银丹心脑通软胶囊对血管内皮细胞的保护作用

目的研究银丹心脑通软胶囊(YXC)对血管内皮细胞的保护作用及作用机制。方法采用氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤两种模型,MTT法测定YXC预处理后HUVEC存活率,探讨YXC对内皮细胞的保护作用;采用流式细胞术测定YXC对内皮细胞凋亡的影响,探讨YXC内皮保护的作用机制。结果 YXC的最大无毒浓度为500μg·m L-1。将250、125、62.5μg·m L-13个浓度作为YXC的实验浓度;YXC孵育24 h后可明显升高Ox-LDL诱导的HUVEC的存活率(P<0.05),具有明显的量效关系;YXC孵育24 h后可明显升高TNF-α诱导的HUVEC的存活率(P<0.05)。250和125μg·m L-1YXC可显著降低HUVEC细胞的凋亡率。结论 YXC对血管内皮细胞具有保护作用,其机制可能与抗细胞凋亡有关。

三黄泻心汤“炮制配伍”解热优势方药效及其作用机制研究

目的观察三黄泻心汤"炮制配伍"解热优势方药效并初步探究其作用机制。方法大鼠皮下注射20%干酵母混悬液复制发热模型,阿司匹林(0.1g·kg^(-1))作为阳性对照药,三黄泻心汤解热优势方分为3个剂量(1、0.5、0.25 g生药·kg^(-1)),灌胃给药。首先测量给药前基础体温,然后分别于给药后0.5、1、2、4 h测量大鼠肛温,以实测体温-基础体温(ΔT)表示体温变化,实验结束后采血及分离血清,取下丘脑组织后制备上清。Elisa法测定血清和下丘脑组织中PGE2、c AMP、Cox-1、Cox-2的含量。结果三黄泻心汤"炮制配伍"解热优势方各剂量组均可使体温下降,并降低发热大鼠血清和下丘脑组织中PGE2、cAMP、Cox-1、Cox-2的含量。结论三黄泻心汤"炮制配伍"解热优势方有明显的解热作用,其机制可能是与抑制PGE_2、c AMP等中枢发热介质的释放有关。

炮制配伍“三黄泻心汤”9种组方的药效学比较研究

目的基于饮片炮制配伍的成分配伍,从抗炎、活血化瘀及清热等药效学的角度,利用大黄生片、熟片和炭片之间化学成分的组成及量比关系的差异进行"三黄泻心汤"9种组方成分配伍研究。方法动物随机分为正常对照组,模型对照组,阳性药阿司匹林组,9个样品组,大鼠给药剂量为0.5 g生药·kg-1体重,小鼠给药剂量为0.9 g生药·kg-1体重。采用皮下肾上腺素加冰浴的方法建立血瘀证模型,检测不同切变率下的全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血小板聚集率,凝血酶时间和凝血酶原时间以及血浆纤维蛋白原含量;采用皮下注射酵母引起大鼠发热模型,观察给药后0.5、1、2和4 h体温变化;采用二甲苯液致小鼠耳肿胀模型,计算耳肿胀率,观察其抗炎作用。结果组方7可以降低血瘀证模型大鼠的全血粘度和血浆粘度,优于其他组方;组方2、组方4、组方8可以降低小鼠耳肿胀度,且肿胀抑制率高于其他组方,有较好的抗炎消肿效果。结论组方7和8是9种配伍中的优势方。

研究剪应力生物效应时难以回避压力的联合效应

目的:生物力药理学研究常用流动小室或血管段观察剪应力的生物学效应;法向压力可能参与其中。本文探讨不同剪应力和压力对家兔离体血管内皮细胞环氧化酶-1(COX-1)mRNA和组织纤溶酶源激活物(t-PA)mRNA表达水平的影响。方法:手术分离实验家兔腹主动脉共15段,应用离体血管灌流装置,建立家兔动脉血管在不同剪应力(1.5-20dyn/cm^2)和平均压力(<50 000dyn/cm^2)条件下的加载模型;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定不同剪应力及压力水平时实验兔动脉血管COX-1mRNA、t-PA mRNA的表达水平及其相互关系。结果:(1)单独观察剪应力效应:剪应力在1.5-20dyn/cm^2范围内,COX-1mRNA和t-PA mRNA相对表达水平随着剪应力增加而升高,均呈显著正相关(P<0.01),回归方程分别为y=0.0261x+0.0886和y=0.2033x+1.2082。(2)综合观察剪应力和压力的联合效应:剪应力(x)和压力(y)以复杂的非线性方式显著影响COX-1mRNA和t-PA mRNA的表达,可采用二元二次方程进行定量描述,分别为COX-1mRNA=0.3619-0.0389x+8.8645×10^(-7)y+0.0015x^2+1.515×10^(-6)xy-3.1759×10^(-10)y^2(P<0.01)和t-PA mRNA=2.9572-0.047x-6.5219×10-5y+0.01x2+2.2973×10^(-6)xy+6.9716×10^(-10)y^2(P<0.01)。结论:生物力药理学研究剪应力的生物效应时,压力的影响不可避免,应综合分析剪应力与压力的联合作用,推荐采用二元二次方程进行有效描述。

银丹心脑通软胶囊中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B在大鼠血浆中的药代动力学分析

目的：建立快速灵敏且专属性强的体内分析方法用于研究银丹心脑通软胶囊中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的药代动力学研究,为该制剂的临床使用提供参考。方法：采用超高压液相色谱-串联质谱分析法（UPLC-MS/MS）,测定大鼠按2.4 g·kg-1灌胃银丹心脑通软胶囊后不同时间点的血药浓度。质谱采用的扫描方式为多反应离子检测模式,定量分析离子对分别为丹参酮ⅡAm/z 295.0~249.0,丹酚酸B m/z 717.1~519.0和黄芩素m/z 271.1~122.8。通过DAS 2.1.1药动学数据处理软件计算药动学参数。结果：丹参酮ⅡA和丹酚酸B与其他内源性和药源性成分达到了良好分离,线性范围分别为1~100,5~500μg·L-1;平均提取回收率在72.43%~93.92%;准确度在92.65%~106.26%,日内精密度和日间精密度RSD在2.73%~9.87%。丹参酮ⅡA和丹酚酸B的主要药动学参数分别为达峰浓度（Cmax）（38.34±17.35）,（32.00±15.43）μg·L-1;达峰时间（Tmax）分别为（0.25±0.23）,（0.75±0.18）h。结论：UPLC-MS/MS能够快速、灵敏、专属地分析大鼠血浆中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的血药浓度,该方法适用于银丹心脑通软胶囊在大鼠体内的药代动力学分析。

UPLC-MS/MS同时测定银丹心脑通软胶囊中7种活性成分及药代动力学研究

该文采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS),建立大鼠血浆中槲皮素(QCT)、山柰酚(KMF)、异鼠李素(ISR)、银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯C(GC)、白果内酯(BB)7种成分的分析方法。同时,探讨单次灌胃给药银丹心脑通软胶囊后上述7种成分在大鼠体内的药代动力学特征。方法学考察结果表明,7种化合物线性关系良好(r≥0.997 1),日内、日间精密度和准确度的RSD均小于11%,基质效应和回收率分别为93.28%~103.6%和72.43%~95.77%,样品室温放置6,12 h,-20℃反复冻存和-20℃长期冻存后基本稳定,其RSD均在11%以下,方法学考察符合生物样品分析要求。大鼠灌胃银丹心脑通软胶囊后,上述7种成分的血浆药代动力学参数如下:Cmax(45.02±11.28),(49.90±13.82),(27.85±8.38),(76.31±18.19),(76.54±15.43),(35.35±10.28),(48.70±12.34)μg·L^(-1);tmax(0.33±0.11),(0.50±0.23),(0.33±0.14),(0.75±0.29),(1.0±0.35),(1.5±0.23),(0.75±0.50)h;该研究建立的UPLC-MS/MS方法适于对大鼠口服银丹心脑通软胶囊后的槲皮素、山柰酚、异鼠李素、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯的药代动力学研究。