小鼠β趋化因子受体CCR_5基因的克隆

目的：克隆小鼠β趋化因子相关的受体并研究其表达。方法：使用共同引物用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔巨噬细胞的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中扩增出一０．５ｋｂｃＤＮＡ，再根据其序列，设计一特异引物，用ＭａｒａｔｈｏｎＰＣＲ法扩增得一２．８ｋｂｃＤＮＡ，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ方法检测分析该基因，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ方法分析其表达。结果：成功克隆出小鼠ＣＣＲ５ｃＤＮＡ，其开放阅读框为１０６５ｂｐ，编码３５５个氨基酸，与人巨噬细胞炎性趋化蛋白５受体（ｈｕＭＩＰ－５Ｒ）同源性为８１％，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ结果显示该基因为单拷贝，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ结果显示小鼠巨噬细胞、脾脏等有表达。结论：克隆得到小鼠ＣＣＲ５基因，可作为研究ＨＩＶ－１感染机制及ＡＩＤＳ治疗有价值的实验模型。

小鼠CCR5基因在活体内表达受迟发型超敏反应的调节

趋化因子(chemokine)在机体的免疫监视和慢性炎症反应中起着重要作用。β-趋化因子受体5(CCR5)是巨噬细胞嗜性(M-tropic)HIV-1进入靶细胞的一个重要辅助因子。作用在成功克隆一新的趋化因子受体5(muCCR5)中研究了该基因在小鼠活体内的表达。结果表明,muCCR5 cDNA全长2888 bp。

转化生长因子β1对鼠造血祖细胞产生树突状细胞的调控作用

目的研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对造血祖细胞（ＨＰＣ）产生树突状细胞（ＤＣ）的调控作用及其分子机理。方法分离高纯度小鼠骨髓Ｌｉｎ、Ｃｋｉｔ＋、ＨＰＣ，经粒细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、干细胞因子（ＳＣＦ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）培养，诱导产生ＤＣ。采用流式细胞仪、逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和同种异基因混合淋巴细胞反应（ＡｌｏＭＬＲ），分析ＴＧＦβ１对ＤＣ产生的调节作用及其分子机理。结果ＴＧＦβ１显著抑制ＤＣ前体细胞的产生和成熟ＤＣ的分化，同时ＴＧＦβ１抑制主组织相容性抗原（ＭＨＣⅡ）类抗原活化转录因子（ＣＩＴＡ）基因的转录和ＭＨＣⅡ类抗原与协同刺激分子ＣＤ８６抗原的表达。结论ＴＧＦβ１介导的免疫抑制作用与其抑制ＤＣ的分化及功能成熟相关。