小鼠抗棉铃虫硫酸酯酶(HaSulf1)多克隆抗体的制备与鉴定

目的原核表达棉铃虫硫酸酯酶1(HaSulf1)蛋白,制备其多克隆抗体。方法构建原核表达载体,诱导表达,用镍柱纯化重组蛋白,注射免疫小鼠。采血后用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性。结果获得重组质粒,诱导表达得到融合蛋白并成功纯化。ELISA实验检测获得的多克隆抗体效价最高可达到1∶819200。Western blot结果显示该抗体能与体外表达重组蛋白及棉铃虫体内的天然硫酸酯酶结合。结论原核表达获得重组HaSulf1蛋白并制备了特异性的小鼠多克隆抗体。

鳞翅目昆虫中肠Bt杀虫蛋白受体研究进展

杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICPs;含有Cry和Cyt 2大家族)和营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal proteins,Vips)等Bt杀虫蛋白可有效防治鳞翅目害虫,其中Cry应用最广泛。然而,一些地区的鳞翅目害虫已对Bt杀虫蛋白产生了抗性。目前,普遍认为鳞翅目昆虫中肠受体与Bt杀虫蛋白结合能力的改变是导致其对Bt杀虫蛋白产生抗性的最主要因素。在鳞翅目昆虫中,Cry受体是研究得最为透彻的Bt受体,已经被证实的有氨肽酶N、钙黏蛋白、碱性磷酸酶和ABC转运蛋白等。Vips杀虫蛋白类与鳞翅目昆虫中肠受体的结合方式与Cry杀虫蛋白相似,但结合位点与Cry杀虫蛋白不同。本文从结构特点、作用机制及不同鳞翅目昆虫间的表达差异等角度对以上4种鳞翅目昆虫中肠Bt受体进行了综述,并提出如下展望:(1)以棉铃虫或小菜蛾等鳞翅目昆虫为农业害虫模式生物进行深入研究,阐明其对Bt杀虫蛋白产生抗性的机制,为研究其他鳞翅目农业害虫对Bt杀虫蛋白产生抗性的机制提供理论借鉴;(2)鉴于在不同鳞翅目昆虫间,中肠Bt受体与Bt杀虫蛋白结合存在差异,且同一Bt杀虫蛋白与鳞翅目昆虫Bt受体并不专一性结合,Bt杀虫蛋白多基因组合策略是较为有效的田间鳞翅目昆虫防治策略,是今后一段时间内Bt杀虫蛋白应用的发展方向。

棉铃虫田间种群Bt抗性监测方法综述

迫于苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)毒素的选择压力,棉铃虫(Helicoverpa armigera)田间种群对Bt毒素产生了抗性。为了研究棉铃虫田间种群Bt抗性,研究者们开发出了一系列棉铃虫抗性监测技术。本文介绍了用于棉铃虫Bt抗性监测常用的生物测定法和分子检测法的原理、应用及优缺点等。虽然目前棉铃虫田间种群Bt抗性监测多采用以F_(1)代筛选法和F_(2)代筛选法为代表的生物测定法,但分子检测法正以其优势在棉铃虫Bt抗性检测中占据越来越重要的位置。本综述期望为读者选择合适的棉铃虫Bt抗性监测方法提供参考和建议。