小鼠卵巢异体不同部位无血管吻合移植后的血管重建及对促性腺激素的反应

目的探讨小鼠卵巢不同移植部位无血管吻合移植后的血管重建及对促性腺激素的反应。方法将成年ICR小鼠的半卵巢分别移植到异体去势小鼠卵巢囊内、肾被膜下、背部肌肉内和颈部皮下,术后120h受体鼠及同批次未做移植鼠腹腔注射10 IU的孕马血清促性腺激素(PMSG),注射48h后取出卵巢;以同批次未做移植鼠作为对照组。通过卵巢组织HE染色观察卵泡形态并作卵泡分类计数;免疫组化检测卵巢组织Ki67、CD34和MVH的表达,观察卵巢内细胞增殖、卵巢内新生血管生成、雌性生殖干细胞增殖分化的情况。结果移植组每高倍视野各级卵泡数及Ki67阳性表达率均低于对照组(P均<0.01),但卵巢囊内移植组Ki67与对照组接近,间质细胞Ki67阳性表达率各移植组低于对照组(P均<0.01)。闭锁卵泡数以颈部皮下移植组的最多(P<0.01),背部肌肉内移植组闭锁卵泡最少(P<0.01)。除卵巢囊内移植组的新生血管与对照组相似外,其他异位移植组新生血管数量均增加,以背部肌肉内移植组最高(P<0.01)。结论卵巢囊内的卵巢原位移植可维持最佳的卵泡存活及对促性腺激素的反应,异位移植点较好的血供重建及卵泡生存则依次为肾被膜下、背部肌肉内及皮下移植。

小鼠黄体血管中周细胞的动态变化及调控因素研究

目的研究血管周细胞在小鼠黄体血管新生及成熟过程中的动态变化及其调控因素,阐明黄体血管结构的变化规律。方法对21日龄小鼠腹腔注射促性腺激素(PMSG,HCG)促排卵,建立黄体生成模型,分别于注射HCG后20h(黄体早期,H20)、48h(黄体发展期,H48)、72h(黄体中期,H72)、96h(黄体晚期,H96)收取卵巢组织,利用激光共聚焦技术检测血管密度(血管内皮细胞marker CD31)、成熟度(周细胞marker Desmin);通过qPCR及免疫荧光检测血管新生关键调控因子(VEGF、HIF1-α、ANGPT-1及ANGPT-2)的表达和分布。结果在H20阶段,血管内皮细胞和周细胞进入颗粒细胞层,部分周细胞在内皮细胞前端;VEGF表达开始上升,HIF1-α表达上调,ANGPT-1/ANGPT-2的比值增加。在H48时,血管密度达最大,有周细胞覆盖,VEGF和HIF1-α达最高,ANGPT-1/ANGPT-2的比值达最高,与其他时间组比较差异有统计学意义(P<0.0001)。在H72时,血管开始退化,血管内皮细胞的减少先于周细胞的减少;HIF1-α和VEGF表达下降,ANGPT-1/ANGPT-2的比值下降,并在H96时降至最低。结论黄体早期,周细胞伴随血管内皮细胞爬行进入黄体,引导血管新生;发展期,周细胞促进血管成熟稳定;中、晚期,周细胞与血管内皮细胞一起退化;且黄体血管结构组成的变化受HIF1-α-VEGF通路和ANGPT1/ANGPT2的协同调控。