高三尖杉酯碱联合三氧化二砷诱导人急性髓系白血病U937细胞株凋亡的实验研究

目的:本探讨高三尖杉酯碱(HHT)联合三氧化二砷(As_2O_3)对人急性髓系白血病细胞株U937细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用及相关机制。方法:用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测不同浓度HHT及As_2O_3单用及联用对U937细胞增殖的影响;应用Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞术检测二者单用或联用对U937细胞的凋亡诱导作用,Western blot方法检测U937细胞内P-Akt^(Ser473)、P-Akt^(Thr308)、BCL-XL、BID、MCL-1与P-MCL-1等蛋白的表达。结果:HHT和As_2O_3均可明显抑制U937细胞的增殖,诱导其凋亡,两药联合可明显增加U937细胞早期凋亡率,且两药联合作用后U937细胞P-Akt^(Ser473)、P-Akt^(Thr308)、MCL-1、P-MCL-1与BCL-XL蛋白表达明显下调,而BID蛋白表达无明显变化。结论:HHT与As_2O_3联合可通过抑制PI3K/Akt信号通路及下游MCL-1蛋白协同抑制U937细胞。

HIF-1α在原代急性髓系白血病细胞中的表达及其与预后的关系

目的:本研究通过检测HIF-1α在原代急性髓系白血病(AML)细胞中的表达,探讨其表达水平与临床参数、预后之间的关系。方法:采用CD3单克隆抗体负分选法分选出53例初诊AML(除急性早幼粒细胞白血病APL)患者外周血中的AML细胞,应用实时荧光定量RT-PCR(FQ RT-PCR)检测AML细胞的HIF-1α表达水平,以管家基因β-actin为内参,按2-△△Ct法计算目的基因相对正常供者的表达量,分析其表达水平与患者年龄、性别、白细胞计数、诊断分型、疗效等临床参数之间的关系,并进一步用Western Blot法分析了有髓外浸润和无髓外浸润AML患者HIF-1α蛋白表达水平。结果:HIF-1α在原代AML细胞中的表达量与年龄、性别、外周血白细胞计数、血红蛋白水平、血小板计数及外周血原始细胞比例等无关;不同FAB分型的AML患者的HIF-1α表达量无显著差异;标准1-2个疗程化疗后获得完全缓解(CR)的AML患者HIF-1α表达量低于2个疗程后未获得CR的AML患者,但无统计学差异;高表达HIF-1α的AML患者1年复发率要高于低表达者;伴有髓外浸润的AML患者的HIF-1α基因和HIF-1α蛋白表达量显著高于无髓外浸润的患者;HIF-1α表达水平与PI3K/AKT通路中重要的负调控分子PTEN水平呈明显负相关(r=-0.48,P=0.001)。结论:HIF-1α的表达与AML的髓外浸润和预后密切相关,有可能成为AML预后判断的一个参考指标。

MCL-1在原代急性髓系白血病细胞中的表达及其临床意义

目的:通过检测MCL-1在核型正常的原代急性髓系白血病(AML)细胞中的表达,探讨其表达水平与临床参数和预后之间的关系。方法:收集37例初诊AML(除APL外)且染色体核型为正常的患者标本,采用CD3单克隆抗体负分选法分离出原代AML细胞,应用实时荧光定量RT-PCR(FQ RT-PCR)和Western b1ot方法检测MCL-1及其蛋白表达水平,分析MCL-1表达水平与初诊时白细胞计数、血小板计数、血红蛋白水平、原始细胞比例、髓外浸润、肿瘤药敏、获得CR所需疗程数等临床参数之间的关系。结果:在原代AML细胞中,MCL-1及其蛋白水平的表达量与白细胞计数、血红蛋白水平、血小板计数、原始细胞比例无相关性;初诊时发生髓外浸润和无髓外浸润的AML患者MCL-1表达无差别;1-2个疗程标准方案后获得CR的AML患者,其MCL-1表达水平低于未获得CR的AML患者(P<0.05);MCL-1蛋白表达高的原代AML细胞对常规化疗药物体外药敏的耐药率高于表达低者(P<0.05)。结论:MCL-1表达量可能与AML患者的多药耐药相关,可能成为AML患者临床预后判断的一个指标。

获得性凝血因子Ⅻ缺乏患者的临床特征分析

目的探讨获得性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺乏的病因、临床表现、临床诊断与治疗。方法对2017年1月至2018年1月诊断的10例获得性FⅫ缺乏患者的临床资料进行回顾性分析。10例患者中,男7例,女3例;年龄27～82岁,中位年龄48岁。结果患者的中位FⅫ活性为33.5%。10例患者均无出血、血栓表现,所有患者活化部分凝血酶原时间(APTT)均延长,中位时间为57.3s;凝血酶原时间(PT)正常或略微升高,APTT纠正试验(即刻和延迟)均不能纠正。3例患者手术后FⅫ水平恢复到正常,APTT部分或完全纠正。结论获得性FⅫ缺乏患者虽然APTT延长但无出血症状,在治疗上不建议立即补充血浆,对于原发疾病为肿瘤的患者,如果手术中有高凝风险可酌情考虑抗凝治疗。

CD44单抗A3D8对NB4细胞IL-3Rα及其下游信号通路的调节

目的探讨CD44单抗A3D8对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞IL-3Rα及其下游PI3K/Akt信号通路的调节。方法以NB4细胞为研究对象,以同型抗体IgG1为阴性对照,以A3D8为实验组,A3D8诱导NB4细胞分化凋亡过程中,real-time RT-PCR方法检测IL-3Rα基因转录水平,运用Western blot法检测IL-3Rα及下游PI3K/Akt信号通路中重要信号分子,随后将PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002与A3D8联合,观察二者联合对NB4细胞PI3K/Akt信号通路的影响。结果 A3D8诱导NB4细胞分化凋亡过程,可明显下调NB4细胞中IL-3RαmRNA和蛋白表达水平,抑制PI3K/Akt信号通路;LY294002可增强A3D8对NB4细胞增殖和凋亡的抑制作用,并可进一步抑制PI3K/Akt信号通路。结论 A3D8可抑制NB4细胞IL-3Rα的转录水平和蛋白表达水平,并抑制其下游PI3K/Akt信号通路。

胃神经内分泌瘤伴多发转移1例

胃肠胰神经内分泌肿瘤约占全部神经内分泌肿瘤的65%-75%,其中胃神经内分泌肿瘤（gastric neuroendocrine neoplasm,G-NEN）仅占5.85%,G-NEN具有侵袭和转移性,极少数产生活性物质表现出类癌综合征。G-NEN发病罕见,临床隐匿,早期症状和体征不典型或缺如,多数的高度恶性GNEN确诊时已到TNMⅢ-Ⅳ期。

329例尿路感染常见细菌分布及耐药性分析

目的了解尿路感染常见细菌的分布及耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供试验依据。方法对福建医科大学附属协和医院泌尿系感染者分离的细菌,采用法国生物梅里埃公司ATB鉴定系统对菌株进行鉴定,采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验。结果尿路感染常见的前5位细菌分别为大肠埃希菌(61.3%)、屎肠球菌(14%)、粪肠球菌(9.7%)、肺炎克雷伯菌(9.2%)和铜绿假单胞菌(5.7%)。药敏结果显示:大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦和阿米卡星较为敏感,屎肠球菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁和替加环素较为敏感,粪肠球菌对呋喃妥因、利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁较为敏感,铜绿假单胞菌对阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和美罗培南较为敏感,肺炎克雷伯菌对亚胺培南、头孢替坦、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦较为敏感。结论尿路感染的细菌中以大肠埃希菌多见,耐药率呈现逐年上升趋势,临床应该重视病原菌的培养和药物敏感试验,根据药敏结果合理选用抗菌药物。

低钾血症治疗量函数关系的研究

目的研究治疗低钾血症补钾量的函数关系。方法参照纳入标准和排除标准入选35例。轻、中和重度低钾血症患者当日补钾所需氯化钾总量分别为4-6 g,6-8 g和8-12 g。测24 h尿钾和治疗前后血清钾浓度,计算出Δ细胞外液钾量、钾的治疗量(补钾总量-24 h尿钾-24 h尿钾/9)和Δ细胞内钾量(钾的治疗量-Δ细胞外液钾量),钾量的计算单位是mmol。设血清Δ细胞外液钾为自变量X,钾的治疗量为因变量Y。SPSS25.0解析正态分布,进行线性相关性、标准化残差和多种模型拟合效果比较分析。结果自变量和因变量呈正态分布、散点图分析和标准化残差分析显示显著的同向趋势,拟合回归比较显示线性相关最佳,治疗量与提升细胞外液新增量的函数关系式为Y=0.485+4.948X。结论Δ细胞外液钾与钾的治疗量存在线性相关,其线性方程式有助于临床细胞外液钾治疗量的评估。

儿童健康干预在儿童成长中的应用效果观察

探讨儿童健康干预在儿童成长中的效果。方法:选取120例儿童,分组后采取不同干预方式,观察两组数据。结果:身高、体重、头围这三项指标增长情况:研究组均更佳(P<0.05);营养性疾病发生率:研究组为0.00%,对照组为6.67%,前一组更低(P<0.05)。结论:儿童成长中应用儿童健康干预效果显著,不仅可有效促进儿童生长发育,同时可对营养性疾病发挥良好的预防作用,这种干预措施具有较高的临床使用价值,值得推广。

生物反馈训练辅助治疗梗阻性便秘对粪便性状、排便时间及排便频度的影响

目的:探讨生物反馈训练辅助治疗梗阻性便秘患者对粪便性状、排便时间与排便频度的影响。方法:选取我院收治的90例梗阻性便秘患者,根据随机数字表法分为3组,A组接受常规治疗,B组于常规治疗基础上进行固定式生物反馈训练(FBF),C组于常规治疗基础上进行自适应式生物反馈训练(ABF),比较3组治疗前后肛直肠功能、粪便性状、排便时间、排便频度和临床疗效。结果:治疗后,直肠肛门压力梯度:A组B组>C组(P<0.05),B组与C组肛管静息压、直肠肛门抑制反射阈值显著小于A组(P<0.05),且肛管松弛率显著大于A组(P<0.05);C组粪便性状4~7型占比明显高于其余两组(P<0.05),且B组4~7型占比明显高于A组(P<0.05);排便时间:A组>B组>C组(P<0.05),排便频度:A组<B组<C组(P<0.05);C组总有效率显著高于A组与B组(P<0.05),结论:生物反馈训练尤其是ABF可有效改善梗阻性便秘患者肛直肠功能,在改善粪便性状、缩短排便时间、增加排便频度上具有明显优势,可获得更好的临床疗效。

皮肤癌细胞的5-氨基酮戊酸光动力效应研究

目的研究ALA-PpⅨ在皮肤癌细胞中的药代动力学规律,分析ALA-PDT对皮肤癌细胞的光动力作用机制。方法利用荧光光谱技术测量皮肤癌细胞A431和A375的ALA-PpⅨ的荧光强度。利用激光共聚焦显微技术研究ALA-PpⅨ在皮肤癌细胞中的分布。用倒置相差显微镜观察ALA-PDT作用后细胞的形态学变化。使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)比色法测定ALA-PDT后细胞的存活率。结果两种皮肤癌细胞内ALA-PpⅨ的含量随着ALA浓度的增大而增加,当ALA浓度为0.6 mM时,ALA-PpⅨ的含量已基本达到饱和,0.6 mM为最佳的药物孵育浓度。给予细胞0.6 mM ALA孵育4 h后,检测到ALA-PpⅨ弥散分布于两种皮肤癌细胞的胞浆内和细胞膜上。两种细胞经ALA-PDT后的形态发生显著变化。在光剂量增加到1.74 J/cm2时,A431和A375细胞的存活率均下降到25%以下。结论两种皮肤癌细胞吸收ALA后合成PpⅨ的特性没有显著差异。在相同孵育时间条件下,A431合成PpⅨ的含量比A375高。A431和A375对ALA-PpⅨ的最佳药物孵育浓度为0.6 mM。ALA-PDT对两株皮肤癌细胞均有明显的抑制作用,A431对ALA-PDT更敏感。

自适应式与固定式生物反馈训练对出口梗阻型便秘患者肛直肠功能和心理状态的影响

目的:探讨自适应式与固定式生物反馈训练对出口梗阻型便秘(OOC)患者肛直肠功能和心理状态的影响。方法:选取2017年4月~2019年12月期间晋城大医院收治的OOC患者98例,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=49,固定式生物反馈训练)和研究组(n=49,自适应式生物反馈训练),比较两组患者疗效、肛直肠功能、排便次数、排便困难评分和心理状态。结果:研究组治疗8周后的临床总有效率93.88%(46/49),高于对照组的77.55%(38/49)(P<0.05)。两组治疗8周后排便次数增加,排便困难评分降低(P<0.05),研究组治疗8周后排便次数多于对照组,排便困难评分低于对照组(P<0.05)。两组治疗8周后直肠肛门抑制反射阈、肛管静息压均较治疗前下降,模拟排便时直肠肛管压力梯度较治疗前升高(P<0.05)。两组治疗8周后焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)评分均较治疗前下降,且研究组低于对照组(P<0.05)。结论:与固定式生物反馈训练相比,自适应式生物反馈训练可获得与之效果相当的肛直肠功能改善程度,并可进一步减轻患者症状及改善心理状态,疗效显著。

8号四体合并t(9;11)(p22;q23)的急性髓系白血病一例

患儿女,2岁10个月,2016年3月以"发热8天,面色苍白3天"为代主诉入院。查体:体温38.4℃,心率94次/min,血压88/50 mmHg。外周血常规:白细胞计数2.89×109/L,中性粒细胞15.5%,淋巴细胞83.7%,单核细胞0.2%,嗜酸性粒细胞0.6%,血红蛋白67.0 g/L,血小板计数134×109/L。血液生化检查:血清白蛋白34.6 g/L,谷丙转氨酶112 U/L,谷草转氨酶68 U/L,乳酸脱氢酶925 U/L(正常参考值:109~245 U/L),羟丁酸脱氢酶699 U/L(正常参考值:72~182 U/L)。腹部彩超显示肝、脾肿大。骨髓形态学检查可见有核细胞增生明显活跃(图1),原幼单核细胞占95.0%。MPO阳性率15%,积分30。α-NAE染色阳性率95%,积分325;α-NAE+NaF阳性率85%,积分210。NAS-DCE染色阳性率42%,积分42。

九例近四倍体/四倍体核型骨髓增生异常综合征患者的遗传学及临床特征分析

目的探讨近四倍体/四倍体核型(near-tetraploidy/tetraploidy karyotype,NT/T)骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者的遗传学及临床特征。方法对1576例初诊MDS患者进行染色体核型分析,筛选出细胞核型为NT/T的MDS患者,后用荧光原位杂交技术检测四倍体细胞比例,分析患者骨髓细胞形态学和治疗情况。结果NT/T在MDS患者中较罕见,在1576例初诊MDS病例中筛出9例NT/T-MDS,检出率为0.57%。9例NT/T-MDS患者中,8例NT/T-MDS不携带染色体结构异常,1例NT/T-MDS为复杂核型。NT/T-MDS患者骨髓细胞除典型MDS细胞学形态外,还呈现出原始细胞胞体较大、胞浆丰富、部分细胞呈双细胞核、细胞核轮廓不规则等多倍体细胞特点。1例NT/T-MDS患者放弃治疗,另8例NT/T-MDS患者经过治疗,1例患者完全缓解,1例部分缓解,3例患者未缓解,3例向急性髓系白血病转化。结论NT/T-MDS较罕见,具有独特的细胞形态学特征;一般情况下,NT/T-MDS患者预后较差,但不能将NT/T简单的划为高危组,要视其是否携带有特殊染色体结构异常而定。