2012-2021年我国部分地区羊肠道寄生虫感染情况调查

为了解我国部分地区近10年羊肠道寄生虫感染情况,探讨羊肠道寄生虫流行特征,采用显微镜检查法对2012年1月至2021年12月来自全国17个省份46个地区的6745份羊粪便样品进行肠道寄生虫感染情况调查。结果显示,在这些样品中共检测出原虫(艾美耳球虫、隐孢子虫、贾第虫及阿米巴等)、线虫(毛尾线虫也称为鞭虫、毛细线虫、羊仰口线虫、细颈线虫和毛圆线虫等)、绦虫、吸虫(前后盘吸虫、歧腔吸虫及绵羊斯克里亚宾吸虫等)共4纲寄生虫。肠道寄生虫总感染率为82.15%,其中球虫感染率最高(73.73%),其次是阿米巴(37.49%);2012年感染率最高(97.58%),2018年最低(50.77%);放牧羊感染率(87.85%)高于舍饲羊(80.59%)。说明我国羊肠道寄生虫感染情况普遍存在,10年来寄生虫感染率无显著下降,应加强肉羊寄生虫病的防控。

天门市长期住院患者人芽囊原虫感染情况分析

2021年6—9月收集天门市第一人民医院长期住院患者基本信息(性别、年龄、粪便性状、隐血试验结果、临床症状体征等),采集患者粪样,以生理盐水直接涂片法置显微镜下检查,对疑似人芽囊原虫阳性粪样提取DNA,使用人芽囊原虫特异引物BhRDr和RD5扩增目的条带,阳性粪样送至北京诺赛基因组研究中心有限公司进行测序。患者粪样同时观察蓝氏贾第鞭毛虫和脆弱双核阿米巴感染情况。采集患者抗凝全血和非抗凝静脉血进行血液分析。857例患者中共检出人芽囊原虫阳性粪样42例,阳性检出率为4.90%,其中男性4.27%(19/445),女性5.58%(23/412),性别间阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=0.791,P>0.05)。不同年龄组中,≥61岁组阳性率最高(6.38%,22/345);不同年龄间阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)=2.700,P>0.05)。不同的粪样性状中,以稀便检出阳性率最高(18.37%,27/147)(χ^(2)=98.930,P<0.05)。隐血试验便血者检出率为6.72%(9/134),未便血者为4.56%(33/723),阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)=1.123,P>0.05)。不同临床症状中以“腹痛且腹泻”阳性率最高(4/11)(χ^(2)=53.956,P<0.05)。患者中检出人芽囊原虫混合蓝氏贾第鞭毛虫感染者6例,混合脆弱双核阿米巴原虫感染者2例。人芽囊原虫感染者红细胞计数为(3.97±7.39)×1012/L,血红蛋白为(119.02±21.49)g/L,均低于非感染者[(4.27±0.44)×1012/L,(126.52±14.30)g/L](t=2.556、2.235,均P<0.05)。人芽囊原虫基因测序结果共有4种基因型(ST1、ST3、ST6、ST7),以ST3为主,占57.1%(24/42)。

芽囊原虫体外培养特性的研究

探究体外培养的芽囊原虫的形态、体外增殖规律及不同温度保存的降解情况。从腹泻患者芽囊原虫阳性粪便中分离芽囊原虫,在IMDM培养基中培养,观察虫体形态和生殖方式。采用显微镜计数法和荧光定量PCR法(qPCR)测定芽囊原虫18S小亚基核糖体DNA(SSU rDNA)的拷贝数分析体外培养芽囊原虫的增殖情况,绘制增殖曲线,分析两种方法的相关性。芽囊原虫分别置4℃、-20℃、-80℃保存,第1~7天和第1~5周,提取虫体DNA,qPCR法检测芽囊原虫SSU rDNA,分析芽囊原虫的降解情况。形态学研究结果显示,IMDM培养基培养的芽囊原虫,可观察到空泡形、颗粒形、阿米巴形和包囊等4种常见形态和分裂生殖、出芽生殖和胞内生殖等3种生殖方式。芽囊原虫体外培养的第3~7天为快速增长期,第7天虫体密度达到峰值,显微镜计数和qPCR法测定结果分别为2.5×10^(6)个/ml和1.1×10^(6)拷贝/μl。相关性分析显示,显微镜计数和qPCR法测定结果绘制的增殖曲线的皮尔逊相关系数为0.95,呈高度相关。在4、-20和-80℃保存第7天,芽囊原虫SSU rDNA拷贝数分别为(2.75±0.20)×10^(4)、(6.84±1.33)×10^(4)、(1.39±0.06)×10^(5)拷贝/μl,为第1天拷贝数[(2.36±0.06)×10^(5)、(2.39±0.06)×10^(5)、(2.23±0.21)×10^(5)拷贝/μl)]的11.6%、28.3%和63.6%,差异有统计学意义(F=130.67,P<0.05);在4、-20和-80℃保存第5周时,芽囊原虫SSU rDNA拷贝数分别为(3.77±0.23)×10^(4)、(4.37±0.59)×10^(4)、(3.86±0.26)×10^(5)拷贝/μl,为第1周拷贝数[(2.23±0.21)×10^(5)、(2.23±0.21)×10^(5)、(2.23±0.21)×10^(5)拷贝/μl]的2.98%、3.41%和28.74%,差异有统计学意义(F=500.51,P<0.05)。体外培养的芽囊原虫高峰期虫体形态多样,显微镜计数法和qPCR法均可用于芽囊原虫的定量,芽囊原虫在4、-20和-80℃保存均会发生降解,-80℃保存的降解程度小于4、-20℃。

球虫分子生物学检测方法研究进展

球虫病是由球虫引起的一种发病率高、致死率低、显著影响动物生长,对畜牧业危害最严重的寄生虫病之一。建立高效的球虫检测方法对防控球虫病具有重要意义。为改善传统诊断方法的局限性,目前基于核酸的新兴诊断技术正在发展。论文综述了国内外球虫分子生物学检测方法的研究进展,分析了各种技术的优点和问题,展望了球虫分子生物学技术的应用前景和发展趋势,以期为球虫检测研究和应用提供参考。

八角益母草醇提取液组方对鸡皮刺螨的临床杀灭效果

本研究采用八角益母草醇提液组方对河南某蛋鸡养殖户中暴发的鸡皮刺螨病进行临床杀灭效果观察,以用药期间螨虫聚集点和捕螨器的螨虫变化为评判指标。结果显示,八角益母草醇提液组方临床用药两周后捕螨器中成虫减少率为99.96%、幼虫为99.96%、虫卵为99.93%。用药前聚集堆49个,用药14天后,无明显聚集堆。综上,本研究初步确定八角益母草醇提液组方对鸡皮刺螨具有良好的杀灭作用,可作为潜在的杀灭鸡皮刺螨的中草复方药物。