应组细胞凋亡率为44.9%;3mmol/L NaNO2预适应组细胞凋亡率为19.1%,差异显著(P<0.05),这种现象可以被一氧化氮清除剂亚铁血红蛋白(hemo)所抑制。3mmol/L NaNO2预适应组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平升高,MDA含量降低(P<0.05)。结论:低于6mmol/L NaNO2暴露能够引起PC12细胞的低促效应。低浓度NaNO2预适应,通过降低细胞脂质过氧化,提高抗氧化酶活性,保护过氧化氢毒害的PC12细胞。亚硝酸盐还原为一氧化氮在细胞保护过程中起关键作用。

血清PG检测在胃癌早期筛查及术后监测中的应用

目的探讨血清胃蛋白酶原及亚群(PGⅠ、PGⅡ)与胃癌患者早期诊断及术后复发的关系。方法采用放射免疫分析法分别检测胃癌患者、术后患者及正常对照组血清PGⅠ、PGⅡ含量,对检测结果进行统计分析。结果与正常对照组相比,胃癌患者血清PGⅠ含量及PGⅠ/PGⅡ比值明显偏低(P<0.01);胃癌全胃切除术组与胃癌组相比血清PGⅠ、PGⅡ含量明显偏低(P<0.01);胃癌术后复发组与无复发组相比PGⅠ、PGⅡ均明显升高(P<0.05)。结论监测血清PGⅠ/PGⅡ比值及PGⅠ含量的变化对早期胃癌筛查有一定的指导意义,也可用于胃癌术后复发的监测。

补肾方剂对大鼠成骨样细胞增殖及相关酶类的影响

目的 :探讨补肾方剂对成骨样细胞 U MR10 6增殖及其蛋白激酶活性的影响。方法 :用不同剂量的补肾方剂与成骨样细胞 UMR10 6共同培养 ,以 MTT法检测细胞的增殖 ,用 32 P- ATP参入反应底物中的摩尔数表示蛋白激酶的活性。结果 :该补肾方剂在 1.0× 10 - 1 mg/ m l～ 1.0× 10 - 5mg/ ml浓度范围均能增加成骨样细胞增殖 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,1.0× 10 - 4mg/ m l浓度处理细胞可使蛋白激酶 A(PKA)和蛋白激酶 C(PKC)活性增高。结论 :补肾方剂可活跃和增进细胞的信号传导 。

开封市学龄前儿童幽门螺旋杆菌感染状况及相关分析

目的:了解开封市区无症状学前儿童幽门螺旋杆菌(Helicobacter Pylori,HP)感染状况及相关的因素。方法:对开封市480例无症状学前儿童进行问卷调查。采用ELISA法测血清HP抗体,同时检测粪便HP抗原。结果:本地区学前儿童HP感染率35.4%,随年龄增加HP感染率有上升趋势;HP感染与平时照顾儿童的成人有胃病史;儿童有啃手指、玩具的习惯;低人均居住面积;低与成人共用餐具和襁褓中接受口嚼食物喂养有关。结论:本地区学前儿童HP仍处于高感染状态。积极防治成人的HP感染,改善生活居住条件,教育儿童从小养成良好的饮食和卫生习惯对降低儿童HP感染起重要作用。

环维黄杨星D新衍生物对酒精诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨环维黄杨星D(CVB-D)新衍生物对酒精诱导的PC12细胞损伤模型的影响。方法建立酒精诱导PC12细胞损伤模型,通过MTT染色、Hoechst 33258染色和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定研究环维黄杨星D新衍生物对PC12细胞的保护作用。结果环维黄杨星D新衍生物抑制酒精对PC12细胞的增殖抑制作用,凋亡率下降,同时LDH的漏出减少。结论环维黄杨星D新衍生物对酒精诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。

自噬的双重功能

自噬是一个保守的代谢过程,广泛参与了细胞生长、生存、发展和死亡。一方面,自噬是营养匮乏等应急状态下维持细胞稳定和细胞存活的因素,另一方面,自噬在细胞死亡过程中也起重要的作用。本文综述了自噬与细胞生长、细胞存活以及细胞死亡之间的关系。

灵草液对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用

目的 :观察灵草液对阿尔茨海默病 (AD)大鼠学习记忆功能的影响。方法 :雄性SD大鼠 ,随机分为 7组。Ⅰ组为正常对照组 ,Ⅱ组为AD模型组 ,Ⅲ组为AD模型 +生理盐水组 ,Ⅳ组为AD模型 +脑复康 0 .3g/kg治疗组 ,Ⅴ组为AD模型 +低浓度灵草液治疗组 ,Ⅵ组为AD模型 +中浓度灵草液治疗组 ,Ⅶ组为AD模型 +高浓度灵草液治疗组。采IBO损毁大鼠双侧nbM ,建立AD动物模型 ,并用灵草液连续灌胃 2 0d ,灌胃期满后即做Y迷宫实验及跳台实验以测学习、记忆能力。结果 :①与正常组比较 ,模型组的学习记忆能力均显著下降 (P <0 .0 1) ;②与模型组比较 ,生理盐水组均无明显改变 (P >0 .0 5 ) ;③与模型组比较 ,脑复康组及灵草液各浓度组的学习记忆能力均显著升高 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论 :灵草液能够提高AD模型大鼠的学习记忆能力。

综合教学模式在医学生物化学教学中的应用探索

生物化学是生命科学发展的前沿学科之一,传统的教学模式已不能适应医学发展的需求,鉴于此,在医学生物化学教学中,综合运用LBL与"第二课堂"教学方法,形成了一种适合学生的综合教学模式,这种教学模式能激发学生的学习兴趣,加强学生的主动学习和自主创新能力,有利于培养学生的临床思维和早期科研能力。

酒精对PC12细胞凋亡及中性神经鞘磷脂酶表达及活性的影响

采用不同浓度酒精处理PC12细胞,观察酒精诱导细胞凋亡作用及凋亡过程中中性神经鞘磷脂酶(neutral sphingomyelinase,N-S Mase)活性及mRNA表达量的改变.结果显示,当酒精浓度达50 mmol/L以上时,作用24 h后,去血清培养的PC12细胞表现出较强的细胞增殖抑制作用(P<0.05)并呈浓度依赖性.Hoechst 33258荧光染色结果显示处理组凋亡细胞增多,表现染色质凝集、细胞核变小、核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化.琼脂糖凝胶电泳显示酒精处理组有不同程度的DNA断裂,呈凋亡细胞典型的梯状DNA.RT-PCR结果显示,不同浓度酒精作用PC12细胞2 h后N-S Mase表达升高.荧光分光光度法检测N-SMase的活性,显示酒精作用PC12细胞2h后酶活性升高,与去血清对照组相比差异显著(P<0.05).上述结果表明,酒精可导致PC12细胞凋亡并伴有N-SMase mRNA表达量增高,酶活性增强,说明酒精诱导PC12细胞凋亡与鞘磷脂循环有关.

Reeler小鼠皮质片层化及细胞极性化

目的探讨Reelin在皮质片层化形成及细胞分化、极性化中的作用及相关机制。方法取reeler小鼠和野生型(WT)小鼠受孕17 d(E17)至出生21d(P21)各年龄点脑部共96例。免疫荧光标记技术与5’-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)法检测两组小鼠大脑发育中放射状胶质细胞、增殖的神经干细胞及极性蛋白的表达,并使用Nissl染色技术及Di I示踪技术分别对新皮质分子层发育、海马CA1区锥体细胞极性方位以及皮质锥体细胞极性程度进行统计。结果 Reeler小鼠大脑发育中齿状回内放射状胶质细胞数量减少,极性紊乱,Brd U阳性细胞散在分布,数量减少;由于极性细胞未得到适当的终止信号越过皮质Ⅱ层进入分子层,皮质片层化紊乱;大脑皮质及海马锥体细胞极性发生改变。结论 Reelin在神经细胞迁移、神经元增殖和皮质片层化的过程中发挥重要作用,尤其对锥体细胞极性起着至关重要的影响。

幽门螺旋杆菌感染者血清胃蛋白酶原的表达

目的:探讨幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染和血清胃蛋白酶原(Pepsinogen,PG)之间的关系。方法:分别对126例HP阴性组、94例HP弱阳性组、201例HP阳性组和97例治疗转阴组进行血清胃蛋白酶原PGⅠ、PGⅡ测定。结果:HP阳性组与阴性对照组比较血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ水平有显著性差异(P<0.05)。阳性组与治疗转阴组比较血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ水平有显著性差异(P<0.05)。弱阳性组与阴性对照组,弱阳性组与治疗转阴组之间比较PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ水平没有显著性差异(P>0.05)。治疗转阴组与阴性对照组比较PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ水平没有显著性差异(P>0.05)。结论:血清PGⅠ、PGⅡ水平与幽门螺旋杆菌感染密切相关。血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ水平可作为HP根除效果的评价指标。

N-甲基环丙沙星氟喹诺酮查尔酮类衍生物对人胰腺癌BxPC-3细胞凋亡和自噬的影响

目的研究N-甲基环丙沙星氟喹诺酮查尔酮类衍生物1环丙基-6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-[2-(3,4,5-三甲氧苯甲酰基)-乙烯-1-基]-喹啉-4-(1H)-酮(HGQ7)对人胰腺癌Bx PC-3细胞凋亡和自噬的诱导作用。方法 MTT法检测细胞增殖;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法和TUNEL法测定细胞凋亡率;用自噬抑制剂氯喹处理细胞,验证HGQ7对细胞增殖和凋亡的影响;间接免疫荧光技术和Western blot法检测细胞自噬标志性蛋白LC3的表达。结果 HGQ7对Bx PC-3细胞增殖有明显抑制作用,24、48 h的IC50分别为4.952、4.564μmol·L^(-1);各组HGQ7作用24 h后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.01);HGQ7处理导致Bx PC-3细胞LC3-Ⅱ表达量增加,6～24 h达到最高,之后明显下降;自噬抑制剂氯喹增强低剂量HGQ7(0.312 5～2.5μmol·L^(-1))对BxPC-3细胞的增殖抑制作用,并进一步提高HGQ7(1.25μmol·L^(-1))诱导的细胞凋亡率;而在高剂量HGQ7(5～10μmol·L^(-1))处理Bx PC-3细胞时,HGQ7联合氯喹组的细胞生长抑制率明显低于HGQ7单独处理组,HGQ7(5μmol·L^(-1))联合氯喹组细胞凋亡率则高于HGQ7单独处理组。结论 HGQ7能够明显诱导Bx PC-3细胞凋亡和自噬,低剂量HGQ7作用于Bx PC-3细胞时,自噬对细胞具有保护作用,高浓度HGQ7作用时,自噬作用则降低细胞增殖率,促进细胞凋亡。

miR-4286靶向FOXO4对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的:探讨miR-4286靶向FOXO4对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测肺癌组织和与其对应的癌旁组织中miR-4286和FOXO4 mRNA的表达。将miR-4286抑制物(anti-miR-4286)转染至肺癌A549细胞,CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术、Transwell、Western blot分别检测抑制miR-4286表达对A549细胞存活、克隆形成、凋亡、迁移侵袭及P21、Caspase-3、E-cadherin和MMP-2表达的影响。荧光素酶报告基因实验及Western blot验证miR-4286对FOXO4的靶向调控关系。结果:肺癌组织中miR-4286的表达较癌旁组织显著升高,FOXO4 mRNA的表达较癌旁组织显著降低(P<0.05)。抑制miR-4286表达后A549细胞的存活率、克隆形成及迁移侵袭能力显著降低,细胞凋亡率显著升高,P21、Caspase-3和E-cadherin蛋白表达显著升高,MMP-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。miR-4286靶向FOXO4并负性调控A549细胞中FOXO4表达。抑制FOXO4表达可逆转抑制miR-4286对A549细胞存活、克隆形成、迁移侵袭及凋亡的影响(P<0.05)。结论:肺癌组织中miR-4286呈高表达。抑制miR-4286通过上调FOXO4抑制肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。